
CMT93细胞(小鼠直肠多倍体癌细胞系)
- 来源:直肠
- 细胞特征:贴壁细胞 ,上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:CMT93细胞多倍体癌细胞,含有多于正常二倍体的染色体数量
CMT-93是源自小鼠直肠组织的多倍体癌细胞系,上皮细胞形态,常用于结肠癌和直肠癌的研究。CMT93细胞系从一只19个月大的雄性C57BL/1CRF小鼠分离出来,该小鼠在18个月内每周接受一次N-甲基-N-亚硝基脲(MAMA)的腹膜内注射,最终诱发多倍体癌。
CMT93细胞特性特征
抗原表达:表达H-2b抗原
致瘤性:CMT93细胞在裸小鼠中具有高度致瘤性、皮下接种10^7个细胞后,21天内以100%的频率(5/5)形成肿瘤
生长特性:培养1个月后,CMT93细胞形成腺泡和连接复合体、在裸鼠中可产生大肿瘤(6×10^6个细胞接种物)
分子特征:鼠痘病毒呈阴性
CMT93细胞参数表
细胞名称 | CMT93细胞(小鼠直肠多倍体癌细胞系) |
别名 | CMT-93;小鼠直肠多倍体癌细胞;CMT 93; C57 Mouse Tumor 93 |
物种信息 | 雄性19个月小鼠(Mus musculus);C57BL/1CRF; |
分离部位 | 直肠 |
细胞类型 | 癌细胞,多倍体 |
形态 | 上皮细胞样,贴壁生长 |
ATCC编号 | CCL-223 |
诱发方法 | 每周接受MAMA(N-甲基-N-亚硝基脲)的腹膜内注射,持续18个月 |
建立过程 | 经过四次体内传代和外植体培养获得 |
致瘤性 | 在裸小鼠中皮下接种10^7个细胞,21天内100%形成肿瘤(5/5) |
抗原表达 | H-2b |
病毒检测 | 鼠痘病毒阴性 |
细胞周期 | 周期约24小时;倍增时间约18-24小时 |
培养基 | DMEM高糖培养基;10%胎牛血清,1%双抗 |
培养条件 | 37℃,5% CO2;普通细胞培养处理的塑料表面 |
传代方法 | 胰蛋白酶-EDTA消化 |
传代比例 | 1:2至1:6 |
传代频率 | 每3-4天,或当细胞密度达到70-80% |
冻存介质 | 90%完全培养基 + 10% DMSO |
冻存密度 | ≥1 x 10^6 cells/mL |
储存温度 | 液氮气相(-150℃以下) |
细胞活力 | ≥95%(台盼蓝排除法) |
无菌检测 | 细菌、真菌、支原体均阴性 |
种属鉴定 | PCR方法确认为小鼠来源 |
主要用途 | 结直肠癌研究、药物筛选、肿瘤生物学研究 |
特殊应用 | 多倍体癌细胞研究、肿瘤微环境研究 |
生物安全等级 | BSL-1 |
培养教程
CMT93小鼠直肠多倍体癌细胞系培养教程
CMT-93细胞复苏
将冻存管在37°C水浴中快速解冻,约1-2分钟。
将解冻后的CMT-93细胞悬液转移至含有4mL预热培养基的离心管中。
以1000rpm离心4分钟。
弃去上清,用1-2mL新鲜培养基重悬CMT-93细胞。
将重悬的CMT-93细胞转移到T25培养瓶中,补充至总量6-8mL培养基。
将培养瓶置于37°C、5% CO2培养箱中过夜培养。
次日更换新鲜培养基,去除死CMT-93细胞。
CMT-93细胞传代
当CMT-93细胞密度达到70-80%时进行传代。
弃去旧培养基,用PBS轻柔洗涤CMT-93细胞1-2次。
加入适量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37°C消化2-3分钟。
显微镜下观察CMT-93细胞脱落情况。
加入等体积含血清的培养基终止消化。
以1000rpm离心4分钟,弃去上清。
用新鲜培养基重悬CMT-93细胞。
按1:2至1:6的比例将CMT-93细胞接种到新的培养瓶中。
每3-4天传代一次。
CMT-93细胞冻存
制备冻存液:90%完全培养基 + 10% DMSO。
收集对数生长期的CMT-93细胞。
调整CMT-93细胞密度至≥1 x 10^6 cells/mL。
将CMT-93细胞悬浮在冻存液中。
分装至冻存管中,每管1mL。
使用程序降温盒在-80°C冰箱中缓慢降温。
24小时后转移到液氮中长期保存。
注意事项
定期观察CMT-93细胞形态和生长状态,确保CMT-93细胞健康。
保持无菌操作,防止污染。
避免CMT-93细胞过度生长或密度过低,以确保实验数据的可靠性。
定期进行CMT-93细胞特性鉴定,如短串联重复序列 (STR) 分析,确保CMT-93细胞系的稳定性和准确性。
相关资料
STR鉴定及相关
Mouse STR 1-1 | 15 |
Mouse STR 1-2 | 19,20 |
Mouse STR 2-1 | 16 |
Mouse STR 3-2 | 14 |
Mouse STR 4-2 | 20.3 |
Mouse STR 5-5 | 14,16,17 |
Mouse STR 6-4 | 18,19 |
Mouse STR 6-7 | 15 |
Mouse STR 7-1 | 26.2 |
Mouse STR 8-1 | 16 |
Mouse STR 11-2 | 16 |
Mouse STR 12-1 | 17 |
Mouse STR 13-1 | 17 |
Mouse STR 15-3 | 22.3 |
Mouse STR 17-2 | 15,16 |
Mouse STR 18-3 | 16 |
Mouse STR 19-2 | 14 |
Mouse STR X-1 | 27 |