
Hs 815.Pl人胎盘细胞系(有限细胞系)
- 来源:人胎盘
- 细胞特征:成纤维样,贴壁生长
- 培养基:DMEM+10% FBS+10% P/S
- 其他:表达成纤维细胞相关分子
Hs 815.Pl 是一种来源于人类胎盘组织的有限增殖型成纤维细胞系,是通过原代培养分离获得,具有典型的成纤维样贴壁生长特性,Hs 815.Pl细胞形态呈梭形或细长状,排列有一定方向性。
Hs 815.Pl细胞系因其有限传代能力,适用于短期体外实验,在研究妊娠相关疾病机制(如胎盘功能障碍、胎盘发育异常等)方面具有重要模型价值。
Hs 815.Pl人胎盘细胞系特性特征
作为成纤维样细胞,Hs 815.Pl 细胞表达成纤维细胞典型标志物,如纤维连接蛋白(fibronectin)、胶原蛋白(collagen)等细胞外基质相关蛋白。
Hs 815.Pl细胞具有贴壁生长特性,表面表达整合素(integrins)等细胞黏附分子,支持其在培养基中的附着和扩展。
虽无公开详细的基因表达谱,但作为有限细胞系,Hs 815.Pl细胞基因表达稳定,适合用于基因功能研究和药物筛选。
Hs 815.Pl细胞可能表达胎盘相关的特异性分子,来源于胎盘,适合研究胎盘功能和疾病机制
Hs 815.Pl人胎盘细胞系参数表
细胞名称 | Hs 815.Pl人胎盘细胞系(有限细胞系) |
英文名称 | Human placental cells ,Hs 815.Pl |
细胞来源 | 人体胎盘组织,原代分离的成纤维样贴壁细胞 |
细胞形态 | 成纤维样,贴壁生长,纤维状形态 |
细胞系类型 | 有限细胞系 |
细胞用途 | 仅限科研使用,胎盘生物学、细胞生理学、药物筛选、毒理学等基础研究 |
培养基 | DMEM培养基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青链霉素(P/S) |
培养条件 | 温度:37℃;二氧化碳浓度:5%;空气:95%;湿度70%-80% |
传代比例 | 1:2(根据细胞生长情况可调整,范围1:2至1:5) |
传代消化 | 0.25%胰蛋白酶-EDTA,37℃消化1-2分钟,观察细胞皱缩变圆后终止消化 |
细胞密度 | 传代时细胞密度达到80%-90%时进行传代 |
细胞接收处理 | 活细胞瓶壁用75%酒精消毒,37℃培养箱静置2-4小时,显微镜下观察细胞贴壁及生长状态 |
运输用培养基 | 不宜用于细胞培养,收到后应更换新鲜完全培养基 |
冻存液 | 90%完全培养基(或血清)+ 10% DMSO,现用现配 |
冻存密度 | 1×10^6至1×10^7个活细胞/mL |
冻存方法 | 程序降温法,-80℃过夜后转入液氮罐长期保存 |
运输方式 | 冻存细胞干冰运输,活细胞T25瓶常温运输 |
保存条件 | 冻存细胞-80℃短期保存或液氮长期保存,活细胞37℃培养箱内培养 |
细胞标志物 | 表达成纤维细胞相关蛋白(纤维连接蛋白、胶原蛋白)、整合素等细胞黏附分子 |
基因表达 | 基因表达稳定,适合基因功能研究和药物筛选;可能含胎盘特异性分子(具体谱系未公开) |
传代建议 | 收到细胞后建议进行1-3代传代培养,稳定后冻存备份细胞种子以保证实验稳定性 |
生物安全 | 细胞操作需在二级生物安全柜内进行,注意无菌操作和生物安全防护 |
传代次数限制 | 建议使用早期传代细胞,避免长期传代导致细胞特性改变 |
培养教程
Hs 815.Pl人胎盘细胞系(有限细胞系)培养教程
Hs 815.Pl细胞的复苏步骤
使用DMEM(高糖型)基础培养基,补加10%胎牛血清(FBS)及1%青链霉素(P/S),培养基需预热至37℃以利于细胞恢复生理状态。
将冻存的Hs 815.Pl细胞从液氮罐中迅速取出,立即置于37℃水浴锅中快速摇晃解冻(约1分钟内完成)。
解冻后立即转移至含5 ml预热完全培养基的15 ml无菌离心管中,轻轻混匀。
1000 rpm离心5分钟以去除DMSO残留。
弃去上清后,加入2 ml完全培养基轻轻重悬Hs 815.Pl细胞。
将细胞悬液接种于T25培养瓶中,置入37℃、5% CO₂培养箱静置培养。
24小时后更换新鲜培养基以去除死亡细胞,提高Hs 815.Pl细胞贴壁和增殖效率。
75%乙醇消毒瓶外壁,直接放入培养箱静置2-3小时后观察细胞贴壁情况,并及时更换培养基。
Hs 815.Pl细胞的传代操作
当Hs 815.Pl细胞生长至80%-90%汇合度时需及时传代,以维持其正常形态与活力。
弃去培养基,用无钙镁PBS清洗1次去除残余血清。
加入0.25%胰酶-EDTA(T25瓶约1 ml),置于37℃下消化1-2分钟,显微镜下观察细胞变圆。
细胞松散时立即加入等体积含FBS的培养基终止消化。
轻轻吹打形成单细胞悬液,转移至离心管中1000 rpm离心5分钟。
重悬于新鲜培养基中以备接种。
按1:2至1:5比例接种至新T25瓶,加入6–8 ml完全培养基。
将Hs 815.Pl细胞置入培养箱继续培养,并按需记录细胞密度和生长状态。
若发现悬浮细胞,需与消化细胞合并离心处理,避免Hs 815.Pl细胞流失。
Hs 815.Pl细胞的冻存步骤
使用90%胎牛血清或完全培养基 + 10% DMSO混合而成,现配现用以保持保护效果。
选择对数生长期的Hs 815.Pl细胞,状态饱满、无污染时操作。
传代消化后离心收集细胞,弃去上清液。
按1×10⁶~1×10⁷ cells/ml的密度,用冻存液重悬细胞。
分装入冻存管,做好标签记录。
冻存管置于程序降温盒中(每分钟降温约1℃),先放入-80℃冰箱过夜。
次日移入液氮罐中长期保存,确保Hs 815.Pl细胞的遗传稳定性和复苏率。
注意事项
所有操作须在无菌环境下进行,推荐在II级生物安全柜中完成。
解冻与冻存时务必快速、准确,避免温度波动影响Hs 815.Pl细胞活性。
冻存前应对Hs 815.Pl细胞进行2–3代稳定培养,确保其状态优良。
运输时使用的培养基不宜继续培养,应更换为新鲜完全培养基。
相关资料
- 永生化支气管上皮细胞
- 由于正常和患病原代支气管上皮细胞对数量有限、供体之间存在显著差异以及其有限的增殖能力,正常...
- 查看完整内容 >
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 12 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 8,10 |
D13S317 | 11,13 |
D16S539 | 11,12 |
TH01 | 6,9 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 14,16,18 |
参考文献
下一篇:没有了