
H4细胞(人脑神经胶质瘤细胞)
- 来源:脑组织
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:H4细胞具有修复MNNG(N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍)损伤5型腺病毒的能力
H4人脑神经胶质瘤细胞系是1973年从一名37岁患有神经胶质瘤的白人男性大脑中分离的上皮细胞系。
H4细胞具有超三倍体特性,模式染色体数为73,范围=63到78,占26%的细胞中出现,但也有24%的细胞展示出75条染色体。少数细胞(0.4%)展示出更高的染色体倍性。
在所有检查的中期细胞中,至少有16条标记染色体是共同的,包括成对的del(2)(p2209)和del(9)(p22),以及单条der(14)t(1;14)(p22;q22)、del(3)(p2501)、del(5)(p13)、del(7)(q11)等。N7和N21在每个细胞中出现四个或更多拷贝。大多数细胞含有两条X染色体和两条Y染色体。
H4细胞特性特征
H4细胞具有修复MNNG(N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍)损伤5型腺病毒的能力
同工酶表达:AK-1,1;ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,2;Me-2,0;PGM1,1-2;PGM3,1
H4细胞致瘤特性已被屏蔽,接种动物通常不产生肿瘤结节
在免疫抑制小鼠中不致瘤
H4细胞适合作为转染宿主、可用于神经科学研究
H4细胞参数表
细胞名称 | H4细胞(人脑神经胶质瘤细胞) |
英文名称 | H4; H-4 |
种属 | 人 |
组织来源 | 脑组织 |
年龄/性别 | 37岁男性 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁 |
建系时间 | 1973年 |
培养基 | DMEM高糖 + 10% FBS + 1% P/S |
培养环境 | 37℃;CO2浓度 5% |
换液频率 | 每周2~3次 |
传代比例/周期 | 1:2 或 1:4 / 2-3天 |
传代方法 | 消化3分钟 |
冻存液 | 基础培养基 + 5% DMSO + 10% FBS |
致瘤性 | 致瘤特性已被屏蔽,一般不产生肿瘤结节 |
特殊能力 | 具有修复MNNG损伤5型腺病毒的能力 |
无菌检测 | 细菌、酵母、支原体检测均为阴性 |
同工酶 | AK-1, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 2; Me-2, 0; PGM1, 1-2; PGM3, 1 |
应用 | 神经科学研究,适合作为转染宿主 |
培养教程
H4人脑神经胶质瘤细胞培养教程
H4细胞复苏
从液氮中取出冻存的H4细胞,迅速放入37℃水浴中解冻,轻轻摇晃使其快速融化。
解冻后立即将H4细胞悬液转移至含有10 ml预热的培养基的离心管中,1000 rpm离心5分钟。
吸去上清,加入10 ml新鲜培养基,轻轻吹打混匀。
将H4细胞悬液转移至T25培养瓶中,置于37℃、5% CO2培养箱中培养。
H4细胞培养
换液:每2-3天换液一次,即使培养基没有变黄。换液时轻轻侧过培养瓶,不要使H4细胞飘起来,用巴氏吸管轻轻吸取部分上清弃去,补加等体积的新鲜培养基继续培养。
传代比例:1:2或1:4;传代周期:2-3天
吸去旧培养基,加入适量的PBS洗涤H4细胞。
吸去PBS,加入适量的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化1-3分钟,观察H4细胞是否脱落。
轻轻敲打培养瓶,使H4细胞完全脱落,加入新鲜培养基终止消化。
将H4细胞悬液转移至离心管中,1000 rpm离心5分钟。
吸去上清,加入新鲜培养基重悬H4细胞,按比例分装至新的培养瓶中。
H4细胞冻存
冻存液配方:基础培养基 + 5% DMSO + 10% FBS
收集对数生长期的H4细胞,1000 rpm离心5分钟。
吸去上清,加入冻存液重悬H4细胞,细胞密度为1×10⁶ cells/ml。
将H4细胞悬液分装至冻存管中,每管1 ml。
逐步降温:先置于4℃ 30分钟,然后转移至-80℃ 4小时,最后转移至液氮中长期保存。
注意事项
H4细胞对氧气、密度和养分非常敏感,需保持勤换液和传代,避免H4细胞过度密集。
培养基尽量现配,配好的培养基最好在两周内用完,因为叶酸不稳定易分解。
换液时,避免吹打过度,H4细胞对离心和吹打比较敏感,离心和反复吹打会影响H4细胞状态。
常见问题及解决方法
H4细胞不贴壁:检查培养基成分和培养条件,确保胰蛋白酶消化时间适当。
H4细胞生长缓慢:检查CO2浓度、培养温度和培养基是否新鲜。
H4细胞污染:定期进行无菌检测,确保操作环境和耗材的无菌性。
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Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 18,25 |
D3S1358 | 17,18 |
D5S818 | 10,12 |
D7S820 | 8,11 |
D8S1179 | 9,12 (ATCC=HTB-148; CCRID) |
14 (CLS=300184) | |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 14,16 |
D19S433 | 12,14 |
D21S11 | 30,31 |
FGA | 19,25 |
Penta D | 10,12 |
Penta E | 5,12 |
TH01 | 7,9 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 14,18 |
参考文献
- 重庆市主城区长江和嘉陵江水中有机污染物对H4IIE细胞CYP1A1表达的诱导 卫生研究 > 2008年5期
- 摘要:...点为代表,研究2004~2005年度重庆市水源水中有机污染物对H4IIE细胞细胞色素...
- 酒精性大鼠H4IIE细胞损伤模型中线粒体的变化与意义 《延边大学》 2018年
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