SW948细胞（人结肠腺癌细胞）

SW948细胞系来源于一位81岁白人女性患者的结肠腺癌。SW948细胞系取自其结肠组织，具体为Dukes C级III型结肠腺癌。SW948细胞表现出上皮样形态，用于研究结肠癌的机制与治疗方法。

SW948细胞特性特征

• 致瘤性：sw948细胞在裸小鼠中具有致瘤性；皮下接种107个细胞后，21天内以100%频率(5/5)形成肿瘤

• 癌基因表达：c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb和fos呈阳性、p53基因呈阳性；未检测到N-myc和sis癌基因表达、abl和src基因呈阴性

• 抗原表达：血型：O型血；Rh阳性、角蛋白免疫过氧化物酶染色呈阳性

• 基因表达：癌胚抗原(CEA)：7ng/106个细胞/10天；结肠特异性抗原(CSAp)：750单位/0.5mL细胞超声处理液；

• 通过免疫过氧化物酶染色，细胞角蛋白呈阳性。

• 同工酶特征：ES-D，1；G6PD，B；PEP-D，1；PGD，A；PGM1，1-2；PGM3，1-2

• 细胞贴壁偏紧聚团生长，传代时消化时间需延长；

• 有漂浮细胞和间隙空泡存在，是细胞正常特性，非细胞状态异常。

SW948细胞参数表

SW948人结肠腺癌细胞培养教程

SW948细胞的传代步骤

• 观察汇合度：当SW948细胞达到80-90%汇合度时进行传代。

• 清洗：用PBS轻轻清洗SW948细胞单层。

• 消化：加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，在37°C孵育2-5分钟。

• 终止消化：加入等体积含血清的培养基，终止消化过程。

• 离心：以1000rpm离心5分钟，收集SW948细胞。

• 接种：按1:3或1:4的比例将SW948细胞重新接种到新的培养瓶中。

换液频率

• 培养基更换：通常每2-3天更换一次SW948细胞的培养基。

SW948细胞冻存

• 冻存液配制：使用90%培养基 + 10% DMSO的冻存液。

• 降温：缓慢降温至-80°C，然后转移至液氮中进行长期保存。

SW948细胞复苏

• 解冻：快速解冻冻存管于37°C水浴中。

• 添加培养基：缓慢将SW948细胞悬液加入预热的培养基中。

• 离心：离心去除DMSO。

• 接种：重悬SW948细胞并接种到培养瓶中。

常见问题及解决方案

• 细胞生长缓慢或停滞

• 原因：SW948细胞的培养基成分不适、血清质量差、培养条件不合适。

• 解决方法：检查并更换培养基和血清，确保培养条件符合要求（37°C，5% CO2只适用于DMEM体系）。

  
  

• 细胞污染

• 原因：操作不当、培养基或器具污染。

• 解决方法：严格无菌操作，定期更换培养基，使用经过灭菌处理的器具。

  
  

• 细胞形态改变

• 原因：SW948细胞的培养条件不适、细胞过度传代、污染。

• 解决方法：调整培养条件，避免过度传代，定期监测细胞形态。

  
  

• 细胞贴壁不良

• 原因：培养基成分不适、SW948细胞消化不完全或过度消化。

• 解决方法：优化培养基成分，控制胰酶消化时间，确保细胞适当贴壁。

  
  

• 细胞死亡率高

• 原因：冻存和复苏过程不当、培养基成分不适、污染。

• 解决方法：优化冻存和复苏步骤，确保培养基成分适当，严格无菌操作。

  
  

• 细胞传代问题

• 原因：SW948细胞的传代比例不当、细胞密度过高或过低。

• 解决方法：根据SW948细胞的生长情况调整传代比例，保持适当的细胞密度。

  
  

• 细胞特性变化

• 原因：长期传代、基因突变、污染。

• 解决方法：定期进行SW948细胞特性鉴定（如STR分析），确保细胞系的纯度和真实性。

  
  

• 角蛋白表达减弱

• 原因：细胞状态不佳、传代次数过多。

• 解决方法：优化培养条件，限制传代次数，保持SW948细胞的特性。

  
  

• 细胞冻存和复苏问题

• 原因：冻存液配制不当、降温速率不合适、复苏过程不当。

• 解决方法：使用正确的冻存液（90%培养基+10%DMSO），缓慢降温至-80°C后转移至液氮中，快速解冻并缓慢加入预热培养基。