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95C细胞【人肺巨细胞癌细胞(低转移)】货号:STM-CL-5379 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

95C细胞【人肺巨细胞癌细胞(低转移)】

  • 来源:肺巨细胞癌;腹水转移
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:95C细胞表现出低转移能力。与高转移细胞系95D相比,95C在侵袭和迁移方面的功能显著降低
价格:¥ 1,400.00
提供STR鉴定报告

95C细胞源自一名65岁中国男性肺巨细胞癌患者的腹水转移病灶,属于人肺巨细胞癌细胞系PLA-801的一个亚系。PLA-801细胞系包含了4个通过单细胞克隆技术分离的亚系,即95A、95C、95D、95E,其中95C细胞具有较低的转移能力。95C细胞与高转移能力的95D细胞来自同一个原代细胞系,但在侵袭性和迁移性方面明显弱于95D细胞。

95C细胞特性特征

  • 95C细胞具有致瘤性,能够在裸鼠体内形成肿瘤。皮下接种裸鼠后,95C细胞自发转移的发生率较低。

  • 95C细胞的基因表达谱与高转移细胞系95D相比,存在显著差异,尤其在与细胞迁移和侵袭相关的基因上。研究显示,某些与细胞增殖、转移和死亡相关的基因在95C细胞中表达水平较低。

  • 95C细胞的磷酸化蛋白质组与高转移细胞系95D的比较分析显示,95C细胞中某些关键蛋白的磷酸化水平较低。

95C细胞参数表

细胞名称95C细胞【人肺巨细胞癌细胞(低转移)】
细胞别称PLA801C; PLA-801C; PLA801-95C;95C
细胞系编号CVCL_WW01 (PLA-801A), CVCL_7110 (PLA-801D), CVCL_WW02 (PLA-801E)
来源65岁中国男性肺巨细胞癌患者腹水转移病灶
细胞形态上皮细胞样,贴壁细胞
转移能力低转移能力
致瘤性能在裸鼠体内形成肿瘤
细胞类型肿瘤细胞
生长特性贴壁细胞
生物学特性侵袭能力和迁移能力较弱
遗传学特征染色体数目异常,存在染色体缺失和重排
生物学标志物高表达CK,低表达E-钙黏蛋白
培养基及添加物RPMI 1640 + 10%胎牛血清 + 1×青霉素/链霉素溶液
培养条件37°C, 5% CO2
换液周期2-3天
培养基体积T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例1:2-1:4
传代方法胰酶消化后传代,通常1:2至1:3
生长曲线对数生长期4-5天,最大密度约1×10^6/ml
倍增时间约24小时
保存条件液氮罐中保存,气相保存
细胞活力高活力,接种后24小时贴壁率>90%
研究应用肺癌转移机制研究、药物筛选、细胞生物学研究
冻存液配方92% FBS + 8% DMSO或92%完全培养基 + 8% DMSO
冻存规格200-300万/ml,1ml每管
冻存方法程序冻存或常规冻存
生物安全等级1
收录中科院NCACC

培养教程

95C人肺巨细胞癌细胞(低转移)培养教程

细胞复苏

  • 从液氮罐中取出冻存的95C细胞管,迅速放入37°C水浴中融化,轻轻摇动直至冰块完全融化。

  • 将95C细胞悬液移至15 ml离心管中,缓慢加入10 ml预温的RPMI 1640培养基,轻轻混匀。

  • 以300×g离心5分钟,弃去上清,用5 ml新鲜的培养基重悬95C细胞。

  • 将95C细胞悬液接种于T25培养瓶中,添加10-12 ml培养基。

  • 置于37°C、5% CO2的培养箱中培养。24小时后更换培养基以去除非贴壁的95C细胞。

细胞培养

  • 在培养95C细胞的过程中,每2-3天更换一次培养基,保持95C细胞在适宜的生长环境中。当95C细胞生长至80-90%汇合时,进行传代操作。

传代方法

  • 弃去旧的培养基,用PBS轻轻洗涤95C细胞一次。

  • 加入0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C下消化3-5分钟,观察95C细胞的脱落情况。

  • 当95C细胞大部分脱落时,加入等量培养基终止消化作用。

  • 将95C细胞悬液转移至15 ml离心管中,300×g离心5分钟。

  • 弃去上清,用新鲜预温的培养基重悬95C细胞。

  • 计数后,根据需要按1:2至1:4的比例将95C细胞接种至新的培养瓶中,添加适量培养基。

注意事项

  • 在传代95C细胞的过程中,消化时间需严格控制,以避免过度消化导致95C细胞损伤。

  • 95C细胞接种后的24小时内避免换液,以确保95C细胞顺利贴壁。

  • 传代时应尽量避免培养基中产生气泡,因为气泡可能会影响95C细胞的正常生长。

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