
hek293细胞(人胚肾细胞 )
- 来源:293 [HEK-293] 人胚肾细胞是从人类胚胎的肾脏中分离出的表现出上皮形态的细胞系
- 细胞特征:293细胞是上皮细胞的一种,通常在培养基中呈现粘附生长的特征。倾向于形成单层细胞(Monolayer),并具有某些致瘤性
- 培养基:MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S
- 其他:贴壁能力较弱;染色体核型:亚三倍体,含有特定的染色体重排
HEK293细胞来源
人胚肾细胞(Human Embryonic Kidney Cells,简称HEK)是一种源自人类胚胎肾脏的细胞系,其中最常见的是HEK293和其衍生的293T细胞。
HEK293细胞源自夭折人类胚胎肾脏,在1973年由Van Der Eb和Graham博士成功培养,其命名中的数字“293”实际上是指这个细胞系的培养过程中的第293次实验产生的结果。
HEK293细胞系最初是通过将人类腺病毒(Adenovirus)的DNA转染到人类胚胎肾细胞中,使其表达了腺病毒的基因而得以永生化。
293T细胞作为293细胞的一种衍生细胞系,在1976年由F.L.Graham和J.S.Miley成功培育而成,其主要特点是通过转染SV40 T抗原基因而产生的高转染效率。
染色体核型
HEK-293细胞是一个亚三倍体的人类细胞系。模态染色体数目为64,出现在30%的细胞中。具有较高倍性体的细胞的比率为4.2%。der(1)t(1;15)(q42;q13)、der(19)t(3;19)(q12;q13),其他四个标记染色体是大多数细胞共有的。其他五个染色体标记仅出现在某些细胞中。标记der(1)和M8(或Xq+)常配对。N17和N22有四个复制体。在大多数细胞中,除了三个复制的X染色体外,还有成对的Xq+和一个Xp+。
HEK-293细胞的特性和基因组构成
HEK-293细胞有致瘤性,可在裸鼠体内形成肿瘤。
尽管早期的报告表明,HEK-293细胞含有来自病毒基因组右端和左端的腺病毒5 DNA[RF32764],但只存在左端序列。细胞表达由整合素β-1亚基和玻璃体凝集素受体α-v亚基组成的玻璃体凝集素的不寻常细胞表面受体。对Ad5插入物进行克隆和测序,并确定从nts1到4344的共线序列整合到19号染色体19q13.2)中。
HEK-293人胚肾细胞产品参数表
名称 | HEK-293(人胚肾细胞) |
衍生品 | 293T, 293FT, 293A, 293E, 293F, 293H, 293S |
种属 | 人类 |
组织来源 | 胎儿肾;以腺病毒5DNA进行转化 |
年龄(性别) | 胎儿 |
细胞类型 | 转化细胞系 |
形态特点 | 上皮细胞 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
致瘤性 | + |
产物或抗原 | 大T抗原 |
染色体核型 | 亚三倍体,含有特定的染色体重排 |
生长特性 | 粘附 |
文献评价 | 293细胞系含有Ad5基因组左端序列,表达玻基结合素受体 |
一段共线序列整合到19号染色体上 | |
冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO;温度:液氮 |
生长培养基 | MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S |
传代 | 0.25% 胰酶 + 0.53 mM EDTA 消化液 |
冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮 |
培养基更换 | 每2-3天 |
应用 | 基因表达、蛋白质生产、病毒载体生产、癌症研究等 |
突变时间 | 约80小时 |
致瘤性 | 有,裸鼠体内可形成肿瘤 |
受体表达情况 | 玻连蛋白受体(vitronectin) |
保藏机构 | ATCC; CRL-1573 ATCC: PTA-4488 DSMZ: ACC-305;ECACC: 85120602 |
培养教程
培养说明书:
使用前检查细胞的健康状况,确保无细菌或真菌污染。
使用MEM培养基+10% FBS + 1% P/S培养细胞。
在37°C的CO2孵育箱中培养细胞,每2-3天换液1次。
传代比例为1:3-1:4,可根据实验需要进行调整。
培养过程中细胞贴壁松散,操作时需轻柔处理,避免细胞损伤。
细胞在液氮中保存,并定期检查冻存液的完整性。
传代时使用0.25% Trypsin-EDTA,注意不要过度消化。
若出现异常现象或问题,请及时咨询保藏机构或相关专业人士。
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STR鉴定及相关
STR点位信息
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 19 |
D3S1358 | 15,17 |
D5S818 | 8,9 |
D7S820 | 11,12 |
D8S1179 | 12,14 |
D13S317 | 12 (JCRB; TKG) |
12,14 (ATCC; CCRID; CLS; DSMZ; ECACC; KCLB; PubMed=15218237; RCB) | |
D16S539 | 9 (DSMZ) |
9,13 (ATCC; CCRID; CLS; ECACC; JCRB; RCB; TKG) | |
D18S51 | 17 (PubMed=15218237) |
17,18 (CCRID; PubMed=11416159) | |
18 (CLS; DSMZ) | |
D19S433 | 15,18 (CCRID) |
18 (CLS; DSMZ) | |
D21S11 | 28,30.2 |
FGA | 23 |
Penta D | 9,10 |
Penta E | 7,15 |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 16,19 |
参考文献
- HEK293细胞的传代、建库与高效表达重组HPV16-E6E7腺病毒的研究 中国现代应用药学 > 2015年4期
- 摘要:目的 对HEK293细胞进行三级细胞库的建立,并高效表达重组的HPV16-E6E7腺病毒....
- Endogenous ion channels expressed in human embryonic kidney (HEK-293) cells Pflugers Arch . 2022 Jul;474(7):665-680.
- 摘要:Mammalian expression systems, particularly th...
- Human embryonic kidney (HEK-293) cell line: An alternative for rabies virus diagnosis and research J Virol Methods . 2021 Aug:294:114195.
- 摘要:...n to be the most permissive for infection....
- Transient expression in HEK 293 cells: an alternative to E. coli for the production of secreted and intracellular mammalian proteins Methods Mol Biol . 2015:1258:209-22.
- 摘要:Transient transfection of human embryonic kid...
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