
RM-1细胞(小鼠前列腺癌细胞)
- 来源:前列腺癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:癌症基因:ras;myc
RM-1小鼠前列腺癌细胞系是一种具有成纤维细胞样形态的细胞模型,源自17日龄的C57BL/6小鼠。RM-1细胞系的建立是通过用Zipras/myc9逆转录病毒感染泌尿生殖窦细胞,然后将这些感染后的细胞移植到同源成年雄性小鼠的肾包膜下进行培养。
RM-1细胞特性特征
RM-1细胞系中表达的癌症基因包括ras和myc。
RM-1细胞系通常在3-5代内传代,保持较低的传代次数以确保细胞活性和质量。
RM-1细胞经过严格的无菌和无支原体检测,复苏活力通常超过90%,确保实验的可靠性。
RM-1细胞系广泛用于前列腺癌的基础研究、药物筛选以及3D细胞培养实验
RM-1细胞参数表
细胞名称 | RM-1细胞(小鼠前列腺癌细胞) |
别称 | RM1 |
细胞来源 | 17日龄C57BL/6小鼠泌尿生殖窦细胞 |
感染病毒 | Zipras/myc9逆转录病毒 |
移植部位 | 同基因成年雄性小鼠的肾包膜下 |
细胞形态 | 成纤维细胞样,贴壁生长 |
细胞类型 | 上皮细胞样 |
培养基 | RPMI-1640 + 10%胎牛血清 + 1%青霉素-链霉素 |
培养条件 | 温度:37℃,气相:95%空气,5%二氧化碳,湿度:70%-80% |
传代比例 | 1:2 - 1:3 |
传代频率 | 每周换液2-3次 |
冻存液 | 90%胎牛血清 + 10% DMSO |
运输条件 | T25瓶常温运输或干冰运输 |
质量控制 | 严格的无菌和无支原体检测,复苏活力>90% |
基因特征 | 表达癌症基因ras和myc |
应用领域 | 前列腺癌机制研究、药物筛选、3D细胞培养 |
细胞状态检测 | 通过细菌、真菌、支原体、内毒素检测 |
细胞复苏活力 | 复苏存活率>90% |
运输注意事项 | 收到细胞后需消毒,观察细胞状态 |
用途限制 | 仅供科研使用,不适用于人类或临床诊断 |
培养教程
RM-1细胞培养教程
RM1细胞的复苏步骤
将含有1 mL RM1细胞悬液的冻存管放入37℃水浴中,迅速且持续摇晃,直到RM1细胞完全解冻。
将解冻后的RM1细胞悬液转移至离心管中,加入4 mL预温的RPMI-1640培养基,混匀后在800-1000 RPM下离心4-5分钟,弃去上清液。
加入1-2 mL新鲜培养基,将RM1细胞轻轻吹打混匀。
将重悬后的RM1细胞转移至T25培养瓶,补充培养基至6 mL,放入培养箱中培养,确保37℃、5% CO₂的环境。
RM1细胞的传代步骤
当RM1细胞生长至80%汇合时,进行传代操作。
吸除旧培养基,加入3-4 mL常温PBS润洗RM1细胞10-20秒,吸走PBS。
加入1 mL胰蛋白酶,轻轻晃动培养瓶使酶液均匀覆盖RM1细胞层,将培养瓶放入37℃培养箱中消化。观察到RM1细胞间隙增大但未完全脱落时,立即加入2-3 mL完全培养基终止消化。
将消化后的RM1细胞悬液混匀后,在900 RPM下离心3-5分钟,弃去上清液。再加入新鲜的培养基重悬RM1细胞。
将重悬的RM1细胞均匀分配至新的培养瓶中,补足完全培养基,放回培养箱继续培养。
RM1细胞的冻存步骤
选择生长状态良好的RM1细胞进行冻存。
按照传代步骤进行RM1细胞的收集,离心后弃去上清液。
用预先配制的冻存液重悬RM1细胞,确保RM1细胞浓度达到1-5 × 10^6/mL。
将RM1细胞悬液分装至冻存管中,并进行标记。
将RM1细胞冻存管置于-80℃冰箱中过夜保存,然后转移至液氮中进行长期保存。
注意事项
消化时间控制:不同品牌的胰蛋白酶消化时间可能不同,需根据具体情况进行调整。
RM1细胞状态观察:避免在观察RM1细胞状态时产生气泡,以免影响细胞的健康状况。
RM1细胞运输条件:RM1细胞运输时可选择常温或干冰运输,收到后应立即进行处理,确保细胞活性。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
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