SF126人脑瘤细胞

SF126人脑瘤细胞系源自一位50岁女性患者的星形胶质细胞瘤组织，起源于额叶肿瘤。SF126细胞用于非致瘤性人胶质母细胞瘤模型研究。

SF126人脑瘤细胞特性特征

• 多倍体: SF126细胞在培养中表现出多倍体特性

• 胶质标志物: 缺乏胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和谷氨酰胺合成酶的表达
  

• 间充质标志物: 在早期传代中显示层粘连蛋白和纤维连接蛋白的阳性表达

• 特异性结合: SF126细胞可以特异性地结合β-内啡肽

• III型前胶原: 通过III型前胶原的免疫染色得到证实，进一步表征了它们的间充质性质

• 非致瘤性: SF126细胞在无胸腺小鼠中表现为非致瘤性

• 胶原纤维形成: SF126细胞能够在体外形成胶原纤维

SF126人脑瘤细胞参数表

SF126人脑瘤细胞培养教程

传代步骤

• 吸出培养基: 吸除培养瓶中的旧培养基。

• 润洗细胞: 用3-4 ml PBS轻轻润洗SF126细胞10-20秒，然后吸走。

• 消化细胞: 加入1 ml左右胰酶，轻轻晃动使其均匀覆盖SF126细胞。

• 培养箱消化: 将培养瓶放入37℃培养箱消化。

• 终止消化: 当SF126细胞间隙变大但未完全脱落时，加入2-3 ml完全培养基终止消化。

• 离心细胞: 混匀SF126细胞，900 rpm离心3-5分钟，弃去上清液。

• 重悬细胞: 加入新的完全培养基重悬SF126细胞。

• 分瓶培养: 按1:2到1:4的比例分配到新的培养瓶中。

• 补充培养基: 补足培养基，将培养瓶放回培养箱。

注意事项

• 细胞贴壁: SF126细胞贴壁较弱，消化时间需严格控制。

• 胰酶消化时间: 不同品牌胰酶消化时间差异大，需要根据具体情况调整。

• 操作轻柔: 吹打SF126细胞时动作要轻柔，避免产生过多气泡。

• 黑点处理: 培养过程中可能出现黑点，需参考操作说明处理。

冻存方法

• 冻存液配方:92% FBS + 8% DMSO或92% 完全培养基 + 8% DMSO

• 细胞密度: 200-300万/ml，每管1 ml。

• 细胞消化离心: 消化离心后获得SF126细胞沉淀。

• 重悬细胞: 加入冻存液轻轻重悬SF126细胞。

• 转移冻存管: 迅速转移到标记好的冻存管中。

• 程序降温: 使用程序降温盒或特定温度梯度冷冻SF126细胞。

• 液氮保存: 最终将SF126细胞转入液氮中长期保存。

质量控制

• 支原体检测: 定期检查SF126细胞支原体，结果应为阴性。

• 内毒素检测: 监测SF126细胞内毒素含量，应≤3 EU/mL。

• 细胞形态: 观察SF126细胞形态，SF126细胞应呈现成纤维细胞样。

细节注意事项

• 培养基选择与准备：使用推荐的完全培养基，如DMEM基础培养基，添加10% FBS和1% P/S。确保培养基新鲜并预热至37℃，避免温度骤变对SF126细胞造成应激。

• 细胞贴壁与消化：SF126细胞贴壁较弱，消化时间需严格控制，通常使用胰酶消化时间较短。在消化过程中，观察SF126细胞间隙变大但未完全脱落时，立即加入完全培养基终止消化。

• 传代与换液：传代比例一般为1:2到1:4，具体视SF126细胞生长速度和密度决定。每2-3天换液一次，确保SF126细胞有足够的营养和适宜的生长环境。

• 细胞状态监测：定期镜检SF126细胞，拍照记录细胞状态，观察SF126细胞形态是否正常，是否呈现成纤维细胞样。SF126细胞状态不佳时，及时调整培养条件或更换培养基。

• 支原体与内毒素检测：定期进行支原体检测，确保SF126细胞结果为阴性。监测SF126细胞内毒素含量，应≤3 EU/mL，以防止SF126细胞受到污染。

• 环境控制：培养温度保持在37℃，CO2浓度为5%，湿度保持在饱和状态。避免频繁开关培养箱门，以减少温度和CO2浓度的波动对SF126细胞的影响。

培养环境的稳定性

• 培养箱维护：定期校准培养箱的温度和CO2浓度，确保其稳定性。定期清洁培养箱，防止污染源的积累。

• 培养基的质量控制：使用经过验证的培养基和试剂，确保其无污染。每次使用前检查培养基的颜色和透明度，避免使用变质的培养基，以确保SF126细胞的生长环境。

• 操作规范：在无菌环境下进行SF126细胞操作，使用无菌器具和耗材。操作过程中尽量减少SF126细胞暴露在外界环境的时间，迅速完成传代和换液操作。