LoVo细胞（人结肠癌细胞）

LoVo细胞系是一种来源于结肠腺癌的细胞系，最初于1971年从一名56岁白人男性患者的左锁骨上区转移瘤中分离。该患者患有结肠腺癌，且疾病已扩散至锁骨上区域，病程为IV期（Dukes C期）。LoVo细胞的染色体表现为超二倍体，核型较为均一且稳定，包含3条标记染色体，2S成分约占2.7%。lovo细胞在癌症、毒理学和免疫学研究中应用广泛，是适合用于转染实验的宿主。

lovo细胞特性特征

• 致瘤性：lovo细胞在裸小鼠中以100%的频率（5/5）致瘤，接种10^7个细胞后，21天内出现肿瘤。
  

• lovo细胞表达多种癌基因：myc+；myb+；ras+；fos+；p53+；sis；abl-；ros；src-；未检测到N-myc和sis癌基因的表达。

• 抗原表达：HLA抗原表达HLA A11、B15、B17、Cw1、Cw3；血型: 表达B型血。

• 癌胚抗原（CEA）: lovo细胞表达水平为908 ng/10^6个细胞/10天。
  

• 同工酶：ES-D，1；G6PD，B；PGD，A；PGM1，2；PGM3，1-2

• 肿瘤特异性核基质蛋白: 表达CC-3和CC-4。

• CSAp: 表达阴性（CSAp-）

• 结肠抗原3: 表达阴性

lovo细胞参数表

LoVo人结肠癌细胞培养教程

LoVo细胞复苏

• 预热水浴至37℃。准备无菌培养基及相关培养器具。

• 从液氮罐中取出LoVo细胞冻存管，迅速置于37℃水浴中，轻轻摇动约1-2分钟，直至LoVo细胞完全融化。
  

• 将融化后的LoVo细胞悬液转移至装有10 mL预热培养基的离心管中，轻轻混匀。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。

• 用5 mL新鲜培养基轻轻重悬LoVo细胞。

• 将重悬后的LoVo细胞悬液移入T25培养瓶中，置于37℃、5% CO₂培养箱中培养。
  

LoVo细胞传代方法

• 传代准备:当LoVo细胞密度达到80%-90%汇合时，准备进行传代。

• 准备新鲜培养基。

• 用PBS洗涤LoVo细胞，去除残余培养基。

• 加入0.25%胰蛋白酶，置于37℃培养箱中孵育2-5分钟，观察LoVo细胞从培养瓶表面脱落。

• 加入培养基中和胰蛋白酶，轻轻吹打混匀LoVo细胞。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。

• 将LoVo细胞重悬于新鲜培养基中，按1:2至1:3比例接种到新的培养瓶中。

注意事项

• 无菌操作: 所有操作应在生物安全柜内进行，以防止LoVo细胞污染。

• 细胞监测: 定期检查LoVo细胞的形态和生长情况，以确保其健康状态。

• 细胞冻存: 传代后的LoVo细胞可进行冻存，使用含10% DMSO的冷冻保存液。

LoVo细胞在不同培养基中的生长特性

含血清培养基 (SSM)

• 生长特性: 在含血清培养基中，LoVo细胞以贴壁方式生长。细胞在接种后数小时内开始贴壁，48小时后形成均匀的贴壁细胞层。

• 细胞形态: LoVo细胞呈不规则多边形，生长舒展，细胞间连接紧密，边界清晰。

• 生长速度: LoVo细胞生长速度较快，细胞体积较大。

无血清培养基 (SFM)

• 生长特性: 在无血清培养基中，LoVo细胞倾向于形成悬浮的肿瘤球。细胞在24-48小时内形成小的肿瘤球，72小时后肿瘤球体积增大。

• 细胞形态: LoVo细胞形成的肿瘤球结构较松散，部分肿瘤球形态致密且一致。

• 生长速度: LoVo细胞在无血清培养基中的生长相对较慢，细胞体积较小，并且具有自我更新和分化的潜力。

无血清培养基中添加物的作用

• 表皮生长因子 (EGF): 促进LoVo细胞增殖和生长，增强细胞生存能力。

• 碱性成纤维生长因子 (bFGF): 支持LoVo细胞增殖和分化。

• 白血病抑制因子 (LIF): 维持LoVo细胞的未分化状态，促进自我更新。

• 胰岛素: 促进LoVo细胞代谢和生长，增强细胞粘附性。

• 地塞米松: 具有抗炎作用，调节LoVo细胞生长环境。

• 尼克酰胺: 促进LoVo细胞代谢，增强生存能力。

• L-谷氨酰胺: 提供氨基酸，支持LoVo细胞生长和代谢。

• 2-巯基乙醇: 作为抗氧化剂，保护LoVo细胞免受氧化损伤。

• HEPES: 作为缓冲剂，维持LoVo细胞培养基pH值的稳定。