
MH-S细胞(小鼠肺泡巨噬细胞)
- 来源:肺巨噬细胞
- 细胞特征:半贴半悬, 巨噬细胞样
- 培养基:RPMI-1640+0.05mM β-mercaptoethanol+10% FBS+1% P/S
- 其他:抗原表达:表达CD11b(Mac-1)、II类抗原(I-A)和T抗原
MH-S细胞系源自7周龄雄性BALB/c小鼠的肺泡巨噬细胞,经过SV40病毒转化获得。MH-S细胞系保留了肺泡巨噬细胞的多种特征,包括典型的巨噬细胞形态、粘附性、吞噬性、酯酶阳性以及过氧化物酶阴性。
MH-S细胞特性特征
表达特征:抗原表达:CD11b (Mac-1)、II类抗原 (I-A)、T抗原
表达标记:Fc受体
基因表达特征:表达白细胞介素-1 (IL-1)基因
mhs细胞能够产生白细胞介素-1 (IL-1),特别是在脂多糖(LPS)刺激下
mhs细胞能够以细胞剂量依赖方式抑制体外噬菌斑形成细胞(PFC)反应
MH-S细胞参数表
细胞名称 | MH-S细胞(小鼠肺泡巨噬细胞) |
细胞别称 | MHS;MH-S小鼠肺泡巨噬细胞 |
来源 | 7周龄雄性BALB/c小鼠的肺泡巨噬细胞 |
转化方法 | 通过SV40病毒转化获得 |
形态生长特性 | 圆形,部分贴壁;半贴壁生长;悬浮和贴壁细胞混合生长 |
细胞特性 | 粘附性、吞噬性、酯酶阳性、过氧化物酶阴性 |
抗原表达 | CD11b (Mac-1)、II类抗原 (I-A)、T抗原 |
基因表达 | 白细胞介素-1 (IL-1) |
表达标记 | Fc |
生物安全等级 | 2级 |
培养基 | RPMI-1640培养基 + 10%胎牛血清(FBS) + 0.05 mM β-巯基乙醇 |
培养条件 | 37°C,95%空气 + 5%二氧化碳 |
应用领域 | 免疫学、病毒学研究,药物筛选,基因转染 |
功能特性 | 抑制PFC应答;LPS刺激产生IL-1 |
质量检测 | 支原体、细菌、真菌检测阴性;内毒素≤10 eu/mL;pH 7.2-7.4 |
保藏信息 | ATCC: CRL-2019; BCRC: 60419; ECACC: 95090612 |
培养教程
MH-S小鼠肺泡巨噬细胞培养教程
细胞复苏
快速解冻冻存的MH-S细胞(约1分钟)。
将MH-S细胞悬液转移至含5 ml 预热完全培养基的15 ml离心管中。
以1000 rpm离心5分钟。
弃上清液,用2 ml 完全培养基重悬MH-S细胞。
将细胞悬液转移至T25培养瓶中。
放置于37°C、5% CO2的培养箱中培养。
细胞传代
观察MH-S细胞的生长状态,当细胞密度达到70%-90%时进行传代。
收集培养基中的悬浮MH-S细胞。
用PBS轻轻冲洗贴壁MH-S细胞。
加入适量胰酶消化液,在37°C下消化2-3分钟。
添加等体积完全培养基终止消化。
收集MH-S细胞悬液,1000 rpm离心5分钟。
弃上清液,用新鲜完全培养基重悬MH-S细胞。
按1:2或1:3的比例接种到新的培养瓶中。
细胞冻存
准备冻存液:90%胎牛血清 + 10% DMSO。
收集对数生长期的MH-S细胞。
以1000 rpm离心5分钟,弃上清液。
用冻存液重悬MH-S细胞,调整细胞密度至1-2 × 10^6 cells/ml。
将细胞悬液分装到冻存管中,每管1 ml。
将冻存管置于程序降温盒中,-80°C冰箱中保存过夜。
转移到液氮中进行长期保存。
注意事项
细胞特性:MH-S细胞为半贴壁生长,传代时需同时收集悬浮和贴壁细胞。首次传代建议使用T25培养瓶进行1:2比例传代。
定期观察:定期检查MH-S细胞的形态和生长状态。
无菌操作:严格遵循无菌操作规程,避免MH-S细胞污染。
支原体检测:定期进行支原体、细菌和真菌检测以确保MH-S细胞无污染。
安全事项
生物安全等级:MH-S细胞的生物安全等级为2级。在生物安全2级(BSL-2)实验室内操作MH-S细胞,遵守相关安全规程。
个人防护:操作MH-S细胞时必须穿戴实验服、手套、口罩等个人防护装备,避免直接接触细胞或培养液。
无菌操作:在生物安全柜内进行MH-S细胞培养操作,使用经过消毒的器材和试剂。
废弃物处理:所有接触过MH-S细胞的废弃物需经过高压灭菌或化学消毒处理后再丢弃。锐器需放入专用锐器盒中处理。
意外处理:制定意外泄漏或暴露的应急预案,发生意外接触MH-S细胞时立即采取相应措施并报告实验室负责人。
液氮操作安全:操作液氮时需小心,使用专用防护设备,避免冻伤。
化学品安全:安全使用和储存培养基、血清、DMSO等化学试剂,并了解所用试剂的安全数据表(SDS)。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
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