NCI-H526细胞（人小细胞肺癌细胞系）

NCI-H526是一种源自55岁高加索男性小细胞肺癌（SCLC）患者的上皮细胞系，NCI-H526细胞系最初从患者的肺部肿瘤组织中分离，是从骨髓转移病灶中获得。NCI-H526细胞系因其独特的生物学特性，广泛用于癌症生物学和药物开发研究。
NCI-H526细胞表达多种癌基因，包括myc、myb、fes、fms、raf和ras家族。此外，NCI-H526细胞系显示出胰岛素样生长因子II（IGF-II）和蛙皮的表达，但不表达左旋多巴羧化酶或蛙皮素样免疫反应性。

NCI-H526细胞特性特征

• NCI-H526细胞在无胸腺裸鼠体内可产生肿瘤，具有较强的致瘤性

• NCI-H526细胞在软琼脂糖中的菌落形成效率为4.2%

• 表达高水平的神经元特异性烯醇化酶和肌酸激酶脑同工酶等小细胞肺癌生化标志物
  

• 不表达左旋多巴羧化酶或蛙皮素样免疫反应性

• 表达c-kit基因和N-myc基因，但不表达c-myc或L-myc

• N-myc基因扩增，观察到p75c-myb表达

• NCI-H526细胞表达原癌基因N-ras、Ki-ras、Ha-ras和c-raf1

• 仅检测到微量的视网膜母细胞瘤易感基因RB mRNA，未检测到RB蛋白

• NCI-H526细胞表达易于检测的p53 mRNA水平，存在大小异常的mRNA

NCI-H526细胞参数表

NCI-H526人小细胞肺癌细胞系培养教程

NCI-H526细胞的收货与初步处理

• 收到NCI-H526细胞时，首先检查运输包装和细胞瓶的完整性，确保没有泄漏或培养液浑浊等异常情况。

• 使用75%的酒精消毒NCI-H526细胞瓶外部，以防止外界污染。

• 将NCI-H526细胞瓶放置于37°C培养箱中，静置2-4小时，使NCI-H526细胞适应培养环境。

NCI-H526细胞的培养条件

• 温度：培养NCI-H526细胞的温度设定为37°C。

• 气体组成：95%的空气和5%的二氧化碳混合气体。

• 培养类型：NCI-H526细胞为悬浮生长类型，需定期检查NCI-H526细胞密度并适时传代。

NCI-H526细胞的传代操作

• 传代时机：当NCI-H526细胞密度达到80%-90%时进行传代。

• 传代比例：首次传代建议以1:2的比例进行，即一个T25瓶的NCI-H526细胞传至两个T25瓶或两个6 cm培养皿中。

• 弃去旧培养基：小心弃去NCI-H526细胞的培养上清，避免细胞过度损失。
  

• PBS冲洗：使用无钙镁离子的PBS缓冲液冲洗NCI-H526细胞1-2次。

  
  

• NCI-H526细胞解冻（如使用冻存细胞）：

• 将含有NCI-H526细胞的冻存管在37°C水浴中快速解冻。

• 解冻后，缓慢加入4 mL预温的培养基，轻轻混匀NCI-H526细胞。

• 在1000 rpm离心3分钟，弃去上清液后加入新鲜培养基并轻轻混匀NCI-H526细胞。

• NCI-H526细胞的接种：将NCI-H526细胞悬液接种于含有适量培养基的T25培养瓶或6 cm培养皿中，并在培养箱中培养过夜。

• 换液：次日更换NCI-H526细胞的培养基，并观察NCI-H526细胞的生长状态和密度。

NCI-H526细胞的冻存操作

• NCI-H526细胞的冻存过程：将NCI-H526细胞悬液按所需密度分装至冻存管中，逐步降温后存储于液氮中。
  

NCI-H526细胞培养的注意事项

• NCI-H526细胞状态检查：在运输过程中，NCI-H526细胞可能因温度波动或振动而受损，导致部分死亡，这是正常现象。

• NCI-H526细胞解冻复苏：收到冻存的NCI-H526细胞后，应立即进行解冻和复苏，以确保较高的存活率。

• 干冰检查：若NCI-H526细胞通过干冰运输，需检查干冰是否完全挥发。如干冰融化，应直接离心NCI-H526细胞并进行培养接种。