SW480(L15) 人结肠癌细胞

SW480细胞是一种源自50岁白人男性患者的原位直肠腺癌的肿瘤细胞系。该细胞系于1978年11月由A·Leibovitz提交至ATCC，当时已传代至第91代。

此细胞系携带有多个突变，其中包括p53基因的G→A和C→T突变，以及Kras基因的第12位密码子的错义突变。

SW480细胞表达多个癌基因，包括c-Myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos。此外，细胞表达角蛋白，但不表达细胞溶解酶和Matrilysin。SW480细胞的干细胞染色体数目为亚三倍体，常见11-12条标记染色体。在所检查的每个中期的8%中观察到双分钟和双心室。该细胞对裸鼠有致瘤性。

SW480细胞携带有多种突变，包括p53基因和Kras基因的突变。p53基因是一个重要的抑癌基因，而Kras基因突变与多种癌症类型，包括结直肠癌，密切相关

基因表达：癌胚抗原（CEA）0.7ng/106个细胞/10天；角蛋白；转化生长因子β；myc+；myb+；ras+；fos+；sis+；p53+；abl-；ros；src-；HLA：（A2；B8；B17）；血型A；Rh+；免疫过氧化物酶染色角蛋白阳性；c-myc；K-ras；H-ras；N-ras；myb；sis；fos。

该细胞系在CSAp（CSAp-）和结肠抗原3方面呈阴性反应。通过免疫过氧化物酶染色，细胞对角蛋白呈阳性反应。在p53基因的273号密码子中，发现了一个G->A突变，导致Arg->His的置换，同时在309号密码子中发现了C->T突变，导致Pro->Ser的置换。细胞表达的p53蛋白水平上升。该细胞系对c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos癌基因表达呈阳性反应。未检测到N-myc癌基因的表达。有报道显示，这些细胞可以产生GM-CSF（粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子）。

SW480(L15) 人结肠癌细胞参数表

一、细胞复苏（原则 缓冻速溶）：

1. 准备37℃水浴。

2. 从液氮中取出细胞。

3. 迅速置于37℃水浴中，1分钟内融化。

4. 打开培养基瓶盖（开盖前用酒精棉擦拭盖口边缘），瓶盖放在“非工作区”以免污染。

   向离心管中加入10ml新鲜培养基。
   

   用酒精棉擦拭冻存管。
   

5. 开盖，将管内液吸入含10ml新鲜培养基的培养皿（瓶），摇匀，离心5min后新鲜培养基重悬。

6. 将细胞放入CO2培养箱培养，24-48小时后换液。

二、贴壁细胞的传代培养：

1. 打开培养皿（瓶）盖，倾斜吸出所有培养基。

2. 加入2mlPBS洗涤，倾斜吸出PBS。

3. 加入0.5ml-1ml胰酶溶液，混匀。

4. 在37℃消化1-2分钟，观察细胞变圆。

5. 用吸管加入约4ml完全培养基，用吸管将细胞吹打下来，离心培养基重悬。

6. 将细胞悬液分配至新的培养瓶（皿）中，再用移液管加入5-8ml新鲜的培养基，盖盖。

   关闭工作台。
   

三、细胞冻存：

1. 取贴壁细胞的传代培养中的消化离心操作，离心前吸出微量悬液用于计数。

2. 用移液管加入适量冻存液，用吸管移入2ml冻存管（1ml/管），标记冻存管。

3. 进行梯度降温。

4. 12－24小时后放入液氮，记录。

注意事项：

• 该细胞适用于L-15空气培养基，培养时要保持空气培养状态，避免通入二氧化碳。

• 建议使用我方提供的SW480细胞专用培养基，已添加血清和双抗等成分，可直接用于培养SW480细胞。

• 进行无菌操作时，确保接触细胞的任何物品都是灭菌的。

• 在培养细胞前，了解细胞的培养条件，包括培养基组成和添加物。

• 尽量使用无菌一次性耗材，不同时操作多种细胞系，确保细胞的纯度和生长状态。