
NCI-H1437人肺癌细胞
- 来源:肺腺癌,非小细胞肺癌;转移部位:胸腔积液
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1%P/S
- 其他:该患者患有I期非小细胞肺癌(NSCLC),并有长期吸烟史,每年吸烟70包
NCI-H1437 人肺癌细胞系源自一位60岁的白人男性,该患者患有I期非小细胞肺癌(NSCLC),并有长期吸烟史,每年吸烟70包。NCI-H1437细胞系最初于1986年6月从患者的胸腔积液中分离得到,转移部位为肺。
NCI-H1437人肺癌细胞特性
NCI-H1437细胞类型:人源非小细胞肺癌细胞,具体为肺腺癌细胞。
NCI-H1437细胞为贴壁细胞,在培养皿表面生长;细胞形态呈上皮细胞样
NCI-H1437细胞主要用于肺癌相关研究,特别是非小细胞肺癌研究、可用于药物筛选和细胞生物学研究。
NCI-H1437人肺癌细胞参数表
中文名称 | NCI-H1437人肺癌细胞 |
细胞别称 | H1437; H-1437; NCIH1437; h1437 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
肿瘤类型 | 肺癌细胞 |
组织来源 | 肺腺癌,非小细胞肺癌;转移部位:胸腔积液 |
供体年龄/性别 | 60岁/男性 |
建立时间 | 1986年6月 |
生物安全等级 | BSL-1 |
细胞保藏中心 | ATCC; CRL-5872 |
生长培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5%;温度:37℃ |
冻存条件 | 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮保存 |
消化时间 | 2-3分钟 |
传代比例(密度) | 1:3-1:6 |
换液频次 | 2-3次/周 |
倍增时间 | 44小时 |
患者背景 | 吸烟者,每年吸烟70包 |
主要用途 | 非小细胞肺癌研究,药物筛选,细胞生物学研究 |
培养教程
NCI-H1437人肺癌细胞培养教程
NCI-H1437 细胞复苏
将含有1mL NCI-H1437细胞悬液的冻存管在37℃水浴中快速解冻,约1-2分钟。
解冻后立即将NCI-H1437细胞悬液转移到含有5mL预热培养基的离心管中。
以1000rpm离心5分钟,弃去上清。
用新鲜培养基重悬NCI-H1437细胞,转移到培养瓶中。
将培养瓶置于37℃、5% CO2培养箱中培养。
NCI-H1437 细胞传代
当NCI-H1437细胞密度达到80%-90%时进行传代。
弃去旧培养基,用PBS轻轻冲洗NCI-H1437细胞1-2次。
加入适量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化2-3分钟。
显微镜下观察NCI-H1437细胞变圆并开始脱落时,加入含血清的培养基终止消化。
吹打细胞,收集NCI-H1437细胞悬液于离心管中。
以1000rpm离心5分钟,弃去上清。
用新鲜培养基重悬NCI-H1437细胞,按1:3到1:6的比例接种到新的培养瓶中。
NCI-H1437 细胞冻存
选择生长状态良好的NCI-H1437细胞进行冻存。
按照传代步骤收集NCI-H1437细胞。
用冻存液重悬NCI-H1437细胞(55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO)。
将细胞悬液分装到冻存管中,每管1mL。
将冻存管置于-80℃冰箱中降温24小时。
转移到液氮中长期保存。
注意事项
定期观察NCI-H1437细胞形态和生长状况。
保持无菌操作,避免NCI-H1437细胞污染。
定期进行支原体检测和细胞鉴定。
细胞代次不宜过高,建议使用低代次NCI-H1437细胞进行实验。
常见问题及解决方案
NCI-H1437细胞贴壁不良:复苏后NCI-H1437细胞可能需要一定时间才能贴壁。建议复苏后24小时观察细胞贴壁情况,及时更换新鲜培养基。
NCI-H1437细胞生长缓慢:NCI-H1437细胞的倍增时间约为44小时,相对较长。如果发现生长过慢,需检查培养条件是否适宜。
培养基选择不当:应使用RPMI-1640作为基础培养基,添加10% FBS和1% P/S。使用不适合的培养基可能影响NCI-H1437细胞生长。
消化时间控制不当:消化时间建议为2-3分钟。过度消化可能损伤NCI-H1437细胞,而消化不充分则可能导致细胞团聚。
传代密度不适:建议的传代比例为1:3-1:6。密度过高或过低都可能影响NCI-H1437细胞生长状态。
换液频率不当:建议每周换液2-3次。换液不及时可能导致培养基营养不足或代谢产物积累。
细胞污染:由于长期培养,可能出现细菌、真菌或支原体污染。需严格执行无菌操作。
细胞老化:长期传代可能导致细胞特性改变。建议定期进行STR鉴定,确保NCI-H1437细胞特性稳定。
冻存和复苏问题:使用不当的冻存液或复苏方法可能降低NCI-H1437细胞活力。应严格按照推荐的冻存条件操作。
培养条件不稳定:需保持37℃,5% CO2,饱和湿度的培养环境。环境波动可能影响NCI-H1437细胞生长。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 20 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 11,14 |
D7S820 | 8,11 |
D8S1179 | 11,13 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 19 |
D19S433 | 15.2 |
D21S11 | 29 (PubMed=25877200) |
29,30 (ATCC=CRL-5872) | |
FGA | 22 |
Penta D | 10 (PubMed=25877200) |
10,12 (ATCC=CRL-5872) | |
Penta E | 5,11 |
TH01 | 6 |
TPOX | 9,10 |
vWA | 18 |
参考文献
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