
TC-1细胞(小鼠肺上皮细胞)
- 来源:肺
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:转化基因: HPV16 E6和E7基因
TC-1小鼠肺上皮细胞系是一种重要的细胞模型,源自C57BL/C(H-2b)小鼠的肺部上皮细胞。TC-1细胞是通过转化人乳头状瘤病毒(HPV)16型的E6和E7基因及ras基因建立,TC-1细胞不仅保留了肺上皮组织的特性,还通过基因工程手段使其表现出肿瘤特性,从而能够在体外良好生长。TC-1细胞系在肿瘤生物学、病毒感染及药物开发等领域广泛应用,特别是在研究HPV相关癌症及其治疗策略方面,提供了重要的科学价值和实验依据。
TC-1细胞特性特征
转化基因:经过人乳头状瘤病毒(HPV)16型的E6和E7基因以及ras基因的共转化,具备肿瘤特性。
形态:TC-1细胞呈上皮样形态,通常为贴壁生长。
HPV E6和E7基因:这些基因的表达使得TC-1细胞具备了促进细胞增殖和抑制凋亡的能力,常与肿瘤发生相关。
ras基因:该基因的转化进一步增强了TC-1细胞的致癌性,参与调控细胞增殖和信号转导
TC-1细胞参数表
细胞名称 | TC-1细胞(小鼠肺上皮细胞) |
细胞别称 | TC-1[JHU-1]; Tissue Culture-1; 小鼠肺上皮细胞 |
种属来源 | 小鼠(C57BL/C(H-2b)) |
组织来源 | 肺 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞代数 | 通常在10代以内 |
背景介绍 | TC-1细胞为HPV16 E6、E7和ras基因共转化的细胞系 |
支原体检测 | 无 |
病原体检查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均为阴性 |
培养基组成 | 90% DMEM或RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 温度:37℃; 气相:95%空气 + 5%二氧化碳 |
传代比例 | 1:2至1:6,每周2次 |
倍增时间 | 18.2 hours (PubMed=12559790) |
冻存液成分 | 90% 完全培养基 + 10% DMSO |
储存条件 | 液氮储存(-196℃) |
运输方式 | 干冰冷冻发货或复苏发货 |
生物安全级别 | 二级生物安全台操作,需注意防护 |
无菌检测结果 | 细菌、酵母、支原体均为阴性 |
病原体检查结果 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎检查均为阴性 |
培养教程
TC-1小鼠肺上皮细胞培养教程
TC-1细胞复苏
解冻:将含有1 mL TC-1细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速解冻(约1-2分钟),轻轻摇匀。
稀释:向解冻的TC-1细胞中加入4 mL预先准备好的完全培养基,轻轻混合均匀。
离心:在1000 RPM下离心4分钟,弃去上清液。
重悬:加入1-2 mL培养基,轻轻吹打混匀,然后将TC-1细胞悬液转移至培养瓶(如T25瓶或6 cm培养皿),再加入约6-8 mL的培养基。
培养:将TC-1细胞放入37℃、5% CO₂的培养箱中,培养过夜。
TC-1细胞传代
检查密度:第二天检查TC-1细胞密度,若达到80%-90%时即可进行传代。
洗涤:弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗TC-1细胞1-2次。
加入1-2 mL消化液(0.25%胰酶和0.53 mM EDTA),在37℃培养箱中消化1-2分钟。
在显微镜下观察,若大部分TC-1细胞变圆并脱落,迅速取回操作台,轻轻敲击后加少量培养基以终止消化。
加入6-8 mL新鲜培养基轻轻打匀后,进行1000 RPM离心4分钟,弃去上清液。
补加1-2 mL新鲜培养基后轻轻吹匀。
分配:将TC-1细胞悬液按1:2至1:6的比例分配到新的培养皿或瓶中,加入每个容器约8 mL培养基。
TC-1细胞冻存
准备:在TC-1细胞生长状态良好时进行冻存,首先弃去培养基,用PBS清洗瓶底1-2次。
消化:加入1 mL胰酶,待TC-1细胞变圆并脱落后,加2 mL完全培养基终止消化。
离心:在1000 RPM下离心5分钟,去掉上清液,用新鲜的培养基重悬TC-1细胞,并加入DMSO至最终浓度为10%(通常为90%完全培养基和10% DMSO)。
分装:将重悬的TC-1细胞分配到冻存管中,并做好标识,确保每个冻存管内含有超过1×10^6个细胞。
冷冻:将冻存管放入程序冷冻盒中,然后储存在液氮中。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
- TC-1在非小细胞肺癌细胞生物学行为中作用的研究 《第四军医大学》 2014年
- 摘要:...。细胞生物学行为的改变是肺癌发生和发展的重要原因。TC-1蛋白在多种肿瘤组织中异常高...
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