
IMR90细胞(人胚肺成纤维细胞) (暂不提供)
- 来源:胚肺;16周龄女性胎儿的正常肺组
- 细胞特征:贴壁细胞 ,成纤维细胞样
- 培养基:生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:病毒敏感性类似于WI-38细胞,对多种病毒敏感
IMR-90人胚肺成纤维细胞系是由16周龄女性胎儿的正常肺组织分离。IMR90细胞系是由W.W. Nichols等人建立的人二倍体成纤维细胞株,其具有一定的分裂潜力和病毒易感性。IMR90细胞系在细胞衰老前可以达到约58次的群体倍增。
IMR-90细胞对多种病毒具有敏感性,包括人类脊髓灰质炎病毒1型、2型和3型,水痘-带状疱疹病毒,单纯疱疹病毒1型和2型,牛痘病毒,人类疱疹病毒5型,以及水泡性口炎病毒。由于这些特性,IMR-90细胞系常被用作WI-38及其他人肺细胞株的替代品。
IMR-90细胞系在体外以成纤维状形态贴壁生长。其同工酶特性包括G6PD和B。
IMR90细胞特性
IMR90细胞是人类二倍体胚胎成纤维细胞系,源自16周龄白人女婴的肺部组织。
IMR90细胞呈现成纤维状,贴壁生长。细胞呈细长形状,与平滑肌细胞相似,表现出许多已分化平滑肌细胞的特征、肌动蛋白附着位点呈显著规则的纵向排列
IMR90细胞表达SM22蛋白、平滑肌相关的α-肌动蛋白亚型和肌钙蛋白、黏着小带交界处含有metavinculin(一种纽蛋白的剪接变体)
病毒敏感性类似于WI-38细胞,对多种病毒敏感
IMR90细胞是有限寿命细胞系,在表现出衰老前可倍增约58次
可作为WI-38或其他标准人肺细胞株的替代品
IMR90细胞参数表
细胞名称 | IMR90细胞(人胚肺成纤维细胞) |
细胞别称 | IMR90; IMR90; InstituteforMedicalResearch-90; I90 |
来源与类型 | 16周龄白人女婴肺部组织;人类二倍体胚胎成纤维细胞系 |
遗传特征 | 染色体:46, XX (正常二倍体);种族:白种人;性别:女性 |
形态与生长特性 | 成纤维状,贴壁生长;倍增次数:约58次(衰老前) |
培养基与添加物 | MEM基础培养基;10-20% FBS;1% 非必需氨基酸;1%双抗 |
培养环境 | 温度:37°C;气相:95%空气,5%CO2;湿度:70-80% |
传代与维护 | 传代密度:70-80%;比例:1:2-1:8;换液:每2-3天 |
培养注意事项 | 平躺培养,液体高度<3mm;对氧气、密度和养分敏感;轻柔操作 |
冻存条件 | 液:90%完全培养基,10% DMSO;密度:1-2x10^6细胞/mL |
保存与复苏 | 短期:-80°C;长期:液氮;快速解冻(37°C水浴) |
蛋白表达 | SM22蛋白、α-肌动蛋白、肌钙蛋白、metavinculin |
细胞标记物 | CD90+, CD105+, CD73+, CD44+, CD29+ |
基因表达 | p16INK4a, p21CIP1 (衰老相关) |
生理反应 | 收缩反应快;对多种病毒敏感(类似WI-38细胞) |
生长特性 | 群体倍增时间:24-36小时;饱和密度:4-5x10^4细胞/cm^2 |
其他特性 | 贴壁效率:70-80%;克隆形成效率:10-20%;转染效率:中等 |
研究用途 | 细胞衰老、病毒学、毒理学、癌症研究(如IMR90 ER:RAS模型) |
替代性与比较 | 可替代WI-38等标准人肺细胞株;寿命比MRC-5细胞短 |
安全性检测 | 无菌(细菌、真菌、支原体检测阴性);人源细胞系验证 |
活力与纯度 | 细胞活力>90%;提供STR鉴定报告 |
培养教程
IMR90人胚肺成纤维细胞培养教程
培养方式
培养容器
建议平躺培养,以增大空气交换面积,这对IMR-90细胞尤为重要。
液体高度不要超过3mm,防止IMR-90细胞接触氧气不足。
T25培养瓶加入6-8ml培养基。
T75培养瓶加入约15ml培养基。
换液频率
每2-3天换液一次,即使培养基没有变黄,IMR-90细胞对营养需求较高。
换液时轻轻侧过培养瓶/皿,避免细胞飘起。
用巴氏吸管轻轻吸取部分上清弃去,补加等体积的新鲜培养基。
传代
IMR-90细胞对离心和吹打敏感,建议轻柔操作。
如需离心清洗,使用1000rpm离心5分钟,重悬时不可过度吹打。
特殊注意事项
IMR-90细胞对氧气、密度和养分非常敏感。
保持规律的换液和传代频率,密切关注细胞密度,稍有疏忽可能导致IMR-90细胞全部死亡。
关键参数控制
培养环境
温度:37°C,确保IMR-90细胞最佳生长温度。
二氧化碳浓度:5%,适宜IMR-90细胞生长的CO2水平。
湿度:饱和湿度(通常为70-80%),保证IMR-90细胞的适宜生长环境。
培养基管理
使用新鲜配制的培养基,最好在两周内用完,IMR-90细胞对培养基的新鲜度非常敏感。
每2-3天换液一次,即使培养基未变黄,确保IMR-90细胞有充足的营养。
使用含10-20% FBS的完全培养基。
细胞密度管理
密切关注IMR-90细胞生长状态,在70-80%密度时及时传代,避免过度生长。
传代比例建议1:2-1:4。
氧气管理
建议平躺培养,增大气液接触面积,确保IMR-90细胞有足够的氧气供应。
控制培养基液面高度不超过3mm,充足的氧气供应对IMR-90细胞至关重要。
操作轻柔:换液和传代时动作要轻柔,避免过度离心和反复吹打,减少机械应力可以降低IMR-90细胞损伤。
定期检测:进行支原体等污染检测、观察IMR-90细胞形态变化,及时发现和解决问题可以延缓衰老。
相关资料
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,13 |
D2S1338 | 19,25 |
D3S1358 | 14,15 |
D5S818 | 12,13 |
D7S820 | 9,12 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 11,13 |
D16S539 | 10,13 |
D18S51 | 17 |
D19S433 | 10,13 |
D21S11 | 30.2,31 |
FGA | 25,26 |
Penta D | 5,12 |
Penta E | 5 |
TH01 | 8,9.3 (ATCC=CCL-186; IZSLER=BS CL 107; KCLB=10186; PubMed=11416159) |
8,10 (JCRB=JCRB9054) | |
TPOX | 8,9 |
vWA | 16,19 |
参考文献
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