
RAG细胞(小鼠肾腺癌细胞)
- 来源:肾腺癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 阿米巴样
- 培养基:MEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:细胞特性:非回复型8-氮杂鸟嘌呤抗性(HPRT-、HGPRT-)
RAG小鼠肾腺癌细胞系是一种来源于患有肾腺癌的BALB/c小鼠的细胞系。RAG细胞系是从小鼠肾脏组织中分离,并经过克隆筛选,最终获得了不可逆的8-氮杂鸟嘌呤抗性(HPRT-、HGPRT-)克隆。
RAG小鼠肾腺癌细胞呈现变形虫样的形态,通常以贴壁生长的方式繁殖。RAG细胞系属于Renal-2a细胞系的克隆,具有重要的生物学特性和研究价值。
RAG细胞特性特征
基因表达:RAG细胞系表达肾特异性酯酶-2。
病毒检测:RAG细胞系检测到鼠痘病毒呈阴性。
细胞内特征:RAG细胞内可能含有较多的黑色颗粒,传代过程中可能会有部分颗粒释放到培养基中,需要注意及时清除。
RAG小鼠肾腺癌细胞参数表
细胞名称 | RAG细胞(小鼠肾腺癌细胞) |
别称 | Rag |
来源 | BALB/c小鼠肾腺癌 |
细胞类型 | 肾上皮样 |
细胞形态 | 阿米巴样 |
生长方式 | 贴壁生长 |
细胞特性 | 非回复型8-氮杂鸟嘌呤抗性(HPRT-、HGPRT-) |
基因表达 | 肾特异性酯酶-2 |
病毒检测 | 鼠痘病毒阴性 |
培养基 | MEM基础培养基,推荐使用小鼠肾腺癌细胞专用培养基 |
血清补充 | 10%胎牛血清 |
抗生素 | 1%青霉素/链霉素(P/S) |
培养环境 | 37°C,95%空气+5% CO₂ |
传代频率 | 每3-4天传代一次,细胞密度达到70%-80%时进行传代 |
保存温度 | -80°C后转液氮 |
细胞特点 | 细胞内黑色颗粒较多,传代时需注意及时清除细胞外黑色碎片 |
用途 | 仅供科研使用,不得用于诊断、治疗、临床等其他用途 |
保藏机构 | ATCC(CCL-142) |
培养教程
RAG小鼠肾腺癌细胞培养教程
RAG细胞复苏
准备完全培养基: 使用已优化的RAG细胞专用培养基。确保培养箱预热至37°C。
解冻RAG细胞: 将RAG细胞冻存管从液氮中取出,立即放入37°C水浴中,轻轻摇动以加速解冻,通常1-2分钟即可完成。
稀释与离心: 将解冻后的RAG细胞悬液转移至含有4-6 mL培养基的离心管中,轻轻混匀。以1000 rpm离心5分钟,弃去上清。
重悬与培养: 用5-10 mL培养基重悬RAG细胞,将其转移至培养瓶中,并将培养瓶放入37°C的培养箱中,观察RAG细胞贴壁情况。
RAG细胞培养
传代时间点: 当RAG细胞密度达到70%-80%时进行传代。
细胞洗涤与消化: 去除旧培养基,使用PBS洗涤RAG细胞,然后加入0.25%胰酶消化,直至RAG细胞脱落。
离心与重悬: 消化后,以1000 rpm离心5分钟,去除胰酶,上清用完全培养基重悬RAG细胞。
分瓶: 将重悬的RAG细胞分配到新培养瓶中,每瓶接种1-2 mL RAG细胞悬液。
RAG细胞观察与维护
状态监测: 定期通过显微镜观察RAG细胞形态,检查是否有污染或死亡现象。
培养基更换: 每2-3天更换RAG细胞培养基,去除代谢废物,提供新鲜营养。
传代频率: 当RAG细胞密度达到70%-80%时进行传代,遵循上述传代步骤。
关键注意事项
细胞内黑色颗粒: RAG细胞中可能存在较多黑色颗粒,传代时应注意清除培养基中的细胞外碎片。
无菌操作: 始终保持无菌环境,避免RAG细胞污染。
RAG细胞培养基的特殊要求
培养基成分:基础培养基: MEM基础培养基,445 mL+胎牛血清: 50 mL+抗生素: 青霉素-链霉素,5 mL
pH控制: RAG细胞培养基的pH值应维持在7.3±0.2。
保存条件: RAG细胞培养基应避光保存于2℃~8℃,期限为2个月;长期保存可在-20℃避光保存6个月。