NCI-H3122细胞（人非小细胞肺癌细胞系）

NCI-H3122细胞是一种来源于一名54岁白人男性的肺腺癌组织非小细胞肺癌（NSCLC）细胞株，由Modi等人在临床组织中分离纯化。NCI-H3122细胞的倍增时间约为48.5小时，呈现贴壁生长特性。NCI-H3122细胞系广泛应用于肺癌的生物学研究，特别是在评估对靶向药物如克唑替尼的敏感性及耐药性机制方面，是非小细胞肺癌研究的理想模型。

NCI-H3122细胞特性特征

• 耐药性：NCI-H3122细胞系在长期接触克唑替尼后会逐渐产生耐药性。研究表明，亲本细胞对克唑替尼的IC50值为0.165 μmol/L，而耐药细胞H3122CR的IC50值则增至1.627 μmol/L，耐药指数约为9.86。这表明细胞对药物的敏感性显著降低。

• 基因表达：NCI-H3122细胞系在分子水平上表现出与非小细胞肺癌相关的基因表达特征。具体的基因突变和表达谱可能因研究而异，但通常涉及EGFR、ALK等重要的肿瘤相关基因。
  

• 细胞周期：在药物处理后，NCI-H3122细胞的细胞周期可能会受到影响，表现出不同的增殖和凋亡特征。

• 生物标志物：NCI-H3122细胞系可用于筛选与耐药性相关的生物标志物，如miRNAs等，这些生物标志物的变化可能与细胞对克唑替尼的耐药性相关

NCI-H3122细胞参数表

NCI-H3122人非小细胞肺癌细胞系培养教程

NCI-H3122细胞复苏

• 预先准备好37℃的水浴，用于快速解冻NCI-H3122细胞。
  

• 准备好适量的RPMI-1640培养基，内含10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素（P/S）。

• 准备好离心管和培养瓶。

• 将装有1 mL NCI-H3122细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中，轻轻摇动直至完全解冻（约1-2分钟）。
  

• 解冻后，立即向冻存管中加入4 mL温暖的培养基，并轻轻混匀。

• 将NCI-H3122细胞悬液转移至离心管，在1000 RPM离心4分钟，弃去上清液。
  

• 使用1-2 mL新鲜培养基重悬NCI-H3122细胞，确保细胞均匀分散。
  

• 将重悬后的NCI-H3122细胞悬液转移至培养瓶中，并在37℃、5% CO₂的培养箱中过夜培养。也可将细胞转移至6 cm培养皿中，加入约8 mL培养基。
  

• 第二天更换培养基，并使用显微镜检查NCI-H3122细胞的贴壁情况和生长状态。
  

NCI-H3122细胞传代

• 当NCI-H3122细胞达到80%-90%的汇合度时，可以进行传代操作。
  

• 小心地弃去培养瓶中的旧培养基。
  

• 用不含钙、镁的PBS（磷酸盐缓冲液）轻轻洗涤NCI-H3122细胞1-2次，以去除残留的培养基。
  

• 加入2 mL消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），轻轻晃动培养瓶，使消化液均匀覆盖NCI-H3122细胞。
  

• 将培养瓶放入37℃培养箱中，消化1-2分钟，直至大部分NCI-H3122细胞呈圆形并开始脱落。

• 观察到NCI-H3122细胞开始脱落后，立即加入2-3 mL新鲜培养基终止消化反应。
  

• 将NCI-H3122细胞悬液转移至离心管，在1000 RPM离心4分钟，弃去上清液。
  

• 用新鲜培养基重悬NCI-H3122细胞，确保细胞分散均匀。
  

• 按1:2至1:4的比例将NCI-H3122细胞悬液分配到新的培养瓶中，并补充适量培养基。
  

• 将新传代的NCI-H3122细胞放回培养箱中，进行正常培养。
  

NCI-H3122细胞冻存

• 配制冻存液：92% FBS和8% DMSO，或92%完全培养基和8% DMSO。
  

• 按常规方法消化NCI-H3122细胞，并通过离心收集细胞沉淀。
  

• 用配置好的冻存液重悬NCI-H3122细胞，确保细胞分布均匀。
  

• 将NCI-H3122细胞悬液分装至标记好的冻存管中。
  

• 将NCI-H3122细胞冻存管放入程序冻存盒中，先在-80℃冰箱中过夜，然后移入液氮中长期保存。
  

• 建议冻存后及时复苏一管NCI-H3122细胞，检查细胞的存活情况，确保冻存操作的成功。
  

NCI-H3122细胞培养注意事项

• 消化控制：不同品牌的胰蛋白酶消化效果不同，消化时间应严格控制，以避免过度消化导致NCI-H3122细胞损伤。

• 操作环境：在操作过程中，应避免产生气泡，以免影响NCI-H3122细胞的健康状态。

• 污染监测：定期检查NCI-H3122细胞培养环境中的细菌或真菌污染，一旦发现，需立即采取措施处理。