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货号：STM-CL-5270 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
NCIH596细胞（人肺腺鳞癌细胞）
- 来源：肺
- 细胞特征：贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基：生长培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
- 其他：NCIH596细胞表达正常肺水平的p53 mRNA，未见明显的结构DNA异常
NCI-H596是一种人肺腺鳞癌细胞系，1983年由Gazdar AF和Oie H从一名73岁白人男性肺腺鳞癌患者的胸壁肿瘤中分离。NCIH596细胞系在染色体水平表现为接近三倍体，模态数=71；范围=65至75，常见的染色体标记包括del（1）（p22）、i（3q）和i（7p）。
NCIH596细胞特性特征
表现出鳞状分化标志，包括：交联包膜形成、谷氨酰胺转移酶活性、被膜素（外皮蛋白）产生；
致瘤性：在裸小鼠身上具有致瘤性
细胞类型：表达腺癌和鳞状细胞癌的混合特征
分化标志物：表达鳞状分化的多种标志物，如角蛋白和波形蛋白染色阳性，神经丝三联体蛋白染色阴性
p53 mRNA水平：表达正常肺水平的p53 mRNA，未见明显的结构DNA异常
同工酶分析：AK-1、ES-D、G6PD、PGM1、PGM3均表达，Me-2不表达，GLO-I表型为B型
NCIH596细胞参数表
| 细胞名称 | NCIH596细胞（人肺腺鳞癌细胞） |
| 细胞别称 | h596; H-596; NCI-HUT-596; NCIH596 |
| 来源 | 73岁白人男性患者的胸壁肿物 |
| 建立信息 | 1983年由Gazdar AF和Oie H建立 |
| 形态生长特性 | 上皮细胞样 / 贴壁生长 |
| 培养条件 | 37°C / 5% CO2 |
| 传代信息 | 比例1:2，周期约3天，消化时间3-5分钟 |
| 染色体信息 | 模态数71，范围65-75 |
| 标记染色体 | del(1)(p22), i(3q), i(7p) |
| 基因表达 | p53 mRNA水平与正常肺组织相当 |
| 分化标志 | 谷氨酰胺转移酶活性，被膜素产生，交联包膜形成 |
| 蛋白表达 | 角蛋白(+)，波形蛋白(+)，神经丝三联体蛋白(-) |
| 同工酶表型 | AK-1、ES-D、G6PD、PGM1、PGM3均表达，Me-2不表达，GLO-I表型为B型 |
| 致瘤性 | 在裸鼠体内具有致瘤性 |
| 适用性 | 肿瘤学研究和转染实验 |
| ATCC编号 | HTB-178 |
培养教程
NCIH596人肺腺鳞癌细胞培养教程
1. NCIH596细胞复苏
从液氮中取出NCIH596细胞冻存管，在37°C水浴中快速解冻1-2分钟。
解冻后立即将NCIH596细胞悬液转移到含有预热完全培养基的离心管中。
轻柔离心（800rpm，5分钟），去除冻存保护剂DMSO。
用预热的完全培养基重悬NCIH596细胞，避免剧烈震荡。
2. NCIH596细胞接种
将NCIH596细胞悬液转移到25cm²培养瓶中。
加入适量完全培养基，使总体积达到5-7mL。
轻轻摇晃培养瓶，使NCIH596细胞均匀分布。
将培养瓶放入37°C，5% CO2培养箱中。
3. NCIH596细胞培养
每1-2天观察NCIH596细胞生长状态，必要时更换培养基。
当NCIH596细胞汇合度达到80-90%时进行传代。
4. NCIH596细胞传代
弃去旧培养基，用PBS轻轻冲洗NCIH596细胞1-2次。
加入适量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C消化3-5分钟。
轻轻拍打培养瓶，观察NCIH596细胞脱落情况。
加入等体积完全培养基终止消化。
800rpm离心5分钟，弃上清。
用新鲜完全培养基重悬NCIH596细胞。
按1:2或1:3的比例接种到新的培养瓶中。
5. NCIH596细胞培养基更换
每2-3天更换一次培养基。
弃去旧培养基，加入新鲜预热的完全培养基。
6. NCIH596细胞冻存
收集对数生长期的NCIH596细胞。
制备冻存液（90%完全培养基 + 10% DMSO）。
调整NCIH596细胞浓度至1-2×10^6 cells/mL。
将NCIH596细胞悬液分装到冻存管中，每管1mL。
使用程序降温盒，将NCIH596细胞缓慢降温至-80°C。
24小时后转移到液氮中长期保存。
注意事项
无菌操作: 在整个NCIH596细胞培养过程中，务必保持无菌环境，以防止细胞污染。
细胞密度: 避免NCIH596细胞过度生长或长期处于高密度状态，以确保良好的细胞状态和形态。
细胞形态观察: 定期检查NCIH596细胞形态和生长状态，及时发现和处理异常情况。
支原体检测: 定期进行支原体检测，确保NCIH596细胞无污染。
细胞特性: NCIH596细胞为上皮样形态，贴壁生长，表现出鳞状分化标志，如谷氨酰胺转移酶活性和被膜素产生。
相关资料
STR鉴定及相关
| Amelogenin | X |
| CSF1PO | 12,13 |
| D2S1338 | 22,23 |
| D3S1358 | 14 |
| D5S818 | 11,13 |
| D7S820 | 11 |
| D8S1179 | 13,14 |
| D13S317 | 11 |
| D16S539 | 11 |
| D18S51 | 10.2,18 (CCRID=1101HUM-PUMC000257) |
| 18 (ATCC=HTB-178; PubMed=25877200) | |
| D19S433 | 13,14 |
| D21S11 | 29 |
| FGA | 23,25 |
| Penta D | 13 |
| Penta E | 12,15 |
| TH01 | 7,9.3 |
| TPOX | 8 |
| vWA | 16 |
参考文献
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