
lncap细胞(人前列腺癌细胞LNCaP clone FGC)
- 来源:前列腺;左锁骨淋巴结癌转移灶
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:可诱导EMT,存在具有更强迁移能力的S/P细胞亚群
LNCaP clone FGC是一种源自人前列腺癌的上皮样细胞系,于1977年从一名50岁白人男性(血型B+;确诊为转移性前列腺癌)的左锁骨上淋巴结的针吸活检中分离。LNCaP clone FGC细胞广泛应用于癌症研究。
lncap细胞系属于异四倍体细胞系,具有复杂的染色体组成。其模态染色体数为84,在22%的细胞中出现。染色体数目为86(20%)和87(18%)的细胞也较为常见,高倍性细胞的比例为6.0%。LNCaP clone FGC细胞在裸鼠体内表现出致瘤性。
lncap细胞独特的生物学特性:
基因表达:雄激素受体(AR)和前列腺特异性抗原(PSA)。
雄激素敏感性:对5α-二氢睾酮(DHT)有响应。
酸性磷酸酶:表达人前列腺酸性磷酸酶。
致瘤性:在体外和体内(裸鼠)均具有致瘤性。
遗传特征:染色体数目:46-91,众数为76-91、染色体异常:多种染色体异常,包括缺失和易位。
LNCaP clone FGC细胞是致瘤的,这些细胞在裸鼠体内具有致瘤性
LNCaP细胞可能具有EMT特性,这与癌症转移和侵袭能力相关
lncap细胞参数表
细胞名称 | lncap细胞(人前列腺癌细胞LNCaP clone FGC) |
别称 | LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCaP-ATCC |
来源信息 | 50岁白人男性,B+血型,左锁骨淋巴结转移性前列腺癌 |
建立信息 | 1977年由J.S. Horoszewicz等人建立 |
基本特征 | 人源上皮样肿瘤细胞,BSL-1级别 |
生长特性 | 贴壁生长,形成集落,轻微吸附,不形成完全汇合 |
生长参数 | 倍增时间约32-36小时,快速酸化培养基 |
遗传特征 | 染色体数46-91,众数76-91 |
培养基和添加物 | RPMI 1640 + 10% FBS + 2 mM L-谷氨酰胺 + 抗生素(可选) |
培养环境 | 37°C, 5% CO2 |
培养容器 | Corning cellbind细胞培养瓶或多聚-L-赖氨酸包被的培养皿 |
传代和换液 | 比例1:3至1:4,每周换液2-3次,传代后48小时内不扰动 |
受体表达 | 雄激素受体(AR)+, 雌激素受体(ER)+ |
特异性标记 | 前列腺特异性抗原(PSA)+, 人前列腺酸性磷酸酶+, 前列腺特异性膜抗原(PSMA)+ |
基因状态 | p53野生型, PTEN缺失 |
激素反应 | 对5α-二氢睾酮(DHT)敏感,初始雄激素依赖可发展为非依赖 |
肿瘤特性 | 中等转移潜能,相对较低侵袭能力,软琼脂和裸鼠中具致瘤性 |
特殊性质 | 可诱导EMT,存在具有更强迁移能力的S/P细胞亚群 |
冻存方法 | 55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮气相保存 |
复苏后存活率 | 约70-80% |
污染检测 | 细菌、真菌、支原体均为阴性 |
鉴定 | 人源确认,STR分型应与ATCC参考谱一致 |
主要用途 | 前列腺癌研究,药物筛选,雄激素信号通路研究,EMT研究 |
细胞库编号 | ATCC: CRL-1740; ECACC: 89110211; BCRJ: 0149; BCRC: 60088 |
培养教程
LNCaP clone FGC人前列腺癌细胞培养教程
细胞接种和传代
接收细胞处理:
使用75%酒精消毒培养瓶表面。
放入37°C培养箱静置2-4小时。
接种密度:
T25瓶中加入10-12ml完全培养基,10cm皿中加12-15ml。
传代比例:
首次传代建议1:2,之后推荐1:3-1:4。
细胞密度达到70-80%时进行传代,避免过度生长。
传代步骤:a. 弃旧培养基,PBS洗涤1-2次。 b. 加入预热的胰酶,37°C消化。 c. 每30秒轻柔吹打检查细胞是否脱落,避免过度消化。 d. 细胞脱落后,加入等体积培养基终止消化。 e. 1000rpm离心5分钟,弃上清。 f. 加入新鲜培养基重悬细胞,按传代比例接种。
细胞冻存:
冻存液配方: 55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO。
冻存步骤:a. 常规消化收集细胞。 b. 加入预冷的冻存液重悬细胞。 c. 转移至冻存管,放入-80°C冰箱过夜,次日转入液氮长期保存。
常见问题与注意事项
细胞聚集问题:
在传代时使用滴管反复轻柔吹打来分散细胞集落。
使用CellBIND细胞培养瓶或多聚-L-赖氨酸溶液包被过的培养皿,有助于减少细胞聚集。
培养基pH控制:
每周换液2-3次,密切观察培养基颜色变化。
细胞密度达到70%以上时,培养基消耗较快,需更频繁地观察并换液。
细胞生长特性:
LNCaP细胞生长缓慢,形成集落而非单层,传代时应注意避免过度生长。
避免剧烈震荡和低温刺激,以维持细胞的健康状态。
常见问答
- 我应该多久传代LNCaP clone FGC一次?
- LNCaPclone FGC的传代 培养应在细胞达到60-70%汇合时进行。培养物通常可以按1:3的比例传代,大约每4-5天传代一次。
- LNCaPcloneFGC的形态是什么?
- LNCaPcloneFGC细胞形成弱贴壁的单层。培养物需要温和的处理,因为轻敲、摇晃或移液很容易使细胞移位。细胞不会产生整齐的单层,但倾向于聚集生长,在制备亚培养物时,应通过反复移液将其分离。解离细胞的再附着是缓慢的,并且在48小时内只有约70%的来自原始接种物的细胞粘附到生长表面。因此,将新接种的烧瓶静置48小时。
- LNCaPcloneFGC细胞的生长速率是多少?
- LNCaPcloneFGC是特别难以评估生长速率的细胞系。这是由于贴壁性较弱的单层和聚集的趋势。这也是由于不同密度下不同的生长速率造成的。一般来说,LNCaPcloneFGC细胞生长相当缓慢。细胞计数表明,一个群体需要1到3天才能翻倍。
- LNCaPcloneFGC细胞的正常生长和形态是什么?
- LNCaPcloneFGC细胞生长非常缓慢。这些细胞只轻微地贴壁在基质上,可能不会融合,但它们可以迅速酸化培养基的pH值。悬浮细胞通常仍然存活,并且当培养物从冷冻保存中完全恢复时可能贴壁。在恢复的第一周,不要丢弃任何悬浮的细胞。应通过温和离心(125 x g,10分钟)将其保留,并将其添加回贴壁群体中。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,11 |
D2S1338 | 16 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 9.1,10.3 (AddexBio=C0019003/4953; ATCC=CRL-1740; CCRID; TKG=TKG 0603) |
11 (Cosmic-CLP=907788) | |
9 (RCB=RCB2144) | |
9,11 (ECACC=89110211; KCLB=21740) | |
D8S1179 | 12,14 |
D13S317 | 10,12 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 11,12 |
D19S433 | 13.2,15 |
D21S11 | 29,32.2 |
FGA | 19,20 |
TH01 | 9 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 16,17,18 (RCB=RCB2144) |
16,18 (AddexBio=C0019003/4953; ATCC=CRL-1740; CCRID; Cosmic-CLP=907788; ECACC=89110211; KCLB=21740; TKG=TKG 0603) |
