NCI-H1688细胞系（人经典小细胞肺癌细胞系）

NCI-H1688细胞系是一种经典的小细胞肺癌（SCLC）细胞系，最初于1982年由Carney D和Gazdar AF等人建立。NCI-H1688细胞源自一位小细胞肺癌患者的肝转移灶，而非最初的胸腔积液样本。尽管这些细胞在形态学上与典型的小细胞肺癌有所不同，但它们在生化特性和形态上展现了小细胞肺癌的变异特征。NCI-H1688细胞系为小细胞肺癌的研究提供了宝贵的模型，尤其是在了解癌症转移和生物学特性方面。

NCI-H1688人经典小细胞肺癌细胞特性特征

• NCI-H1688细胞的增殖速度较慢，从复苏到达到50%密度可能需要2周或更长时间。细胞在消化时难以完全分散，且在培养过程中常伴随细胞碎片的产生。

• 基因特征：NCI-H1688细胞系在分子水平上表现出典型的小细胞肺癌特征，包括对某些化疗药物的敏感性和耐药性研究的潜力。
  

• 表达特征：NCI-H1688细胞系可能表达小细胞肺癌相关的标志物，如神经内分泌标志物（例如CD56、Synaptophysin等）。

NCI-H1688细胞系参数表

NCI-H1688人经典小细胞肺癌细胞系培养教程

细胞复苏

• 准备RPMI-1640培养基，添加20%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素（P/S），为NCI-H1688细胞培养做好准备。
  

• 从液氮中取出NCI-H1688细胞冻存管，并迅速将其放入37℃的水浴中，轻轻摇动以加速解冻过程。

• 将NCI-H1688细胞的冻存管中的细胞悬液在37℃水浴中快速解冻，解冻时间约为1-2分钟，直至细胞完全解冻。
  

• 向解冻的NCI-H1688细胞悬液中加入4 mL预热的培养基，轻轻混匀。
  

• 以1000 rpm的速度离心3分钟，弃去上清液。

• 加入1-2 mL培养基，轻轻吹打以重悬NCI-H1688细胞。
  

• 将重悬的NCI-H1688细胞悬液转移至含有适量培养基的培养瓶（如T25瓶），并在培养箱中培养过夜。
  

• 第二天检查NCI-H1688细胞的状态，并适时更换培养基。
  

细胞传代

• 当NCI-H1688细胞达到80%-90%汇合度时，可以进行传代。
  

• 弃去培养上清液，用不含钙、镁的PBS洗涤NCI-H1688细胞1-2次。
  

• 加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA），使其覆盖所有NCI-H1688细胞。
  

• 弃去消化液，将培养瓶放入37℃培养箱中消化1分钟。

• 观察细胞状态，若大部分NCI-H1688细胞变圆并脱落，轻轻敲击培养瓶，然后加入少量培养基终止消化。

• 加入6-8 mL培养基，轻轻混匀后转移至无菌离心管中，1000 rpm离心4分钟，弃去上清液。
  

• 补加1-2 mL培养基，轻轻吹匀细胞沉淀。

• 将NCI-H1688细胞悬液按照1:2比例分配到新的培养瓶或培养皿中，加入适量培养基，并放入培养箱中继续培养。
  

细胞冻存

• 收集NCI-H1688细胞及其培养液，转入无菌离心管中，1000 rpm离心4分钟，弃去上清液，用PBS清洗细胞并弃去PBS。
  

• 计数NCI-H1688细胞，确保其密度为5×10^6 cells/mL。
  

• 向NCI-H1688细胞悬液中加入适量无血清冻存液（如DMSO），轻轻混匀。
  

• 将混合好的NCI-H1688细胞悬液分装至冻存管中，标记并放置于-80℃冰箱中进行初步冻存，随后转移至液氮中长期保存。
  

注意事项

• NCI-H1688细胞的增殖可能较慢，从复苏到细胞密度达到50%可能需要2周或更长时间。

• 在使用胰蛋白酶消化NCI-H1688细胞时，细胞可能不会完全分散，建议尽量减少大细胞团的比例。

• 细胞培养过程中，尤其在传代后，出现NCI-H1688细胞碎片是正常现象。