
95C细胞【人肺巨细胞癌细胞(低转移)】
- 来源:肺巨细胞癌;腹水转移
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:95C细胞表现出低转移能力。与高转移细胞系95D相比,95C在侵袭和迁移方面的功能显著降低
95C细胞源自一名65岁中国男性肺巨细胞癌患者的腹水转移病灶,属于人肺巨细胞癌细胞系PLA-801的一个亚系。PLA-801细胞系包含了4个通过单细胞克隆技术分离的亚系,即95A、95C、95D、95E,其中95C细胞具有较低的转移能力。95C细胞与高转移能力的95D细胞来自同一个原代细胞系,但在侵袭性和迁移性方面明显弱于95D细胞。
95C细胞特性特征
95C细胞具有致瘤性,能够在裸鼠体内形成肿瘤。皮下接种裸鼠后,95C细胞自发转移的发生率较低。
95C细胞的基因表达谱与高转移细胞系95D相比,存在显著差异,尤其在与细胞迁移和侵袭相关的基因上。研究显示,某些与细胞增殖、转移和死亡相关的基因在95C细胞中表达水平较低。
95C细胞的磷酸化蛋白质组与高转移细胞系95D的比较分析显示,95C细胞中某些关键蛋白的磷酸化水平较低。
95C细胞参数表
细胞名称 | 95C细胞【人肺巨细胞癌细胞(低转移)】 |
细胞别称 | PLA801C; PLA-801C; PLA801-95C;95C |
细胞系编号 | CVCL_WW01 (PLA-801A), CVCL_7110 (PLA-801D), CVCL_WW02 (PLA-801E) |
来源 | 65岁中国男性肺巨细胞癌患者腹水转移病灶 |
细胞形态 | 上皮细胞样,贴壁细胞 |
转移能力 | 低转移能力 |
致瘤性 | 能在裸鼠体内形成肿瘤 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
生物学特性 | 侵袭能力和迁移能力较弱 |
遗传学特征 | 染色体数目异常,存在染色体缺失和重排 |
生物学标志物 | 高表达CK,低表达E-钙黏蛋白 |
培养基及添加物 | RPMI 1640 + 10%胎牛血清 + 1×青霉素/链霉素溶液 |
培养条件 | 37°C, 5% CO2 |
换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4 |
传代方法 | 胰酶消化后传代,通常1:2至1:3 |
生长曲线 | 对数生长期4-5天,最大密度约1×10^6/ml |
倍增时间 | 约24小时 |
保存条件 | 液氮罐中保存,气相保存 |
细胞活力 | 高活力,接种后24小时贴壁率>90% |
研究应用 | 肺癌转移机制研究、药物筛选、细胞生物学研究 |
冻存液配方 | 92% FBS + 8% DMSO或92%完全培养基 + 8% DMSO |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 程序冻存或常规冻存 |
生物安全等级 | 1 |
收录 | 中科院NCACC |
培养教程
95C人肺巨细胞癌细胞(低转移)培养教程
细胞复苏
从液氮罐中取出冻存的95C细胞管,迅速放入37°C水浴中融化,轻轻摇动直至冰块完全融化。
将95C细胞悬液移至15 ml离心管中,缓慢加入10 ml预温的RPMI 1640培养基,轻轻混匀。
以300×g离心5分钟,弃去上清,用5 ml新鲜的培养基重悬95C细胞。
将95C细胞悬液接种于T25培养瓶中,添加10-12 ml培养基。
置于37°C、5% CO2的培养箱中培养。24小时后更换培养基以去除非贴壁的95C细胞。
细胞培养
在培养95C细胞的过程中,每2-3天更换一次培养基,保持95C细胞在适宜的生长环境中。当95C细胞生长至80-90%汇合时,进行传代操作。
传代方法
弃去旧的培养基,用PBS轻轻洗涤95C细胞一次。
加入0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C下消化3-5分钟,观察95C细胞的脱落情况。
当95C细胞大部分脱落时,加入等量培养基终止消化作用。
将95C细胞悬液转移至15 ml离心管中,300×g离心5分钟。
弃去上清,用新鲜预温的培养基重悬95C细胞。
计数后,根据需要按1:2至1:4的比例将95C细胞接种至新的培养瓶中,添加适量培养基。
注意事项
在传代95C细胞的过程中,消化时间需严格控制,以避免过度消化导致95C细胞损伤。
95C细胞接种后的24小时内避免换液,以确保95C细胞顺利贴壁。
传代时应尽量避免培养基中产生气泡,因为气泡可能会影响95C细胞的正常生长。
相关资料
- 人胚肺细胞与干细胞的区别
- 人类胚胎肺细胞和干细胞是两种细胞类型,它们在多个方面存在着显著的差异,包括来源、特性和用途...
- 利用NCI-H1299人非小细胞肺癌细胞的CRISPR基因编辑技术进行癌症研究
- 肺癌是全球范围内癌症相关死亡的主要原因之一,其中非小细胞肺癌(NSCLC)占据了大多数病例...
- 永生化支气管上皮细胞
- 由于正常和患病原代支气管上皮细胞对数量有限、供体之间存在显著差异以及其有限的增殖能力,正常...
- 查看完整内容 >