
NCI-H2009细胞(人肺腺癌细胞)
- 来源:肺腺癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM/F12+5% FBS+1% ITS+10nM Hydrocortisone+10nM β- Estradiol+1% P/S
- 其他:NCI-H2009细胞系通过EB病毒(EBV)转化获得永生化
NCI-H2009细胞系是一种人肺腺癌细胞系,于1983年建立,分离自一名68岁白人女性4期腺癌患者的转移淋巴结。该患者有长期吸烟史(约三十包年),并在手术前接受了放化疗。NCI-H2009细胞系表现出上皮细胞样的形态,广泛应用于肺癌研究,特别是在新疗法和药物效果的评估方面,帮助研究人员深入了解肺腺癌的生物学特性,并为药物筛选和治疗方法的开发提供了重要的实验模型。此外,NCI-H2009细胞系与NCI-BL2009细胞系均来源于同一名患者。
NCI-H2009细胞参数表
细胞名称 | NCI-H2009细胞(人肺腺癌细胞) |
细胞别称 | NCIH2009; H2009; H-2009 |
种属来源 | 人 |
年龄/性别 | 68岁女性 |
组织来源 | 肺,来源于转移淋巴结 |
疾病 | 肺腺癌 |
建立时间 | 1983年 |
生物安全等级 | 1 |
细胞规格 | 1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管 |
支原体检测 | 无 |
细胞代数 | 10代以内 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养基 | DMEM/F12 + 5% FBS + 5μg/ml胰岛素 + 0.01 mg/ml转铁蛋白 + 30 nM亚硒酸钠 + 3.625 ng/ml氢化可的松 + 4.5 mM L-谷氨酰胺 + 1%双抗 |
培养条件 | 95%空气 + 5% CO2; 温度:37°C |
传代比例 | 1:2至1:6 |
传代频率 | 每周2至3次 |
倍增时间 | 约24-48小时 |
保存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
冻存条件 | 液氮气相储存 |
使用限制 | 仅限于科学研究,不可用于动物或人类疾病的治疗 |
微生物检测 | 阴性 |
pH值 | 7.2-7.4 |
培养教程
NCI-H2009人肺腺癌细胞培养教程
细胞接收与处理
收到H2009细胞时,首先用75%酒精对培养瓶进行消毒。
在超净台内打开培养瓶,确保操作的无菌性。
如果H2009细胞在运输过程中未达到80%汇合度,将培养瓶中的培养液转移至离心管中。
加入6 mL完整培养基,放入37°C培养箱中孵育2-4小时以恢复细胞。
细胞生长与观察
生长特性:H2009细胞为贴壁生长,细胞形态呈上皮样。
定期检查H2009细胞的生长状态,确保细胞无污染(如支原体污染)。
当H2009细胞密度达到80%-90%时,进行传代。
传代操作
传代频率:每周进行2-3次传代,以保持H2009细胞的健康状态。
用PBS缓冲液洗涤H2009细胞,去除旧培养基。
使用0.25%胰蛋白酶消化H2009细胞,待细胞脱落后加入完整培养基终止消化。
混匀后,根据需要将细胞按照1:2至1:6的比例分装至新的培养瓶中。
冻存与复苏
使用无血清冻存液,将H2009细胞悬浮于冻存液中,分装至冻存管中。
将冻存管置于-80°C冰箱中冷冻24小时后转移至液氮储存。
从液氮中取出冻存管,迅速在37°C水浴中解冻。
解冻后,立即加入完整培养基,轻轻混匀并转移至培养瓶中,置于37°C培养箱中恢复H2009细胞。
注意事项
定期检测H2009细胞是否有支原体污染,必要时使用支原体检测试剂盒。
传代操作时保持无菌环境,定期清洁和消毒实验室。
在H2009细胞培养过程中,注意个人卫生,以防交叉污染。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 16,19 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 13 |
D7S820 | 9,11 |
D8S1179 | 10,15 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 14 |
D19S433 | 14,16,17 |
D21S11 | 29 |
FGA | 22 (ATCC=CRL-5911; CCRID=1101HUM-PUMC000383; KCLB=92009; PubMed=25877200) |
22,26 (PubMed=11416159) | |
Penta D | 12 |
Penta E | 11 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 14 |