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KMB17细胞(人胚肺二倍体细胞)货号:STM-CL-5627 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

KMB17细胞(人胚肺二倍体细胞) (暂不提供)

  • 来源:胚肺
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞样
  • 培养基:MEM+10% FBS+1% P/S
  • 其他:传代能力:可传代至25代以上,具有稳定的增殖能力
价格:¥ 1,600.00
提供STR鉴定报告

KMB-17人胚肺二倍体细胞系是由中国医学科学院昆明医学生物学研究所在1975年建立的,来源于一名4周龄女性胚胎的正常肺组织。KMB17细胞具有二倍体细胞特性,呈现典型的成纤维细胞样形态,并以贴壁方式生长,能够在常规培养条件下稳定扩增,且可传代至25代以上,保持较强的增殖能力。KMB-17细胞系在生物医学领域,特别是肺损伤、分化以及病毒学研究中具有重要应用,常被用作转染实验的宿主细胞。需要注意的是,尽管最初认为该细胞系来自肺组织,但后续同工酶分析和DNA指纹技术显示该细胞系已被HeLa细胞污染,因此在研究中应特别留意这一污染风险,以确保实验结果的可靠性。

KMB17细胞特性特征

  • 细胞类型:二倍体细胞,形态上呈现成纤维细胞样,适合贴壁生长。

  • 生长特性:细胞以贴壁方式生长,呈短梭形,具有良好的增殖能力。

  • 基因组特征:KMB-17细胞为二倍体,其基因组中含有两个完整的染色体组,适合用于遗传学和分子生物学研究。

  • 同工酶分析:KMB17细胞系的同工酶分析显示其具有人类特征,包括多种酶类的表达,如AST、MD等。

KMB17细胞参数表

细胞名称KMB17细胞(人胚肺二倍体细胞)
别称KMB 17; KMB17
种属来源
组织来源胎肺
形态特征成纤维细胞样,贴壁生长
建立时间1975年
建立地点中国医学科学院昆明医学生物学研究所
培养基DMEM + 10%胎牛血清 (FBS)+1% P/S
生长条件温度:37℃;气相:95%空气,5%二氧化碳;湿度:70%-80%
传代比例1:2至1:6,每周2-3次
倍增时间每周2至3次
冻存液90% FBS + 10% DMSO
冻存条件液氮储存
支原体检测阴性(培养法)
病原体检查HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均为阴性
同工酶人B, NP, G8PG, MD, AST

培养教程

KMB17人胚肺二倍体细胞培养教程

KMB17细胞复苏

  • 从液氮中取出冷冻的KMB17细胞,立即放入37℃的水浴中快速解冻,轻轻摇动冻存管以均匀加热解冻。确保已准备好完全培养基,如MEM培养基,并添加10%胎牛血清(FBS)以维持KMB17细胞的正常生长。

  • 细胞完全解冻后,迅速将KMB17细胞悬液(约1 mL)加入4 mL预温至37℃的完全培养基中,轻轻混匀以确保KMB17细胞的均匀分布。

  • 将KMB17细胞悬液在1000 RPM下离心4分钟,弃去上清液,然后加入1-2 mL新鲜培养基,轻轻吹打以重新悬浮细胞。

  • 将复苏后的KMB17细胞悬液转移至T25培养瓶或10 cm培养皿中,加入8 mL培养基。将培养皿放置于37℃、5% CO₂的培养箱中,过夜后更换新鲜培养基,观察KMB17细胞的贴壁情况及生长状态。

KMB17细胞传代

  • 当KMB17细胞生长至80%-90%汇合时,需进行传代,以保持细胞活力。细胞密度过高可能影响KMB17细胞的增殖能力,因此建议及时传代。

  • 弃去培养瓶中的旧培养基,用无钙镁的PBS缓冲液轻轻清洗KMB17细胞一次,去除残留培养基。

  • 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液消化KMB17细胞,通常2-3分钟即可。细胞开始脱落时,立即加入完全培养基终止消化,并轻轻吹打以形成均匀的KMB17细胞悬液。

  • 将消化后的KMB17细胞悬液转移至无菌离心管,在1000 RPM下离心5分钟,弃去上清液。重新悬浮KMB17细胞于新鲜的完全培养基中,按1:3或1:4的比例接种到新的培养瓶中,并加入足量培养基。

  • KMB17细胞适合在37℃、5% CO₂条件下生长,湿度控制在70%-80%为最佳。

KMB17细胞冻存

  • 使用90%的完全培养基和10%的二甲基亚砜(DMSO)作为KMB17细胞冻存液。

  • 将KMB17细胞悬液分装至冻存管中,缓慢降温至-80℃,并于24小时后转移至液氮中进行长期保存。

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参考文献

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