HCT-15细胞系（人结直肠腺癌细胞系）

HCT-15是从一位男性Dukes' C期直肠癌患者的大肠组织中分离出的结直肠腺癌细胞系，广泛应用于癌症和毒理学研究。hct15细胞系是转染实验的理想宿主。

虽然DNA指纹图谱显示该细胞系与DLD-1细胞系来源于同一患者，但同工酶分析和细胞遗传学检测结果仍存在一定差异，导致一些疑问尚未解决。

HCT-15细胞是一种准二倍体细胞系，其中76%的细胞表现出模式染色体数46（50个中期的染色体数范围为41至47），多倍体发生率为5.1%。染色体核型为46, XY，-8，-11，-17，t(8:17)(p23)，inv(11)(p15.3q13.1)。Y染色体长度较N22稍长，q臂末端有一大段异色荧光。

HCT-15细胞系特性特征

• hct15细胞在裸小鼠身上致瘤,皮下接种10^7个细胞的裸鼠在21天内以100%的频率（5/5）出现肿瘤。

• hct15细胞为CSAp阴性(CSAp-)，但角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。癌胚抗原(CEA)表达量为5.4ng/10^6个细胞/10天。
  

• hct15细胞的同工酶谱为:ES-D,2;G6PD,B;PEP-D,1;PGD,A;PGM1,1-2;PGM3,1
  

HCT-15细胞系参数表

HCT-15人结直肠腺癌细胞系培养教程

细胞复苏

• 将冻存的HCT-15细胞迅速放入37°C的水浴中融化，尽量缩短融化时间以减少HCT-15细胞的损伤。

• 将融化后的HCT-15细胞悬液转移至15ml离心管中，加入5ml预热的完全培养基进行稀释。

• 以1000rpm离心5分钟，弃去上清液，随后用5ml新鲜的培养基重悬HCT-15细胞。

• 将重悬后的HCT-15细胞接种到T25培养瓶中，并加入适量的培养基，确保HCT-15细胞充分扩展。

常规传代

• HCT-15细胞的传代频率为每2-3天进行一次，以维持HCT-15细胞的良好生长状态。

• 在传代过程中，首先弃去旧的培养基，并用PBS缓冲液洗涤HCT-15细胞层，以去除残留的血清和代谢废物。

• 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，并在37°C下消化3-5分钟，期间通过显微镜观察HCT-15细胞的脱落情况。

• 一旦HCT-15细胞脱落，立即加入培养基终止消化作用。

• 将HCT-15细胞悬液转移至15ml离心管中，以1000rpm离心5分钟。

• 弃去上清后，加入新鲜培养基重悬HCT-15细胞，并按1:3的比例接种到新的培养瓶中。

• HCT-15细胞应在37°C、5% CO2培养箱中继续培养，以确保HCT-15细胞稳定的生长环境。

注意事项

• HCT-15细胞复苏后，应尽快更换新鲜培养基，以促进HCT-15细胞恢复。

• 若HCT-15细胞呈悬浮状态，需及时离心并用含15% DMSO的培养基重悬HCT-15细胞。

• 培养过程中，需定期检查HCT-15细胞的生长状态，确保HCT-15细胞健康并避免过度生长。

• 操作过程中需严格遵循无菌技术，以防止HCT-15细胞交叉污染。

FBS浓度对细胞生长的影响

• 低浓度FBS培养基：在含10% FBS的RPMI-1640培养基中，HCT-15细胞保持良好的上皮细胞样贴壁生长。当FBS浓度降低至5%时，HCT-15细胞增殖速度明显减慢，生长状态不佳。

• 无血清培养基：HCT-15细胞在无血清培养基中无法正常生长，出现大量HCT-15细胞脱落和死亡。因此，无血清培养基不适合HCT-15细胞的常规培养，建议补充至少10%的FBS。

• 高浓度FBS培养基：当FBS浓度提高至15%或20%时，HCT-15细胞的增殖速度与10% FBS组相比并无显著差异。过高的血清浓度可能会对HCT-15细胞的生理状态产生不利影响，因此不建议在常规培养中使用过高浓度的FBS。