Calu-3细胞培养常见问题

抗生素可以在Calu-3细胞的完整生长培养基中使用吗?
不建议在常规细胞培养中使用抗生素或抗真菌药物。长期使用抗生素或抗真菌药物可能掩盖轻度微生物或支原体污染的存在。此外,一些抗生素和抗真菌药物具有毒性,可能会影响某些细胞系的恢复和增殖。如果您确实选择在培养基中使用抗生素进行短期培养,建议使用最终浓度为50-100 I.U./ml青霉素和50-100μg/ml链霉素的青霉素-链霉素溶液(青霉素-链霉菌溶液)。
推荐用于传代培养Calu-3的胰蛋白酶-EDTA溶液的浓度是多少?
胰蛋白酶-EDTA溶液的浓度为0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53mM EDTA。推荐使用胰蛋白酶-EDTA溶液1X。
如何为Calu-3细胞制备完整的培养基?
Calu-3细胞成功地适应ATCC配制的Eagle’s Minimum Essential Medium(EMEM),该培养基补充有高质量血清胎牛血清(FBS)至10%的最终浓度。
500 mL EMEM
56 mL FBS
我的实验室使用Calu-3,一种源自胸腔积液的腺癌细胞系,网上的细胞遗传学数据表明,正常的17号染色体“缺失”。然而,我们发现位于17号染色体上的编码NHERF-1的基因在该系中强烈表达。网上资料为HTB-55提供的核型是否不正确?
当细胞系的核型报告“正常”染色体“缺失”时,通常意味着存在异常染色体。对Calu-3进行的核型分析显示该品系高度重排。如果不太可能的话,很有可能在整个基因组中发现17号染色体的部分易位,这将解释你在17号染色体上发现的NHERF-1的阳性结果。事实上,如果基因位于染色体上因易位或插入而复制的部分,那么它可能会被细胞过度表达。HTB-55中17号染色体的检测将需要17油漆探针或光谱核型(SKY),而目前未对此品系进行检测。
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