HCC4006细胞系（人肺腺癌细胞系） （暂不提供）

HCC4006细胞系是一种来源于肺腺癌患者的上皮细胞系。最初于2004年由JD Minna和AF Gazdar在美国达拉斯西南医学中心肿瘤研究所(Hamon Cancer Center, HCC)从一名46岁女性Ⅲb期肺腺癌患者的胸腔积液中分离并建立。HCC4006细胞系的特征包括上皮细胞形态，H广泛用于肺腺癌相关的研究，特别是在涉及EGFR突变的研究中。目前，HCC4006细胞系主要通过国际细胞库和专业培养公司供应。

HCC4006细胞系特性特征

• hcc4006细胞核型分析显示染色体数量和结构存在异常，为亚三倍体

• 免疫缺陷小鼠接种后可形成移植瘤，组织学特征与原发肿瘤一致

• 长期培养后形态学、细胞动力学及染色体众数等指标无明显改变，生长稳定

• hcc4006细胞具有EGFR基因在结构域中的获得性突变（L747-E749缺失，A750P）。
  

HCC4006细胞系参数表

HCC4006人肺腺癌细胞系培养教程

细胞复苏

• 从液氮罐中迅速取出HCC4006细胞冻存管，立即放入37°C水浴中加热至细胞完全融化。

• 将HCC4006细胞悬液转移至15 mL离心管中。

• 缓慢加入10 mL预温的完全培养基，轻轻混匀。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液，用5 mL完全培养基重悬细胞沉淀。

• 将重悬的HCC4006细胞悬液接种于25 cm²培养瓶中，置于37°C、5% CO₂培养箱中培养。

常规传代

• 当HCC4006细胞生长至80-90%汇合时，用PBS洗涤细胞两次。

• 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C孵育2-3分钟，直至细胞脱壁。

• 添加等体积的完全培养基终止消化，并轻轻吹打混匀。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液，用适量的完全培养基重悬HCC4006细胞。

• 按1:2至1:3的比例将HCC4006细胞接种到新的培养瓶中，放入培养箱中继续培养。

培养基更换

• 每2-3天观察HCC4006细胞的生长状态，根据需要更换培养基。

• 用无菌移液管吸取旧的培养基，缓慢加入等量的预温新鲜完全培养基。

• 轻轻晃动培养瓶，使新培养基均匀覆盖HCC4006细胞层。

• 将培养瓶放回培养箱中继续培养。

冻存

• 将对数生长期的HCC4006细胞消化成单细胞悬液。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液，使用冻存液（90% FBS + 10% DMSO）重悬HCC4006细胞。

• 将细胞悬液分装至冻存管中，每管含1-2×10^6个HCC4006细胞。

• 置于-80°C冰箱中过夜，次日转入液氮罐中进行长期保存。

抗药性研究

• HCC4006细胞系表现出对厄洛替尼的显著抗药性。

• 抗性表现: HCC4006细胞系中的HCC4006-ER细胞（厄洛替尼选择性培养的HCC4006细胞）对厄洛替尼表现出显著的抗性，在不同浓度的厄洛替尼处理下，HCC4006细胞的存活率仍然较高。

• 细胞存活力测定: 在72小时内，HCC4006细胞在各种浓度的厄洛替尼处理下，细胞存活力未显著下降，显示出对厄洛替尼的耐受性。

• EMT特征: HCC4006-ER细胞展现了上皮-间质转化（EMT）的特征，这可能与其抗药性相关，使HCC4006细胞在厄洛替尼存在的环境中更具生存能力。

• 细胞迁移与侵入: HCC4006细胞在厄洛替尼处理下的迁移和侵入能力未受到显著影响，表明在药物压力下HCC4006细胞仍能维持一定的生物学行为。