货号：STM-CL-5365 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

LS174T细胞（人结肠腺癌细胞）

来源：直肠；结直肠腺癌
细胞特征：贴壁细胞，上皮细胞样
培养基：MEM（ATCC改良）＋10% FBS＋1% P/S
其他： LS 174T细胞的角蛋白染色呈阳性；p53抗原表达为阴性，但mRNA表达为阳性

Tags：结肠腺癌细胞

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价格：￥ 1,300.00

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LS 174T细胞系来源于一名58岁白人女性的结直肠腺癌患者，分离自其结肠组织。ls174t细胞系来源于杜克氏B型腺癌，通过将组织切碎后，经过10个月的培养获得。LS174T细胞展示了上皮形态，并用于癌症研究。
LS 174T细胞系具有45, X；X染色体缺失1条，未见其他染色体畸变。

LS174T细胞特性特征

癌基因表达：myc+；myb+；ras+；fos+；p53+；sis；abl-；ros；src-
抗原表达：直肠抗原3阳性、p53抗原表达阴性，但mRNA表达阳性、角蛋白染色阳性、HLA-A2、B13、B50表达、血型为O型
基因表达和产物：产生大量癌胚抗原（CEA）、表达白细胞介素10（IL-10）、表达白细胞介素6（IL-6）、产生粘蛋白
致瘤性：ls174t细胞在裸小鼠中具有高度致瘤性（皮下接种10^7个细胞后21天内100%形成肿瘤）
ls174t细胞比亲本细胞系LS 180更易于传代培养
ls174t细胞是LS 180细胞系的胰蛋白酶化变种，通过在传代培养方案中使用胰蛋白酶来维持。

LS174T细胞参数表

细胞名称	LS174T细胞（人结肠腺癌细胞）
细胞别称	Ls174T; LS174t; Ls-174-T; LS-174-T; LS 174 T; LS-174T; Ls-174T; LS 174T; LS-174;LS174
来源	58岁白人女性结直肠癌腺癌患者的结肠
形态	上皮细胞样，贴壁生长
组织类型	直肠；结直肠腺癌
生物安全等级	1级
培养基	90% DMEM高糖 + 10% 胎牛血清 + 1% GA 或 MEM + 10% FBS + 1% P/S
培养条件	37°C，95% 空气，5% 二氧化碳
传代信息	比例1:2 - 1:4；时间24~48小时；培养基更换每2-3天
冻存条件	60% 基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO；储存于液氮气相
突变基因	CTNNB1, KRAS, NF1
致瘤性	在裸小鼠中高度致瘤（皮下接种10^7个细胞后21天内100%形成肿瘤）
抗原表达	直肠抗原3阳性；p53抗原阴性但mRNA阳性；角蛋白阳性
HLA表型	HLA-A2、B13、B50
血型	O型
癌基因表达	c-myc+, N-myc+, H-ras+, N-ras+, Myb+, fos+, p53+
基因表达产物	癌胚抗原(CEA)，IL-10，IL-6，粘蛋白
CEA产量	1944 ng/10^6细胞/10天（ATCC种子库）
细胞特征	丰富的微丝和细胞质粘液素液泡
亲本细胞	LS 180的胰蛋白酶化变种
相关细胞系	与ATCC CL-187来源于同一个肿瘤
应用	3D细胞培养，癌症研究，药物耐受性研究
质量控制	无支原体/STR鉴定，细菌/真菌/内毒素检测，复苏存活率>90%

培养教程

LS174T人结肠腺癌细胞培养教程

细胞复苏

从液氮中取出冻存管，迅速置于37°C水浴中解冻，摇动管子以确保均匀受热，解冻时间约1-2分钟。
解冻后，用75%酒精消毒冻存管外表面，然后在无菌操作台上将LS174T细胞悬液转移至含10 ml完全培养基的离心管中。
以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。
加入10 ml新鲜完全培养基，轻轻吹打LS174T细胞以确保均匀悬浮。
将细胞悬液转移至培养瓶中，放入培养箱中进行培养。

细胞培养

每2-3天更换一次培养基，以保持LS174T细胞的生长环境。
当LS174T细胞汇合度达到70-80%时，进行传代操作。

细胞传代

吸去旧培养基，用无钙镁PBS清洗LS174T细胞1-2次。
加入适量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C孵育1-3分钟，观察细胞是否脱落。
轻轻敲打培养瓶以确保LS174T细胞完全脱落。
添加完全培养基以中和胰蛋白酶，轻轻吹打细胞以均匀悬浮。
按1:2至1:4的比例将LS174T细胞悬液分装到新的培养瓶中，加入新鲜培养基。
将培养瓶放入培养箱继续培养。

细胞冻存

当LS174T细胞达到70-80%汇合度时，按传代步骤收集细胞。
以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。
加入冻存液（60%基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO），轻轻吹打LS174T细胞使其均匀悬浮。
将细胞悬液分装到冻存管中，每管1 ml。
将冻存管置于程序降温盒中，-80°C预冻过夜。
次日转移至液氮中进行长期保存。

注意事项

在细胞培养和处理过程中务必保持无菌操作，以防LS174T细胞污染。
胰蛋白酶消化时间需严格控制，以免对LS174T细胞造成损伤。
冻存和复苏过程应尽量避免对LS174T细胞的机械损伤。

STR鉴定及相关

Amelogenin	X
CSF1PO	10,11,13,14 (DSMZ=ACC-759)
	10,13,14 (AddexBio=C0009013/379; ATCC=CL-188; PubMed=25926053)
	10,14 (CCRID; CLS=300392; KCLB=10188; PubMed=25877200; TKG=TKG 0406)
D2S1338	18,22 (CLS=300392)
D2S1338	18,21,22 (ATCC=CL-188; DSMZ=ACC-759)
D3S1358	15,17 (ATCC=CL-188; CLS=300392; KCLB=10188; PubMed=25877200)
D3S1358	14,15,16,17 (DSMZ=ACC-759)
D5S818	11,14,15 (DSMZ=ACC-759)
	11,15 (AddexBio=C0009013/379; CCRID; CLS=300392; KCLB=10188; PubMed=25877200; PubMed=25926053; TKG=TKG 0406)
	11,15,16 (ATCC=CL-188)
D7S820	10,10.3 (TKG=TKG 0406)
	10.3,11 (ATCC=CL-188; DSMZ=ACC-759; PubMed=25877200)
	11 (AddexBio=C0009013/379; CCRID; CLS=300392; KCLB=10188; PubMed=25926053)
D8S1179	11,12,16 (CLS=300392)
	12,15 (DSMZ=ACC-759)
	12,15,16 (ATCC=CL-188)
	12,16 (PubMed=25877200)
D13S317	9,10,11 (DSMZ=ACC-759)
	10 (AddexBio=C0009013/379; ATCC=CL-188; CCRID; PubMed=25877200; PubMed=25926053)
	10,11 (CLS=300392; KCLB=10188; TKG=TKG 0406)
D16S539	11,12,13 (DSMZ=ACC-759)
D16S539	11,13 (AddexBio=C0009013/379; ATCC=CL-188; CCRID; CLS=300392; PubMed=25877200; PubMed=25926053; TKG=TKG 0406)
D18S51	11,12,13 (DSMZ=ACC-759)
D18S51	11,13 (ATCC=CL-188; CLS=300392; PubMed=25877200)
D19S433	13,14,15 (CLS=300392)
	13,15,23 (DSMZ=ACC-759)
	14,15 (ATCC=CL-188)
D21S11	29,31 (ATCC=CL-188; PubMed=11416159; PubMed=25877200; PubMed=25926053)
	29,30,31 (CLS=300392)
	30,31,31.3,32,32.3,33 (DSMZ=ACC-759)
FGA	14,20,21,22 (DSMZ=ACC-759)
FGA	21,22 (ATCC=CL-188; CLS=300392; KCLB=10188; PubMed=25877200)
Penta D	10
Penta E	14,15,16 (ATCC=CL-188; DSMZ=ACC-759)
Penta E	15,16 (CLS=300392; PubMed=25877200)
TH01	6,7
TPOX	8,9
vWA	15,16,17,18,19 (DSMZ=ACC-759)
	15,17 (AddexBio=C0009013/379; CCRID; CLS=300392; KCLB=10188; PubMed=11416159; PubMed=25877200; PubMed=25926053; TKG=TKG 0406)
	15,17,18 (ATCC=CL-188)