HPAEPIC-Ⅱ-SV40细胞（人Ⅱ型肺泡细胞永生化） （暂不提供）

HPAEpiC-II-SV40细胞系是一种经过永生化处理的人类II型肺泡上皮细胞系，来源于人类正常肺泡组织中的II型肺泡上皮细胞。为了获得永生化的细胞系，研究人员采用了慢病毒转染的方法，将SV40基因导入这些原代细胞中。
HPAEpiC-II-SV40细胞系在研究肺泡相关生理及病理过程中具有重要应用价值，能够稳定传代至少20代以上。

HPAEPIC-Ⅱ-SV40细胞特性特征

• 在适当的培养条件下（37°C，5% CO2），HPAEpiC-II-SV40细胞能够稳定传代，至少可传代20代以上。

• 免疫标记：HPAEPIC细胞能够表达肺表面活性蛋白A（SP-A），这是II型肺泡上皮细胞的特征性标志，保持了原代细胞的功能特性。
  

• 基因特征：SV40基因的引入使细胞获得了无限增殖的能力。SV40编码的大T抗原能够与细胞内的抑制性蛋白（如p53和pRB）结合，导致细胞周期调控的失常，从而促进细胞的永生化。

• 表达特征：HPAEpiC-II-SV40细胞在体外培养时表现出良好的生长特性，能够维持肺泡上皮细胞的功能，特别是在合成和分泌肺表面活性物质方面

人Ⅱ型肺泡细胞永生化参数表

HPAEPIC-Ⅱ-SV40人Ⅱ型肺泡细胞永生化培养教程

细胞复苏

• 从液氮中取出HPAEpiC-II细胞冻存管，并立即将其放入37°C水浴中，轻轻摇动以加速解冻过程。

• 解冻完成后，将细胞悬液转移至含10 ml完全培养基的离心管中，设置900 rpm离心5分钟，弃去上清液。

• 用适量完全培养基重悬HPAEpiC-II细胞，将其转移至培养瓶中，放入培养箱中进行静置培养。

细胞传代

• 传代频率: 每2-3天检查HPAEpiC-II细胞的生长状态。当细胞达到80%-90%汇合度时，进行传代。

• 吸去原培养基，尽量吸走HPAEpiC-II细胞底部的培养基。

• 加入3-4 ml常温PBS，轻轻润洗细胞，持续10-20秒，然后吸走PBS。

• 加入1 ml胰酶，轻轻摇晃培养瓶，使胰酶均匀覆盖在细胞层上。

• 将培养瓶置于37°C培养箱中消化，观察到HPAEpiC-II细胞间隙增大但未完全脱落时，加入2-3 ml完全培养基以终止胰酶的消化作用。

• 轻轻混匀细胞，900 rpm离心3-5分钟，弃去上清液。

• 用新鲜的完全培养基重悬HPAEpiC-II细胞，并均匀分配至新的培养瓶中，补足完全培养基。

• 将培养瓶放回培养箱中进行静置培养。

培养基更换

• 每2-3天更换一次HPAEpiC-II细胞的培养基，先轻轻吸去旧培养基，然后加入新鲜的完全培养基。

注意事项

• 胰酶消化: 不同品牌的胰酶可能对HPAEpiC-II细胞的消化效果不同。应严格控制消化时间，避免细胞过度消化。

• 细胞状态: 传代过程中应尽量避免产生过多气泡，以免影响HPAEpiC-II细胞的状态。

• 培养基质量: 使用新鲜且未过期的培养基，确保无污染，以维持HPAEpiC-II细胞的健康生长。

细胞冻存

• 冻存液配方: 可以选择92% FBS + 8% DMSO（适合初学者）或92%完全培养基 + 8% DMSO（适合有经验者）。

• 在HPAEpiC-II细胞消化并离心后，收集细胞沉淀。

• 将冻存液加入细胞沉淀中，轻轻重悬细胞。

• 将细胞悬液迅速转移至标记好的冻存管中。

• 将冻存管置于程序冻存盒中，放入-80°C冰箱中过夜，然后转入液氮中保存。