HT29 人结肠癌细胞

HT-29细胞是一种人类结肠腺癌细胞系，最初由J·Fogh在1964年通过移植培养方法和含有15% FBS的F12培养液从一名44岁的白人女性结肠腺癌患者的原发肿瘤中分离出来。HT-29人结肠癌细胞在培养中以贴壁生长方式展现上皮细胞样的形态，生长快速，倍增时间约为36-60小时。其生长特性包括形成大的单层和大型细胞群，并且在良好条件下呈现不规则的三角形。

HT29人结肠癌细胞系是一种合适的转染宿主，HT-29细胞在裸鼠中表现出致瘤性，能够形成良性的腺癌，与结肠原发性肿瘤（I级）一致，并且在类固醇处理的仓鼠中也有肿瘤形成的能力。这些细胞在实验室中的应用十分广泛，主要用于癌症研究和毒理学研究中。

HT-29细胞具有合成多种重要蛋白质的能力，包括IgA、CEA、转化生长因子β结合蛋白和粘液素等。此外，它们还表达多种致癌基因，如c-myc、K-ras、H-ras、Myb、sis和fos，并过度产生p53抗原。这些特性使得HT-29人结肠癌细胞成为了癌症研究领域的重要工具。

基因表达：IgA分泌成分；癌胚抗原；转化生长因子β结合蛋白；粘蛋白；myc+；ras+；myb+；fos+；sis+；p53+；abl-；ros；src-；血型A；Rh+；（HLA：A1；A3；B12；B17；Cw5）；

HT29 人结肠癌细胞具有超微结构特征，有微绒毛、微丝、带深色颗粒的大型空泡线粒体、带游离核糖体的光滑和粗糙内质网、脂滴、少数初级溶酶体和许多次级溶酶体。这些细胞表达尿激酶受体，但不具有可检测的纤溶酶原激活剂活性。

HT-29人结肠癌细胞对CD4表达呈阴性，但细胞表面表达半乳糖神经酰胺（一种可能的HIV替代受体）。

HT29 人结肠癌细胞对c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis和fos癌基因的表达呈阳性。p53抗原产生过多，并且p53基因的密码子273中存在G->a突变，导致Arg->His取代。未检测到N-myc癌基因的表达。

HT29 人结肠癌细胞参数表

HT29 人结肠癌细胞成瘤验证

（A）HT29细胞系在 M-NSG 小鼠皮下成瘤曲线 ；（B）HT29 细胞系在成瘤过程中小鼠体重变化趋势（n=5）

HT29人结肠癌细胞培养操作指南

1. 复苏细胞

• 从液氮中取出HT29人结肠癌细胞冻存管，置于37℃水浴中，轻摇解冻。

• 解冻后，将HT29细胞悬液与适量细胞培养基混合均匀。

• 在1000RPM条件下离心4-6分钟，弃去上清液，补充培养基后吹匀。

• 将所有HT29细胞悬液加入培养瓶中，培养过夜。

2. 细胞传代

• 当HT29细胞密度达80%-90%时进行传代。

• 弃去培养上清，用PBS润洗HT29细胞1-2次。

• 加入1ml消化液于培养瓶中，37℃培养箱中消化1-2分钟。

• 观察HT29细胞消化情况，判断消化终点后迅速终止消化，补充培养基。

• 吹匀，离心4-6分钟，弃去上清液，再次补充培养基。

• 将HT29细胞悬液分到新皿中或瓶中。

3. 细胞冻存

• 弃去培养基后，用PBS清洗HT29细胞，加入胰酶进行消化。

• 加入含血清的培养基终止消化后，离心去除上清液。

• 加入新鲜配制的含DMSO的冻存液，冻存管标明HT29细胞种类、日期等信息。

注意事项

• 收货后观察HT29细胞瓶是否完好，培养液是否漏液等异常情况。

• 用75%酒精擦拭HT29细胞瓶表面，检查细胞状态。

• 细胞贴壁后，定期换液并维持细胞正常培养。

• 用相同条件的培养基进行HT29细胞培养，注意培养基的配比。

• 收到HT29细胞后前3天拍照记录细胞状态，便于跟踪细胞生长情况。

• HT29人结肠癌细胞仅供科研使用。