
RWPE1细胞(人正常前列腺上皮细胞)
- 来源:前列腺正常细胞
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:K-SFM+0.05 mg/ml BPE +5 ng/ml EGF+ 1% P/S
- 其他:基因表达:细胞角蛋白8;细胞角蛋白18;p53+;pRB+
RWPE-1细胞系是一种人类前列腺上皮细胞系,最初从一名54岁白人男性的正常前列腺周边组织分离。RWPE1细胞经过人乳头瘤病毒18型(HPV-18)转染,获得了持续培养的能力。RWPE1细胞系保留了许多正常前列腺上皮细胞的特征。
RWPE1细胞在32代时,大多数细胞的染色体数目在二倍体范围内(45-51),主要有两个染色体群体:45,X,-Y和51,XY。RWPE1细胞不致瘤。
RWPE1细胞特征特性
RWPE1细胞表达激肽释放酶3(KLK3),即前列腺特异性抗原(PSA)。表达雄激素受体,暴露于雄激素后可激活。
RWPE1细胞表达细胞角蛋白8和细胞角蛋白18。
p53和pRB基因阳性。
三维培养特性:在三维基质胶(Matrigel)培养中,RWPE1细胞在暴露于雄激素时能组织成腺泡(acini)并将PSA分泌到管腔中。
体内特性:当与Matrigel或基质细胞混合注射到雄性无胸腺啮齿动物体内时,RWPE1细胞也会组织成腺泡并产生PSA。
细胞系衍生及致瘤性研究
RWPE-1细胞可通过Kirstin鼠肉瘤病毒(Ki-MuSV)转化为致瘤细胞系RWPE-2和RWPE2-W99。
通过暴露于N-甲基-N-亚硝基脲(MNU),可从RWPE-1细胞系衍生出一系列模拟前列腺癌症进展的致瘤细胞系,包括WPE1-NA22、WPE1-NB14、WPE1-NB11和WPE1-NB26。
病毒筛查
对乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒均为阴性。
PCR检测证实存在HPV病毒DNA序列。
RWPE1细胞参数表
细胞名称 | RWPE1细胞(人正常前列腺上皮细胞) |
细胞别称 | RWPE-1;pwpe1; pwpe-1; 人正常前列腺上皮细胞 |
患者信息 | 人;男/54岁;前列腺周边组织 |
形态学 | 上皮细胞样,贴壁生长 |
致瘤性 | 不致瘤 |
生物安全等级 | 2级 |
保藏信息 | ATCC; CRL-11609 |
培养基 | K-SFM+0.05 mg/ml BPE +5 ng/ml EGF+ 1% P/S |
培养环境 | 37℃;空气95%,二氧化碳5% |
分子表达 | KLK3(PSA);细胞角蛋白8/18;p53+;pRB+;雄激素受体(暴露于雄激素后表达) |
三维培养特性 | 在三维基质胶培养中,暴露于雄激素时形成腺泡,分泌PSA |
体内特性 | 与Matrigel或基质细胞混合注射到雄性无胸腺啮齿动物体内时,组织成腺泡并产生PSA |
衍生细胞系 | RWPE-2,RWPE2-W99,WPE1-NA22,WPE1-NB14,WPE1-NB11,WPE1-NB26 |
细胞检测 | 乙肝、丙肝、HIV阴性;PCR证实HPV DNA序列阳性 |
使用限制 | 仅供科研使用 |
培养教程
RWPE1人正常前列腺上皮细胞培养教程
RWPE-1细胞传代步骤
观察RWPE-1细胞生长状态
若细胞密度低于60%,可更换新鲜培养基继续培养。
若细胞密度达到80-90%,进行传代。
传代操作
移除培养瓶中的旧培养基。
用PBS轻轻清洗细胞1-2次。
加入适量胰酶-EDTA消化液,37℃消化3-5分钟。
轻轻拍打培养瓶,观察细胞是否脱落。
加入等量完全培养基终止消化。
收集RWPE-1细胞悬液,1000 rpm离心5分钟。
弃上清,用新鲜完全培养基重悬细胞。
按1:3-1:5的比例将细胞接种到新的培养瓶中。
加入适量新鲜完全培养基,放入37℃、5% CO2培养箱中培养。
RWPE-1细胞培养注意事项
定期观察RWPE-1细胞形态和生长状态。
每2-3天更换一次培养基。
保持培养环境的无菌状态。
避免RWPE-1细胞过度生长或密度过高。
RWPE-1细胞复苏步骤
快速解冻RWPE-1细胞。
将RWPE-1细胞悬液转移到含有预热完全培养基的培养瓶中。
24小时后更换新鲜培养基,去除DMSO。
RWPE-1细胞在Matrigel培养中的表现
在三维Matrigel培养中,RWPE-1细胞表现出以下特征:
腺泡形成:在雄激素刺激下,RWPE-1细胞能够形成腺泡(acini)结构。
PSA分泌:这些腺泡能够向培养基中分泌前列腺特异性抗原(PSA)。
体内表现:将RWPE-1细胞与Matrigel或基质细胞混合后注射到雄性裸鼠体内,也能形成腺泡并产生PSA。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 13 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 12,15 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 10,14 |
D13S317 | 8,14 |
D16S539 | 9,11 |
D18S51 | 14,16 |
D21S11 | 29,31 |
FGA | 24,25 |
Penta D | 10,13 |
Penta E | 5,12 |
TH01 | 8,9.3 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 14,18 |