全国客服电话
021-52237832
网站首页 > 细胞系 > 人源细胞系 > 泌尿系统 > > 293F细胞(人胚肾上皮细胞)
293F细胞(人胚肾上皮细胞)货号:STM-CL-5369 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

293F细胞(人胚肾上皮细胞) (暂不提供)

  • 来源:胚肾
  • 细胞特征:贴壁细胞 ,上皮细胞样
  • 培养基:293F细胞专用培养基
  • 其他:293F细胞表达腺病毒的E1A基因,该基因参与转录激活,使细胞能够高效表达蛋白质
Tags: 胚肾上皮细胞    
价格:¥ 1,400.00
提供STR鉴定报告

293-F人胚肾上皮细胞是从HEK-293细胞系克隆并适应于293培养基的细胞系。HEK-293细胞系最初由荷兰科学家Alex van der Eb于1973年通过用腺病毒5型DNA转染正常人胚胎肾细胞建立。293-F细胞系适应于悬浮培养,非常适合行大规模生产。

293F细胞特性特征

  • 293F细胞系源自HEK-293细胞,后者通过整合腺病毒5型DNA而永生化。

  • 293F细胞表达腺病毒的E1A基因,该基因参与转录激活,使细胞能够高效表达蛋白质。

  • 293F细胞以其高效的蛋白表达能力著称,能够在无血清培养基中快速生长并表达高水平的重组蛋白。

  • 293F细胞具有高转染效率,适合用于重组蛋白和病毒载体的生产。

  • 基因表达:293-F细胞表达腺病毒E1A基因。

  • 染色体特征:与其他HEK-293衍生细胞系类似,293-F细胞可能具有不正常的核型,通常表现出比正常人类细胞更多的染色体数

293F细胞参数表

细胞名称293F细胞(人胚肾上皮细胞)
细胞别称HEK-293-F; HEK293-F; HEK-293F; HEK293F; 293-F; 293F; HEK293-F; 人胚肾细胞-F克隆细胞
种属来源
组织来源胚肾
细胞形态上皮细胞样
生长特性贴壁生长;悬浮生长
细胞类型转化细胞系
建立年份原始HEK-293细胞建立于1973年
培养基MEM培养基,90%;FBS,10%
无血清培养可在无血清培养体系中快速生长
生长条件气相:空气,95%;二氧化碳,5%;温度:37℃
传代方法1:2至1:6,每周2次
冻存条件90%完全培养基+10%DMSO,液氮储存
消化液0.25% Trypsin-0.53mM EDTA
基因整合含有腺病毒5型DNA片段
基因表达表达E1A蛋白
转染效率高,适合各种转染方法(如磷酸钙、PEI或脂质体)
蛋白表达高效表达重组蛋白
病毒生产适用于重组蛋白和病毒载体的生产
特殊应用适合大规模生物反应器生产
支原体检测阴性
生长速度快速(F代表Fast-growth)
贴壁特性相对293T细胞,贴壁性较好
耐受性可耐受低Ca²⁺培养体系
细胞系来源由HEK-293细胞衍生
染色体特征通常具有不正常核型,染色体数目多于46条
适用领域生物技术、制药、基因治疗研究

培养教程

293F人胚肾上皮细胞培养教程

细胞复苏

  • 解冻293-F细胞:将冻存管中的1mL 293-F细胞悬液迅速放入37℃水浴中解冻,轻轻摇晃以确保均匀解冻。

  • 添加培养基:解冻后,立即加入4mL培养基以稀释293-F细胞悬液,并轻轻混合均匀。

  • 离心:在1000RPM下离心4分钟,弃去上清液。

  • 补加培养基:补加1-2mL培养基,轻轻吹打混匀。

  • 培养:将293-F细胞悬液转移至培养瓶中,或转移至10cm培养皿中加入约8mL培养基,培养过夜。

  • 换液与检查:次日换液并检查293-F细胞的密度。

细胞传代

  • 传代条件:当293-F细胞的密度达到80%-90%时进行传代。

  • PBS洗涤:弃去培养上清液,用无钙镁PBS洗涤293-F细胞1-2次。

  • 消化293-F细胞:加入1mL消化液(0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA),在37℃培养箱中消化1-2分钟。

  • 观察与终止消化:显微镜下观察293-F细胞是否大部分圆形并脱落,若是,迅速将培养瓶轻敲后加入少量培养基终止消化。

  • 离心处理:加入6-8mL培养基,轻轻混匀,离心1000RPM下4分钟,弃去上清液。

  • 分瓶培养:补加1-2mL培养液,轻轻混匀,将293-F细胞悬液按1:2比例分配至新的培养皿或培养瓶中,每瓶加入8mL培养基。

细胞冻存

  • 准备冻存液:配制90%完全培养基与10% DMSO的冻存液。

  • 细胞悬液制备:将293-F细胞悬液与冻存液混合。

  • 分装:将混合后的293-F细胞悬液分装至冻存管中。

  • 程序降温:逐步降温至-80℃,然后转移至液氮中长期保存。

备注

  • 293-F细胞系源自HEK-293细胞系,适合悬浮培养,广泛应用于重组蛋白和病毒载体的生产。

  • 293-F细胞在无血清培养基中也能快速生长,并能够达到高细胞密度,从而支持大规模的生物制品生产。

  • 虽然293-F细胞可以进行贴壁生长,但其主要优势在于悬浮培养。

相关资料

查看完整内容 >

STR鉴定及相关

参考文献

查看完整内容 >