
calu-1细胞(人肺癌细胞)
- 来源:肺;肿瘤分期:Ⅲ期;疾病:表皮瘤;取材转移灶:肋膜
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:McCoy's 5a+10% FBS+1% P/S
- 其他:抗原表达:血型A;Rh+;HLA A10、A11、B15、Bw35
Calu-1人肺癌细胞是一种表现出上皮形态的细胞系,从一名47岁的患有表皮样癌的白人男性患者的肺中分离。Calu-1细胞主要用于癌症研究、毒理学。
Calu-1细胞染色体数目为亚三倍体,模态染色体数目为62,存在7个频繁出现的标记物,包括M1(每个细胞两个拷贝),M6和M7在大多数细胞中发现;M2和M3、M4和M5分别互斥存在,即每个细胞中仅有M2或M3中的一个以及M4或M5中的一个。
Calu-1细胞系来源于男性,但通过QM带检查未检测到Y染色体。
Calu-1细胞具有致瘤性,在裸鼠身上形成表皮样癌,在类固醇治疗的仓鼠中形成转移。
Calu-1细胞表现出血型A和Rh+抗原表达,并具有HLA A10、A11、B15、Bw35的抗原谱。同工酶分析显示其具有AK-1,1;ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,1-2;Me-2,1-2;PGM1, 1-2;PGM3,1的同工酶谱。
Calu-1细胞具有众多微绒毛、显著的粗面内质网(RER)、溶酶体和脂包含体,且不含有病毒颗粒。Calu-1细胞含有ras(H-ras和K-ras)癌基因。
calu-1细胞特性
Calu-1细胞源自一名47岁白人男性患者的肺鳞癌胸腔积液转移病灶。
上皮形态:表现出上皮细胞样的形态。
超微结构特征:包括大量微绒毛、突出的粗面内质网 (RER)、溶酶体、脂质内含物,无病毒颗粒。
分子特征:含有ras(H-ras)癌基因。
生物学特性:级性:亚三倍体,模态染色体数目为62。
染色体变异:2S组分出现率为14.2%,7个标记物频繁出现。
致瘤性:在裸鼠中能够形成表皮样癌。
转移性:在类固醇治疗的仓鼠中能形成转移。
抗原表达:血型A;Rh+;HLA A10、A11、B15、Bw35。
calu-1细胞参数表
细胞名称 | Calu-1(人肺癌细胞) |
别称 | CaLu-1, CALU-1, CALU 1, Calu 1, CALU1, Calu1 |
细胞货号 | SNL-278 |
来源 | 肺鳞癌;胸腔积液转移;47岁白人男性患者 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 贴壁生长 |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | 在裸鼠中形成表皮样癌;在类固醇治疗的仓鼠中形成转移 |
染色体特性 | 亚三倍体,模态染色体数目为62,2S组分出现率为14.2%,7个频繁出现的标记物。QM带检查未检测到Y染色体。 |
免疫学特征 | 抗原表达:血型A;Rh+;HLA A10、A11、B15、Bw35 |
同工酶 | AK-1,1;ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,1-2;Me-2,1-2;PGM1, 1-2;PGM3,1 |
分子特征 | 含有ras(H-ras)癌基因 |
超微结构特征 | 大量微绒毛、显著的粗面内质网 (RER)、溶酶体、脂质内含物,无病毒颗粒 |
培养基 | McCoy's 5A + 10% FBS + 1% P/S |
培养环境 | 37℃, 5% CO2, 饱和湿度 |
传代方法 | 1:2至1:6,每周2次 |
冻存条件 | 90%完全培养基+10% DMSO,液氮储存 |
倍增时间 | 37-50小时 |
推荐换液 | 每周2-3次 |
支原体检测 | 阴性 |
保藏机构 | ATCC(HTB-54) |
应用领域 | 3D细胞培养、癌症研究、高通量筛选、毒理学实验、转染宿主 |
培养教程
calu-1人肺癌细胞培养
传代步骤
细胞密度:当Calu-1细胞密度达到80%-90%时即可进行传代培养。
弃去培养上清:用不含钙、镁离子的PBS润洗Calu-1细胞1-2次。
消化细胞:加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Calu-1细胞消化情况。若Calu-1细胞大部分变圆并脱落,迅速取回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
离心处理:按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
传代:收到Calu-1细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:4的比例进行。
冻存步骤
准备细胞:Calu-1细胞冻存时,弃去培养基后,用PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,待Calu-1细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化。可使用血球计数板计数。
离心处理:4分钟1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬Calu-1细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为5%,细胞密度不低于1x10^6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
冻存:将冻存管置于程序降温盒中,放入-80℃冰箱,至少2小时后转入液氮罐储存。记录冻存管位置以便下次取用。
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Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 |
D2S1338 | 16,17 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 10,12 |
D7S820 | 9,10 |
D8S1179 | 10 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 14,17 |
D19S433 | 13,15 |
D21S11 | 28 |
FGA | 20,21 |
Penta D | 9 |
Penta E | 11 |
TH01 | 9,9.3 (ATCC=HTB-54; CLS=300141; PubMed=25877200) |
9.3 (ECACC=93120818) | |
TPOX | 8 |
vWA | 15,16 |