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货号：STM-CL-5275 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
NCI-H716细胞系 (人结直肠腺癌细胞系)
- 来源：盲肠；疾病：结直肠腺癌
- 细胞特征：半贴半悬， 上皮细胞，悬浮并部分聚团生长
- 培养基：生长培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
- 其他：NCI-H716细胞含有多巴脱羧酶；细胞质中有核心致密的内分泌型颗粒
NCI-H716细胞系是一种人源结直肠腺癌细胞系，于1984年从一名33岁白人男性结直肠腺癌患者的盲肠腹水中分离。该患者在细胞系建立前接受过5-氟尿嘧啶(5-FU)治疗。ncih716细胞系表现出淋巴母细胞样形态，是一种亚二倍体人类细胞系。
NCI-H716细胞系细胞特性
染色体特征
模态数为61，范围为55到64
模式染色体数目61出现在28%的细胞中
高倍体率为1.2%
每个细胞中有12条标记染色体，包括t(7q, 16q)、t(5p, 7p)等
每个细胞中都发现大量双微染色体(DM)
21号染色体缺失；9、11、13、20、22号染色体和X染色体为单拷贝
Q带载玻片制备中未检测到Y染色体
生长特性
半贴壁半悬浮生长
细胞形态：上皮细胞样，主要呈悬浮状态，少量贴壁，部分细胞形成聚团
倍增时间：约50小时
生化特性
含有多巴脱羧酶
细胞质中有核心致密的内分泌型颗粒
不表达TAG-72或CA19-9抗原
不产生癌胚抗原(CEA)
同工酶谱
AK-1, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 1-2; Me-2, 1; PGM1, 1; PGM3, 1-2
致瘤性
在裸小鼠中具有强烈致瘤性。皮下注射1×10^7个细胞后，21天内100%（5/5）的裸鼠形成肿瘤。
NCI-H716细胞系参数表
| 细胞名称 | NCI-H716细胞系 (人结直肠腺癌细胞系) |
| 细胞 别称 | NCI-H716 ; NCI H716; h716; H-716; NCIH716 |
| 种属组织来源 | 人（Homo sapiens）; 盲肠；结直肠腺癌 |
| 患者信息 | 33岁白人男性 |
| 建系时间 | 1984年 |
| 建系前处理 | 5-氟尿嘧啶(5-FU)治疗 |
| 细胞类型 | 癌细胞；腺癌细胞 |
| 生长特性 | 半贴壁半悬浮生长 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样，主要悬浮，少量贴壁，部分形成聚团 |
| 特殊形态 | 淋巴母细胞样 |
| 倍增时间 | 约50小时 |
| 基础培养基 | RPMI-1640+10% FBS+青霉素/链霉素（PS） |
| 培养环境 | 37°C，5% CO2 |
| 传代比例 | 1:3-1:4 |
| 换液频率 | 每周2-3次 |
| 冻存液成分 | 55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO；液氮 |
| 复苏方法 | 37°C水浴，快速解冻 |
| 特殊酶 | 多巴脱羧酶 |
| 细胞内颗粒 | 核心致密的内分泌型颗粒 |
| 抗原表达 | 不表达TAG-72、CA19-9、CEA |
| 同工酶谱 | AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1, PGM3 |
| 致瘤性 | 裸小鼠中表现出强烈的致瘤性，接种10^7个细胞的裸鼠在21天内以100%的频率形成肿瘤 |
| 药物敏感性 | 5-FU：已经过治疗，可能存在耐药性 |
| 生物安全等级 | BSL-1 |
| 支原体检测 | 阴性 |
| 细胞代数 | 10代以内 |
| 保藏信息 | ATCC（编号CCL-251）; 中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心 |
| 主要用途 | 结直肠癌研究、肠道内分泌功能研究、药物筛选和评估、肿瘤生物学研究 |
培养教程
NCI-H716人结直肠腺癌细胞系培养教程
细胞复苏
从液氮中取出NCI-H716细胞冻存管，迅速在37°C水浴中解冻
解冻后，立即将细胞悬液转移至预热的培养基中以最大限度地保持细胞活力
通过1000rpm的离心步骤清除冻存液，然后重新悬浮细胞并转移至预先准备好的培养瓶中
日常培养
每隔2-3天更换一次培养基，以维持细胞在70-80%的密度范围内生长
定期观察细胞的形态和生长状态，确保细胞健康和培养条件的维持
细胞传代
收集NCI-H716细胞的悬浮部分，轻柔地吹洗培养瓶底部以收集轻度贴壁的细胞
通过1000rpm的离心步骤清除旧培养基，然后将细胞重新悬浮并按照1:3-1:4的比例传代到新的预热培养瓶中
细胞冻存
收集对数生长期的NCI-H716细胞以确保最佳冻存效果
准备适合细胞的冻存液：含55%基础培养基，40% FBS和5% DMSO
调整细胞密度至1-5×10^6 cells/mL后，分装细胞悬液至冻存管中，先放置于-80°C过夜，随后长期存储于液氮罐中
注意事项
NCI-H716细胞主要以悬浮生长为主，少量贴壁，传代时需特别注意收集悬浮细胞以确保细胞健康和一致性
定期检查细胞的形态和生长状态，确保细胞培养条件的稳定性和无菌性
细胞代数不应过高，建议在10代以内使用细胞以保持其生物学特性和实验结果的一致性
相关资料
STR鉴定及相关
| Amelogenin | X |
| CSF1PO | 11 |
| D2S1338 | 14,16 |
| D3S1358 | 16,18 |
| D5S818 | 11 (AddexBio=C0009022/5006; ATCC=CCL-251; CCRID; Cosmic-CLP=908458; PubMed=25877200; PubMed=25926053) |
| 12 (KCLB=10251) | |
| D7S820 | 10,11 |
| D8S1179 | 12.2,14,15 (CCRID) |
| 15 (ATCC=CCL-251; PubMed=25877200) | |
| D13S317 | 8,11 |
| D16S539 | 11,12 |
| D18S51 | 15,16 |
| D19S433 | 15,18.2 |
| D21S11 | 32.2 |
| FGA | 20,22 |
| Penta D | 9 |
| Penta E | 7,12 |
| TH01 | 6,9.3 |
| TPOX | 8,11 |
| vWA | 16 (CCRID) |
| 16,17 (AddexBio=C0009022/5006; ATCC=CCL-251; Cosmic-CLP=908458; KCLB=10251; PubMed=25877200; PubMed=25926053) |
