HCT116细胞系(人结肠癌细胞)

HCT 116细胞的来源可以追溯到1979年，当时美国科学家M·Brattain及其团队首次成功地从一位患有结肠癌的成年男性病人的组织样本中分离出这种细胞。结肠癌是一种常见的恶性肿瘤，起源于结肠（大肠）内的上皮细胞，通常是由于基因突变或其他遗传变化导致细胞的异常增殖和恶性转化。

HCT 116细胞系是从一名实际患者的癌症组织中分离出来的，并且能够在体外条件下持续增殖和传代。

HCT116细胞系是人结肠癌上皮细胞，具有ras原癌基因密码子13的突变，可作为该突变的PCR检测阳性对照。其干细胞染色体数目接近二倍体，模式数为45（62%），多倍体发生率为6.8%。所有中期细胞均存在标记10q+和t（？8p；18q），80%的核型细胞存在t（9q；？16p-）。当存在t（9q；？16p-）时，N16为单体，否则为二体；而N10和N18始终为单体，其他染色体均为二体。Q带观察显示有Y染色体存在，但并非所有细胞都具有（在G带核型中，50%的细胞缺乏Y）。此外，HCT116细胞对裸鼠具有致瘤性。

在基因表达方面，每10天每106个细胞可检测到1ng的癌胚抗原（CEA）。同工酶表达方面，AK-1，ES-D，G6PD，GLO-I，PGM1和PGM3均为阳性。通过免疫过氧化物酶染色，细胞对角蛋白呈阳性。对转化生长因子β1（TGF-β1）和β2（TGF-β2）也呈阳性反应。

HCT116细胞系产品参数表

HCT116细胞系应用

• 探究药物对结直肠癌细胞的影响： 例如，通过研究药物对HCT116细胞增殖、迁移和侵袭的影响，可以深入了解结直肠癌发生和发展的机制。某些药物如白霉素和Raddeanin A已被证明对HCT116细胞具有一定的抑制作用。

• 研究药物对结直肠癌细胞生长的体外作用机制： 包括细胞凋亡和细胞周期改变等。通过这些研究可以评估药物的治疗效果和副作用，以及探索其可能的作用机制。

• 探究药物对结直肠癌治疗的敏感性和耐药性： 了解药物对HCT116细胞的治疗效果，有助于预测患者对治疗的响应，并为个体化治疗提供依据。

• 开发新的癌症相关信号通路： 例如，研究Notch和Wnt信号通路在HCT116细胞中的作用，有助于发现新的治疗靶点。

• 开发LncRNA和miRNA在结直肠癌治疗中的新途径： 如YWHAE长链非编码RNA通过调节信号通路与miRNA竞争，为结直肠癌的治疗提供新的思路。

此外，HCT116细胞也广泛用于CRISPR/Cas9技术的研究中。通过CRISPR/Cas9技术，可以敲除或突变HCT116细胞中的特定基因，从而深入研究这些基因在结直肠癌发生和发展中的作用机制，为临床治疗提供新的思路。

一、培养条件：

• 培养基： 使用RPMI-1640培养基（不含Hepes），添加10%胎牛血清和1%双抗，并且含有800ng/ml的Taxol。

• 温度： 在37.0°C下进行培养。

• 气体环境： 采用95%空气和5%CO2的气体组合。

二、培养步骤：

细胞复苏：

• 将含有HCT 116细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含有预热DMEM完全培养基的离心管中混合均匀。

• 离心后弃去上清液，重悬细胞，并加入含有完全培养基的培养瓶中，在37℃培养箱中培养过夜。

细胞传代：

• 细胞密度达到80%~90%时，去除培养基，用PBS洗涤细胞。

• 加入含有胰蛋白酶的消化液消化细胞，终止消化后加入新的培养基。

• 根据需要进行传代，传代比例为1:2~1:5。

三、细胞保存：

• 冻存条件： 使用90%血清和10%DMSO的冻存液，放入液氮中保存。

• 保存时间： 经过适当处理，HCT 116细胞可以保存至少两年。

四、注意事项：

• 无菌操作： 在进行HCT 116细胞培养时，务必保持无菌操作，避免细菌和真菌的污染。

• 细胞状态： 细胞在培养过程中应保持良好的状态，生长密度适中，不宜过度密集或过度稀疏。

• 细胞检测： 建议定期检测HCT 116细胞的形态和生长状态，确保细胞的稳定性和活力。

五、使用限制：

• 科研用途： HCT 116细胞仅限于科研用途，不得用于临床治疗或其他非科研目的。

• 合规操作： 在使用HCT 116细胞进行实验时，应遵守相关的伦理规定和实验室操作规程。