
NCI-H2227细胞(人小细胞肺癌细胞)
- 来源:肺
- 细胞特征:贴壁生长混合悬浮生长, 上皮细胞样
- 培养基:DMEM/F12 92% + FBS 5% + GlutaMAX-1谷氨酰胺1% + P/S 1% + ITS(胰岛素+转铁蛋白+硒)1% + 氢化可的松 10nM + β-雌二醇10nM
- 其他:NCI-H2227细胞在生物学特性上表现出对放疗和化疗的敏感性,但复发率高,预后较差
NCI-H2227细胞系是一种重要的人小细胞肺癌(SCLC)细胞模型,源自一位54岁白人男性患者的肺部皮肤转移灶,于1989年分离获得。
NCI-H2227细胞在癌症研究中具有广泛应用,特别是在小细胞肺癌的生物学机制和治疗方案的探索中。其标准名称为NCI-H2227,因其独特的来源和重要性,成为研究小细胞肺癌的重要工具。
NCI-H2227细胞参数表
细胞名称 | NCI-H2227细胞(人小细胞肺癌细胞) |
别称 | H2227; H-2227; NCIH2227 |
种属来源 | 人类(Homo sapiens) |
组织来源 | 肺 |
疾病特征 | E期小细胞肺癌 |
性别及年龄 | 54岁,白人男性 |
细胞形态 | 上皮样 |
生长特性 | 贴壁生长与悬浮生长(浮动细胞团与部分贴壁细胞) |
推荐培养基 | DMEM/F12 92% + FBS 5% + GlutaMAX-1 谷氨酰胺 1% + P/S 1% + ITS(胰岛素+转铁蛋白+硒)1% + 氢化可的松 10nM + β-雌二醇 10nM |
气相条件 | 空气95%;二氧化碳5% |
培养温度 | 37℃ |
传代方法 | 1:2至1:6,每周传代2-3次 |
冻存液成分 | 冻存液:55%基础培养基+40% FBS+5% DMSO 温度:液氮 |
支原体检测 | 阴性 |
病原体检查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均为阴性 |
安全等级 | 1 |
操作注意事项 | 在二级生物安全台内操作,注意防护 |
培养教程
NCI-H2227人小细胞肺癌细胞培养教程
细胞复苏
解冻:将冻存管置于37℃水浴中快速摇晃解冻,约2分钟,保持冻存管口在水面以上以防污染。
消毒:解冻后,用70%酒精喷洒冻存管表面进行消毒。
转移细胞:将冻存管中的液体转移至5 mL完全培养基的离心管中,进行200×g离心5-10分钟,去除上清液。
重悬细胞:用预热至37℃的完全培养基重新悬浮细胞,转移到新的培养瓶中,以便后续培养NCI-H2227细胞。
传代操作
传代时机:当NCI-H2227细胞密度达到80%-90%时进行传代,此时细胞应保持良好的生长状态。
丢弃旧培养基,用PBS洗涤NCI-H2227细胞。
加入消化酶(如胰蛋白酶)处理2-5分钟,观察细胞是否脱落。
中和消化酶后,将细胞转移至离心管中,200×g离心5分钟,去除上清液。
用新鲜完全培养基重悬NCI-H2227细胞,按1:2至1:6的比例转移至新的培养瓶中。
冻存步骤
准备冻存液:配制90%完全培养基和10% DMSO作为冻存液,适用于NCI-H2227细胞。
冻存操作:将重悬的NCI-H2227细胞分装到冻存管中,置于-80℃冰箱过夜,然后转移至液氮储存,以便长期保存。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11 |
D2S1338 | 16,22 |
D3S1358 | 18 |
D5S818 | 13 |
D7S820 | 10,12 |
D8S1179 | 13 |
D13S317 | 8 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 12,13 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 28,32.2 |
FGA | 22 |
Penta D | 8,15 |
Penta E | 7,17 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 16,18 |