细胞培养基品种大全

细胞培养基是盐、碳水化合物、维生素、氨基酸、代谢前体、生长因子、激素和微量元素的复杂混合物。不同细胞系对这些成分的要求各不相同,这些差异是造成培养基配方种类繁多的原因之一。碳水化合物主要以葡萄糖的形式供应。在某些情况下,葡萄糖被半乳糖取代,以减少乳酸的积累,因为半乳糖的代谢速度较慢。其他碳源包括氨基酸(特别是 L-谷氨酰胺)和丙酮酸。
除了营养物质外,培养基还有助于维持培养系统中的 pH 值和渗透压。pH 值由一个或多个缓冲系统维持;最常见的是 CO 2 /碳酸氢钠、磷酸盐和 HEPES。血清也会缓冲完全培养基。将 pH 指示剂酚红添加到培养基中,以比色法监测 pH 值的变化。常用的培养基包括:
Eagle 最低必需培养基(EMEM) 是最早被广泛使用的培养基之一,由 Harry Eagle 从他早期的简单基础培养基 (BME) 中配制而成。BME 是为培养小鼠 L 细胞和 HeLa 细胞而开发的。随着时间的推移,EMEM 配方出现了许多针对不同应用的变体。由于 EMEM 是一种简单的培养基,因此通常会添加其他补充剂或更高浓度的血清。
杜氏改良伊格尔培养基(DMEM) 的氨基酸浓度大约是 EMEM 的两倍,维生素含量是 EMEM 的四倍,此外还含有硝酸铁、丙酮酸钠和一些补充氨基酸(但并非全部为非必需氨基酸)。原始配方含有 1,000 mg/L 葡萄糖,但在更常用的变体中,该含量增加到 4,500 mg/L。
Iscove 改良型杜氏培养基(IMDM) 专为淋巴细胞和杂交瘤的生长而配制。与 DMEM 相比,它含有更多的氨基酸、维生素和无机盐。硝酸钾取代了硝酸铁。它还含有 HEPES 和硒。
Hybri-Care 培养基是 DMEM 和 NCTC 135 培养基的组合和改良,添加了胰岛素、草乙酸和 HEPES。它基于 David H. Sachs 及其合作者5用于繁殖杂交瘤和其他苛刻细胞系的配方。
McCoy's 5A和RPMI-1640是由纽约州布法罗市的罗斯威尔帕克纪念研究所 (RPMI) 开发的。McCoy's 5A最初用于培养 Novikoff 肝癌细胞,并将支持原代培养物的生长。
RPMI-1640 是 McCoy's 5A 的改良版,专为长期培养外周血淋巴细胞而开发。RPMI-1640 可支持多种悬浮细胞的生长以及大量单层细胞的生长。
Ham 营养混合物最初是为了支持中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞的克隆生长而开发的。与 EMEM 一样,原始配方经过多次修改,包括 Ham 的 F-12 培养基,这是一种比原始 F-10 更复杂的配方,适用于无血清繁殖。
Kaighn 对 Ham's F-12 的改良(Ham's F-12K)旨在支持原代细胞在有或无血清条件下的生长和分化。F-12K 除了对 F-12 配方进行其他改良外,还增加了氨基酸、丙酮酸、生物素、钙、镁、腐胺和酚红的含量。
DMEM/F12 培养基是杜氏改良 EMEM 和 Ham F-12 的 1:1 混合物。它是一种极其丰富和复杂的培养基,可支持血清和无血清配方中多种细胞类型的生长。
Leibovitz 的 L-15 培养基专为在教学实验室或收集活检样本时无需 CO 2培养而配制。标准碳酸氢钠/CO 2缓冲系统被磷酸盐缓冲液、游离碱氨基酸、高浓度丙酮酸钠和半乳糖的组合所取代。只要培养容器中的空气与培养箱中的空气不发生交换(即烧瓶盖紧密关闭),细胞培养物就可以在 CO 2培养箱中使用 L-15 培养基进行培养。
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