
PC14细胞系(人肺癌细胞系)
- 来源:肺腺癌;淋巴结转移
- 细胞特征:多数贴壁少量悬浮 , 圆形/上皮细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:PC-14细胞系已被用于研究添加α-生育酚对各种细胞毒性药物的影响。
PC-14细胞系最初于1989年在日本的理研生物资源中心建立,起源于一位男性肺腺癌患者的肿瘤组织。由于当时的误识,该细胞系最初被标记为PC-14。然而,通过后续的短串联重复序列(STR)DNA分析,发现pc14细胞系与另一种源自人类肺腺癌的分化型细胞系PC-9相同。鉴于此,pc14细胞的名称随后被更改为PC-9,以反映其真实的身份。PC-9细胞系在肺腺癌研究中具有重要意义,并被广泛用于探讨癌症的病理机制以及评估药物的疗效。
PC14细胞系特性特征
生长:pc14细胞具有较强的增殖能力,适合用于各种实验研究。
基因组:pc14细胞表现出非整倍体和多倍体的特征,反映出基因拷贝数的增加和细胞增殖的失控。
生物标志物:pc14细胞表达与肺癌相关的多种生物标志物,如EGFR等。
信号通路:多种信号通路(如PI3K/Akt、MAPK等)可能被激活
PC14细胞系参数表
细胞名称 | PC14细胞系(人肺癌细胞系) |
细胞别称 | PC 14; PC14 |
细胞类型 | 人肺腺癌细胞系 |
来源 | 男性肺腺癌患者肿瘤组织 |
建立时间 | 1989年 |
建立单位 | 日本RIKEN生物资源中心 |
细胞形态 | 上皮细胞样,贴壁生长 |
生长特性 | 具有较强的增殖能力 |
培养基 | RPMI 1640 + 10% FBS + 2mM 谷氨酰胺 |
培养条件 | 37°C, 5% CO2 |
传代比例 | 1:2 至 1:6 |
传代频率 | 每周2次 |
细胞密度 | 不低于 1x10^6 cells/ml |
培养瓶 | T25培养瓶或10cm培养皿 |
冻存条件 | 冻存液:55%基础培养基+40% FBS+5% DMSO 温度:液氮 |
注意事项 | PC14细胞为多数贴壁少量悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液 |
染色体特征 | 非整倍体和多倍体 |
生物标志物 | 表达EGFR等与肺癌相关的标志物 |
信号通路 | 激活PI3K/Akt、MAPK等信号通路 |
细胞污染检测 | 定期检测支原体污染 |
细胞特性 | 对多种化疗药物表现出耐药性 |
应用领域 | 肺腺癌机制研究、药物筛选、生物标志物研究 |
培养教程
PC14人肺癌细胞系培养教程
PC14细胞复苏
将PC14细胞冻存管从液氮中取出后,立即放入37°C水浴中,轻轻摇动以加速解冻,确保解冻过程迅速完成,以减少细胞损伤。
解冻后,迅速将1 mL PC14细胞悬液转移至装有4 mL完全培养基(RPMI 1640,含10% FBS和2 mM谷氨酰胺)的离心管中。
在1000 RPM下离心4分钟,去除上清液,保留PC14细胞沉淀。
向PC14细胞沉淀中加入1-2 mL完全培养基,轻轻吹打以使细胞悬浮均匀,然后将悬浮液转移至T25培养瓶中。
将培养瓶放入37°C、5% CO2的培养箱中,培养过夜,以便PC14细胞贴壁生长。
PC14细胞传代
次日检查PC14细胞状态,当细胞覆盖面积达到80%-90%时,进行传代操作。
弃去培养基,用不含钙、镁离子的PBS洗涤PC14细胞1-2次,以去除残留培养基。
加入1 mL胰酶-EDTA溶液(0.25%胰酶 + 0.53 mM EDTA),将培养瓶放回培养箱中消化1-2分钟,待PC14细胞变圆且松散脱落。
轻轻敲打培养瓶的侧壁,加入少量含血清的培养基终止消化反应。
补加6-8 mL培养基,轻轻混匀后,在1000 RPM下离心4分钟,去除上清液。
用1-2 mL培养基重悬PC14细胞,按1:2的比例分配到新的培养瓶中,并补加8 mL新鲜培养基。
PC14细胞冻存
当PC14细胞生长状态良好时,弃去培养基,用PBS清洗细胞1-2次。
加入1 mL胰酶消化,待PC14细胞脱落后,加入1 mL含血清的培养基终止消化。使用血球计数板计数PC14细胞数量。
在1000 RPM下离心4分钟,弃去上清液。
用血清重悬PC14细胞,并按10%的终浓度加入DMSO,确保细胞浓度不低于1x10^6 cells/mL。
将重悬的PC14细胞悬液分装到冻存管中,放入程序降温盒中,置于-80°C冰箱中预冻2小时后转移至液氮中长期保存。
注意事项
污染检测:定期检测PC14细胞是否有支原体或其他污染。
传代频率:保持固定的传代频率和PC14细胞密度,避免传代过迟或过早。
操作卫生:培养和传代PC14细胞过程中应注意无菌操作,避免交叉污染。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11 |
D5S818 | 11 |
D7S820 | 10 (ECACC=90071810) |
10,11 (Cosmic-CLP=753608) | |
D8S1179 | 11,15 |
D13S317 | 8 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 15 |
D21S11 | 29,30 |
FGA | 23,25 |
TH01 | 7 |
TPOX | 11 |
vWA | 17 |
参考文献
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