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RKO-AS45-1细胞（人结肠癌转基因细胞）货号：STM-CL-5371 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

RKO-AS45-1细胞（人结肠癌转基因细胞）

  • 来源：结肠癌，整合起动GADD45a表达载体的CMV启动子
  • 细胞特征：贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基：MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S
  • 其他：RKO-AS45-1细胞含有稳定整合的CMV启动子驱动的GADD45a表达载体
Tags： 结肠癌转基因细胞    
相关附件下载： STM-CL-5371 RKO-AS45-1 (人结肠癌转基因细胞).pdf
价格：￥ 1,700.00
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提供STR鉴定报告

RKO-AS45-1是一种人结肠癌转基因细胞系，由RKO结肠癌细胞通过转染人GADD45 cDNA开放阅读框到表达载体pCMV.3后建立。

RKO-AS45-1人结肠癌转基因细胞特性特征

  • 含有稳定整合的巨细胞病毒(CMV)启动子驱动的GADD45a表达载体、过度表达Gadd45 RNA和蛋白质.

  • p53基因呈阳性(p53+)，但表达不足；GADD45基因受p53调控.

  • GADD45蛋白表达水平高于母系RKO细胞.

  • DNA修复能力降低，特别是对紫外线诱导的DNA损伤的修复能力减弱.

  • GADD45蛋白与参与细胞周期调控和DNA修复的蛋白质相互作用

  • RKO-AS45-1细胞系可与其亲本细胞系RKO一起用于研究GADD45在DNA修复、细胞凋亡和药物敏感性方面的影响。

RKO-AS45-1人结肠癌转基因细胞参数表

细胞名称RKO-AS45-1细胞（人结肠癌转基因细胞）
细胞别称RKO-AS-45-1; RKOAS451; RKO_AS451; RKOAS451
细胞类型人结肠癌转基因细胞
形态上皮细胞样
生长特性贴壁生长
组织来源结肠癌，整合起动GADD45a表达载体的CMV启动子
基因特征p53+（低表达）
分子特征过度表达Gadd45 RNA和蛋白质
功能特征DNA修复能力降低，特别是对紫外线诱导的DNA损伤
应用领域Gadd45对DNA修复、凋亡和药物敏感性研究
生物安全等级2级（含有CMV病毒序列）
培养基90% MEM (MD0300) + 10% 胎牛血清 (FBS, SD0200) + G/A (SD0038)
气相空气95%，二氧化碳5%
培养温度37°C
换液频率每2~3天换液一次
冻存条件55%基础培养基，40%FBS，5%DMSO；液氮冻存
支原体检测阴性
STR鉴定ATCC; CRL-2579
细胞数量1x10^6 cells
纯度规格高纯度，低代数
传代情况每2~3天换液一次

培养教程

RKO-AS45-1人结肠癌转基因细胞培养教程

细胞复苏

  • 预热培养基至37°C。

  • 准备好含有培养基的培养瓶（T25或T75瓶）。

  • 从液氮中取出冻存的rkoas451细胞管，迅速放入37°C水浴中摇动解冻，约1-2分钟。

  • 解冻后立即用75%酒精擦拭细胞管外表面，转移至无菌操作台。

  • 用1 ml预热的培养基缓慢加入rkoas451细胞管中，轻轻混匀。

  • 将rkoas451细胞悬液转移到含有5 ml预热培养基的培养瓶中。

  • 置于37°C，5% CO2培养箱中培养，24小时后换液。

细胞传代

  • 预热培养基至37°C。

  • 准备好新的培养瓶。

  • 吸弃旧培养基，用PBS（磷酸盐缓冲液）洗涤rkoas451细胞一次。

  • 加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C消化2-5分钟，直至rkoas451细胞脱落。

  • 加入2-3倍体积的培养基终止消化，轻轻吹打细胞，使rkoas451细胞完全悬浮。

  • 按1:3或1:4的比例将rkoas451细胞悬液分装到新的培养瓶中。

  • 加入适量预热的培养基，置于37°C，5% CO2培养箱中继续培养。

细胞冻存

  • 预热培养基至37°C。

  • 准备冻存管和冻存液（55%基础培养基，40%FBS，5%DMSO）。

  • 按上述步骤消化并收集rkoas451细胞。

  • 细胞悬液离心，1000 rpm，5分钟，弃上清。

  • 重悬rkoas451细胞于预冷的冻存液中，细胞浓度为1x10^6 cells/ml。

  • 将rkoas451细胞悬液分装到冻存管中，每管1 ml。

  • 逐步降温：先置于-80°C冰箱中过夜，然后转移到液氮中长期保存。

其他注意事项

  • 支原体检测: 每次传代前后应进行支原体检测，确保rkoas451细胞无污染。

  • STR鉴定: 定期进行rkoas451细胞STR鉴定，确认细胞系的身份和纯度。

  • 细胞观察: 每天观察rkoas451细胞生长状态，及时换液和传代，避免细胞过度融合。

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AmelogeninX
CSF1PO8,11
D5S81811,13
D7S8208,10
D13S3178,11
D16S53912.1,13
TH016,10
TPOX10,11
vWA16,24

参考文献

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