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原代细胞和细胞类型
原代细胞培养更接近于体内细胞的生理状态，并能生成更多代表生命系统的相关数据。原代培养物由从新鲜活体生物体中提取的细胞组成，并在体外培养生长。原代细胞可根据其分离的属以及物种或组织类型进行分类。每种哺乳动物组织类型均来自由外胚层、内胚层和中胚层组成的胚胎胚层，这些胚层分化为多种细胞类型，这些细胞类型组成三级结构，例如皮肤、肌肉、内脏器官、骨骼和软骨、神经系统、血液和血管。1 原代细胞培养中最常见的细胞类型是上皮细胞、成纤维细胞、角质形成细胞、黑素细胞、内皮细胞、肌肉细胞、造血干细胞和间充质干细胞。
原代细胞的基本特性
一旦适应了体外培养条件，原代细胞就会经历有限次数的细胞分裂，然后进入衰老阶段。由于海弗利克极限、营养需求和培养条件，以及操作和传代培养所需的专业知识，原代细胞培养物可以传代的次数很少。相比之下，通过病毒、hTERT 或致瘤转化而永生化的细胞系通常会经历无限的细胞分裂，并具有无限的寿命。而且，与在含有 10% 至 20% 血清的培养基中培养的肿瘤细胞系不同，原代细胞培养物要求苛刻，需要优化的生长条件，包括添加组织特异性细胞因子和生长因子，以便在无血清或低血清生长培养基中繁殖。
原代细胞的优势
原代细胞培养通常用作临床前和调查性生物学研究的体外工具，例如细胞间和细胞内研究、发育生物学以及癌症、帕金森病和糖尿病等疾病机制的了解。从历史上看，研究人员在与组织功能相关的研究中使用了永生化细胞系；而使用含有严重突变和染色体异常的细胞系无法提供正常细胞表型和早期疾病进展的良好指标。原代细胞在体外仅存活很短的时间，已成为其来源组织（体内）主要功能成分的最佳代表。
原代细胞的分离
外周血细胞的分离和纯化可通过差速离心或磁珠正向分选轻松实现。另一方面，从原代组织中分离纯细胞群通常很难进行，需要了解如何将细胞层分离成仅包含一种主要细胞类型的悬浮液。
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