
HFL1细胞(人胚肺成纤维细胞)
- 来源:胎儿肺
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:Ham's F-12K+10%FBS+1% P/S
- 其他:同工酶:HFL1细胞表达同工酶G6PD,B型
HFL1人胚肺成纤维细胞是一种从健康白人胎儿肺组织中分离的细胞系,是一种有限传代的细胞系,来源于16周大的男胎儿肺组织。
HFL1细胞系具备正常的核型,通常在传代10次以内具有良好的生长性,并且在适宜条件下能够稳定传代至46代。HFL1细胞以贴壁生长为主,主要用于各类科研研究,尤其在毒理学领域应用广泛。文献中报道了HFL1细胞存在一定的细胞遗传不稳定性。
HFL1细胞特性特征
核型:HFL1细胞具有正常的二倍体核型。
同工酶:HFL1细胞表达同工酶G6PD,B型。
基因表达:HFL1细胞系在研究中常用于分析与肺部疾病、细胞增殖和分化相关的基因表达
HFL1细胞参数表
细胞名称 | HFL1细胞(人胚肺成纤维细胞) |
别名 | HFL-1 |
来源 | 正常白人胎儿的肺组织,取自16周大的男胎儿 |
细胞类型 | 有限细胞系,通常在10代以内传代,正常情况下可稳定传代至46代 |
细胞形态 | 成纤维细胞样,贴壁生长 |
细胞数量 | 每瓶细胞数大于1x10^6 |
生物安全等级 | 1级 |
细胞遗传特性 | 二倍体,核型正常,存在细胞遗传不稳定性 |
同工酶 | G6PD,B型 |
培养基 | F12K培养基,加10%胎牛血清和1%抗生素 |
培养条件 | 温度37℃,气体组成95%空气,5%二氧化碳,湿度70%-80% |
冻存条件 | 使用无血清冻存液,通常为90%胎牛血清和10% DMSO |
支原体检测 | 无,确保细胞系纯度 |
保藏机构 | ATCC, BCRC, ECACC |
STR鉴定 | 已鉴定,确保细胞系身份和纯度 |
应用领域 | 细胞生物学、毒理学研究、组织工程、病毒学研究 |
注意事项 | 该细胞仅供科研使用,未经许可不得用于其他目的 |
注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意控制消化时间 |
培养教程
HFL1人胚肺成纤维细胞培养教程
HFL1细胞复苏
配制HFL1细胞完全培养基,使用F12K基础培养基,加入10%胎牛血清和1%抗生素(如青霉素-链霉素混合液)。
在37℃水浴中预热5ml HFL1细胞的完全培养基。
从液氮或-80℃冰箱中取出冻存的HFL1细胞管,立即放入37℃水浴中轻轻摇晃,快速解冻(约1分钟内完成)。
将解冻后的HFL1细胞悬液转移至15ml离心管中,加入预热的完全培养基,轻轻混匀。
以1000rpm离心5分钟,弃去上清液,保留HFL1细胞沉淀。
用2ml完全培养基轻轻重悬HFL1细胞沉淀。
将重悬的HFL1细胞转移至T25培养瓶中,标记培养瓶。
将HFL1细胞培养瓶置于37℃、5% CO₂的培养箱中进行培养。
24小时后,检查HFL1细胞贴壁情况。如未贴壁HFL1细胞较多,应弃去旧培养基,换上新鲜预热的完全培养基。
HFL1细胞传代
当HFL1细胞生长至80%-90%汇合度时,开始传代操作。
吸弃培养基,加入1ml无菌PBS润洗HFL1细胞一次,以去除残余培养基及血清。
加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),轻轻摇动培养瓶,室温孵育2-5分钟,观察HFL1细胞脱落情况。
加入2-3ml完全培养基终止胰酶反应。
将HFL1细胞悬液转移至离心管中,1000rpm离心5分钟,去除上清液。
用适量完全培养基重悬HFL1细胞,按1:2或1:3的比例(如1ml细胞悬液加入2-3ml培养基)。
将重悬的HFL1细胞转移至新的培养瓶中,并做好标记。
将HFL1细胞培养瓶置于37℃、5% CO₂的培养箱中继续培养。
HFL1细胞冻存
配制HFL1细胞冻存液,使用90%胎牛血清和10% DMSO,确保现用现配。
按照传代步骤收集HFL1细胞,离心后弃去上清液。
用HFL1细胞冻存液重悬HFL1细胞,通常以1x10^6 HFL1细胞/ml的浓度进行冻存。
将重悬的HFL1细胞分装至冻存管中,标记清楚。
将HFL1细胞冻存管先置于-80℃冰箱中过夜,随后转入液氮中长期保存。
注意事项
HFL1细胞培养基更换:建议每2-3天更换一次HFL1细胞培养基,并定期观察HFL1细胞状态。
HFL1细胞观察:应使用显微镜定期检查HFL1细胞形态和生长情况。
无菌操作:在整个HFL1细胞培养过程中保持严格的无菌操作,以防止污染。
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Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 17,25 |
D3S1358 | 14,17 |
D5S818 | 12 |
D6S1043 | 11,18 |
D7S820 | 9,10 |
D8S1179 | 12,14 |
D12S391 | 20,21 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 9,11 |
D18S51 | 18,19 |
D19S433 | 11,13 |
D21S11 | 27,30 |
FGA | 21,22 |
Penta D | 2.2,9 |
Penta E | 12,20 |
TH01 | 7,9 |
TPOX | 6,9 |
vWA | 17 |
参考文献
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