NCIH1373细胞（人肺腺癌细胞）

NCI-H1373细胞是源自于一名56岁黑人男性肺腺癌患者的细胞系，建立于1986年3月。该患者有着显著的吸烟史，年吸烟量约为30包，并且在确诊后接受过化疗和放疗。NCIH1373细胞系的来源是从患者的肺腺癌组织中分离出的肿瘤细胞，癌症分期为3A期。

NCIH1373细胞的生长速度较慢，表现为典型的上皮样形态，适合贴壁培养。NCIH1373细胞系在肺腺癌及相关癌症研究中具有重要的应用价值，特别是在研究肿瘤细胞对吸烟、化疗及放疗等因素的响应机制方面。

NCIH1373细胞特性特征

• 染色体特征：细胞的染色体数量为60，范围在52至118之间，并存在染色体片段缺失（如p14）。

• 基因突变：NCIH1373细胞系可能携带与肺腺癌相关的基因突变，例如p53基因突变，这在许多非小细胞肺癌中常见。
  

• 表达特征：NCIH1373细胞可能表达某些肿瘤标志物和受体，具体的抗原表达需通过免疫组化或其他分子生物学方法进行验证。

• 癌症研究：NCIH1373细胞系广泛用于肺腺癌的基础研究和临床前药物筛选。研究人员利用该细胞系探索肿瘤生物学、药物响应和耐药机制等。
  

• 3D培养：NCIH1373细胞系适合用于三维培养模型，以更好地模拟肿瘤微环境

NCIH1373细胞参数表

NCIH1373人肺腺癌细胞培养教程

细胞复苏步骤

• 确保所有操作使用的器材，如培养基、移液器、离心管等均经过灭菌处理。
  

• 细胞培养基为RPMI-1640，添加10%胎牛血清（FBS）和1%双抗（青霉素/链霉素），适用于NCIH1373细胞的培养。

• 将冻存的NCIH1373细胞置于37℃水浴中快速解冻，期间轻轻摇动冻存管加速解冻过程。
  

• 解冻完成后，立即将NCIH1373细胞悬液转移至装有4 mL预温的培养基的离心管中，轻轻混匀。

• 以1000 RPM的速度离心4分钟，去除上清液，避免残留的二甲基亚砜（DMSO）影响NCIH1373细胞的存活。
  

• 用1-2 mL新鲜培养基重悬NCIH1373细胞，并轻轻吹打使其分散均匀。

• 将重悬的NCIH1373细胞转移至含有适量培养基的培养瓶或培养皿中。
  

• 将培养瓶放入37℃、5% CO₂的培养箱中孵育过夜，确保NCIH1373细胞恢复生长。

• 次日通过显微镜观察NCIH1373细胞形态，确认细胞复苏情况及其密度。

细胞传代步骤

• 当NCIH1373细胞覆盖培养瓶底面积的80%-90%时，需进行传代培养。
  

• 传代前准备新鲜的RPMI-1640培养基，并确保所有器材无菌。

• 小心地弃去NCIH1373细胞的培养基，用无钙、无镁的PBS（磷酸盐缓冲液）轻柔洗涤1-2次，去除残留培养基。
  

• 加入约1-2 mL的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，放入培养箱中消化1-2分钟。
  

• 在显微镜下观察，当NCIH1373细胞大部分变圆、脱离瓶壁时，立即加入完全培养基中止消化。

• 将消化后的NCIH1373细胞悬液以1000 RPM离心4分钟，弃去上清液。
  

• 补加1-2 mL新鲜培养基，将NCIH1373细胞轻轻吹匀。

• 按1:2至1:5的比例分配NCIH1373细胞至新的培养瓶或培养皿中，补加8 mL新鲜培养基。
  

• 将传代后的NCIH1373细胞置于培养箱中继续培养，并定期观察细胞生长状态。

细胞冻存步骤

• 当NCIH1373细胞处于良好生长状态时准备冻存。冻存液由50% RPMI-1640、40% FBS和10% DMSO组成。
  

• 弃去NCIH1373细胞培养基后，用PBS轻柔洗涤1-2次，再加入1 mL胰酶消化，待细胞变圆后加入2 mL完全培养基终止消化。
  

• 使用血球计数板计数NCIH1373细胞，确保细胞浓度适合冻存。

• 以1000 RPM离心5分钟，弃去上清液，用冻存液重悬NCIH1373细胞。
  

• DMSO需迅速加入并均匀混匀，最终浓度为10%。

• 将NCIH1373细胞悬液分装至冻存管中，每管1 mL，并标记清楚。
  

• 将冻存管置于程序降温盒中，缓慢降温至-80℃，至少储存2小时后转移至液氮中长期保存。