
JEG3细胞系(人绒毛膜癌细胞系)
- 来源:胎盘病变;绒毛膜癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
- 其他:JEG-3细胞能够将类固醇前体转化为雌酮和雌二醇。
JEG-3细胞是一种超三倍体、克隆衍生、具有上皮形态的人类细胞系,源自Erwin Turner肿瘤的Woods菌株分离出的六个克隆衍生株系之一。
JEG-3细胞的染色体特征为超三倍体,模态染色体数目为71,发生率为34%,多倍体发生率为2.6%。常见的染色体异常包括t(4;11)(p15;q13)、i(13q)、t(10p15q)、del(18)(q21)及其他标记物。同时见到在一颗N14和两颗N22中可以看到巨大的卫星。N2、N5和N9有4个副本,N7、N13、N18、N21和X有一个副本。通过Q带检查检测到单个Y染色体。
JEG3细胞系特性
JEG-3细胞能够在裸鼠身上形成恶性肿瘤,模拟绒毛膜癌的病理特征。
JEG3细胞系表达人绒毛膜促性腺激素(hCG)、胎盘催乳素(绒毛膜体乳营养素)和黄体酮。
同工酶分析显示AK-1、ES-D、G6PD、GLO-I、PGM1和PGM3的特定异构型。
JEG-3细胞能够将类固醇前体转化为雌酮和雌二醇。
基因表达:人绒毛膜促性腺激素;人绒毛膜体乳营养素(胎盘催乳素);黄体酮
JEG3细胞系参数表
细胞系名称 | JEG3细胞系(人绒毛膜癌细胞系) |
细胞别称 | Jeg-3;JEG3;Jeg3;jeg3 |
细胞类型 | 超三倍体、克隆衍生的上皮形态人类细胞系 |
来源 | Erwin Turner肿瘤的Woods菌株中分离出的六个克隆衍生株系之一 |
疾病特征 | 绒毛膜癌 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
卫星染色体 | N14和两颗N22中可见巨大的卫星 |
多拷贝染色体 | N2、N5、N9有4个拷贝 |
单拷贝染色体 | N7、N13、N18、N21和X为单拷贝 |
Y染色体 | 通过Q带检查可检测到单个Y染色体 |
基因表达 | 人绒毛膜促性腺激素(hCG)、人绒毛膜体乳营养素(胎盘催乳素)、黄体酮 |
同工酶 | AK-1, 1;ES-D, 1;G6PD, B;GLO-I, 1-2;PGM1, 1;PGM3, 1-2 |
类固醇转化功能 | 能够将类固醇前体转化为雌酮和雌二醇 |
致瘤性 | 在裸鼠身上形成与绒毛膜癌一致的恶性肿瘤 |
倍增时间 | ~24-36小时 |
培养体系 | MEM+10% FBS+1% P/S |
配套培养基货号 | TCH-G417 |
传代比例 | 1:2-1:4,每2-3天换液一次 |
传代周期 | 48-72小时 |
培养条件 | 气相:95%空气+5% CO2,温度:37℃ |
冻存条件 | 60%基础培养基+30% FBS+10% DMSO,液氮储存 |
质量检测 | 细菌、真菌、支原体检测均为阴性 |
生物安全等级 | 1 |
支原体检测 | 无 |
保藏机构 | ATCC: HTB-36;BCRC: 60428;BCRJ: 0123;DSMZ: ACC-463;ECACC: 92120308 |
培养教程
JEG3人绒毛膜癌细胞系培养教程
细胞复苏
将含有1 mL JEG-3细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,时间控制在1-2分钟内。
解冻后迅速将JEG-3细胞悬液移入事先准备好的含有4 mL培养基的15 mL离心管中,轻轻混合均匀。
在1000 rpm条件下离心4分钟。
弃去上清液,加入1 mL培养基轻轻吹匀。
将所有JEG-3细胞悬液加入含有5 mL培养基的培养瓶中,或将JEG-3细胞悬液加入10 cm培养皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜。
第二天更换培养基并检查细胞密度。
细胞传代
当JEG-3细胞密度达到80%-90%时,弃去培养上清液。
用不含钙、镁离子的PBS润洗JEG-3细胞1-2次。
加入2 mL消化液(0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有JEG-3细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3分钟(视细胞情况而定)。
在显微镜下观察JEG-3细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加3 mL完全培养基终止消化。
轻轻打匀后将JEG-3细胞悬液移入无菌离心管中,在1000 rpm条件下离心5分钟,弃去上清液。
加入1-2 mL培养基轻轻吹匀。
将JEG-3细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含有8 mL培养基的培养瓶或培养皿中。
放入培养箱中继续培养。
细胞冻存
当JEG-3细胞生长状态良好时,收集JEG-3细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中。
在1000 rpm条件下离心4分钟,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行JEG-3细胞计数。
根据JEG-3细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度达到5×10^6~1×10^7 cells/mL,轻轻混匀。
每支冻存管加入1 mL JEG-3细胞悬液,做好标识。
将冻存管放入-80℃冰箱预冻24小时后,转入液氮储存。
记录冻存管位置以便下次取用。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,12 |
D1S1656 | 14,16 |
D2S441 | 14,15 |
D2S1338 | 24 |
D3S1358 | 15 (CLS=300222) |
15,16 (ATCC=HTB-36; CCRID; DepMap=ACH-001530; DSMZ=ACC-463; KCLB=30036; PubMed=33810901) | |
D5S818 | 10,11 |
D7S820 | 10,12 |
D8S1179 | 12 |
D10S1248 | 13,15 |
D12S391 | 17,24 |
D13S317 | 9,11 |
D16S539 | 13,14 |
D18S51 | 14 |
D19S433 | 13,15 |
D21S11 | 30 |
D22S1045 | 15 |
FGA | 23,24 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 8,12 |
SE33 | 15,25.2 |
TH01 | 9,9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 16 |
参考文献
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