C4-2B细胞（人前列腺癌细胞） （暂不提供）

C4-2B细胞系是一种源自1993年从人前列腺癌细胞系LNCaP衍生的C4-2细胞的骨转移亚系，具有上皮样形态。

LNCaP细胞最初从一位患有前列腺癌的白人男性的前列腺组织中分离。C4-2细胞是通过将LNCaP细胞与骨肉瘤衍生的人成纤维细胞共同接种到无胸腺的雄性裸鼠体内，经去势处理后，分离并培养出的一种前列腺上皮细胞。C4-2B细胞则进一步源自C4-2细胞，是从一名50岁前列腺癌患者的左锁骨上淋巴结转移灶中分离，专门用于研究前列腺癌，尤其是其骨转移的相关机制。

C4-2B细胞特性特征

• c42b细胞本身偏嗜酸性，培养基消耗较快

• c42b细胞在裸鼠中具有致瘤性

• 表达前列腺特异性抗原(PSA)和前列腺酸性磷酸酶(PAP)等前列腺特异性标记物
  

• 表达雄激素受体(AR)，对雄激素有反应

• 缺失PTEN基因，表达高水平的p-Akt

• 高表达EGFR和HER2/ne

C4-2B细胞参数表

C4-2B人前列腺癌细胞培养教程

C4-2B细胞复苏

• 快速解冻：从液氮中取出冻存的C4-2B细胞冻存管，立即置于37℃水浴中，轻轻摇动以加速C4-2B细胞的解冻过程。

• 稀释C4-2B细胞：C4-2B细胞完全解冻后，立即将其转移至4 mL预温的完全培养基中（RPMI-1640培养基，含10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素（P/S）），轻柔混匀。

• 离心分离：将混合物以1000 RPM离心4分钟，去除上清液以减少DMSO对C4-2B细胞的毒性。

• C4-2B细胞重悬：加入1-2 mL新的完全培养基，轻轻吹打混匀C4-2B细胞悬液。

• 初步培养C4-2B细胞：将重悬后的C4-2B细胞转移至T25培养瓶中，加入8 mL完全培养基，置于37℃、5% CO2培养箱中过夜培养，以便C4-2B细胞贴壁。

C4-2B细胞传代

• C4-2B细胞状态评估：当C4-2B细胞的贴壁细胞密度达到70%-90%时，应及时进行传代以保持C4-2B细胞的健康生长。

• 洗涤C4-2B细胞：弃去培养基后，用不含钙镁的PBS缓冲液洗涤C4-2B细胞1-2次以去除残留培养基。

• 消化C4-2B细胞：加入2 mL胰酶-EDTA溶液（0.25%胰酶，0.53 mM EDTA），置于37℃培养箱中消化1-2分钟，直到C4-2B细胞大部分变圆并脱落。

• 终止C4-2B细胞消化：立即加入适量完全培养基终止消化，并轻轻吹打确保C4-2B细胞完全脱离瓶壁。

• C4-2B细胞离心：将C4-2B细胞悬液以1000 RPM离心4分钟，弃去上清液。

• C4-2B细胞重悬：加入6-8 mL完全培养基重悬C4-2B细胞，并充分混匀。

• C4-2B细胞分装：将重悬的C4-2B细胞按1:2至1:4的比例分装到新的培养瓶中，通常加入8 mL完全培养基进行培养。

C4-2B细胞冻存

• C4-2B细胞准备：待C4-2B细胞状态良好且生长密度适中时，弃去培养基，并用PBS洗涤C4-2B细胞1-2次。

• 消化C4-2B细胞：加入1 mL胰酶，待C4-2B细胞变圆并脱落后，加入2 mL完全培养基终止消化。

• C4-2B细胞离心：在1000 RPM下离心5分钟，去除上清液。

• C4-2B细胞冻存混合物制备：用FBS重悬C4-2B细胞，并加入DMSO使终浓度达到10%，迅速混匀。

• C4-2B细胞分装冻存：将混合物按每管1 mL的量分装到冻存管中，并贴上标识。

• 程序降温C4-2B细胞：将C4-2B细胞冻存管置于程序降温盒中，放入-80℃冰箱，至少2小时后转移至液氮中长期保存。

注意事项

• C4-2B细胞贴壁能力较弱，因此在操作和运输过程中应避免剧烈震动。

• C4-2B细胞在略微偏酸性的环境下生长状态更好，需注意培养基pH的调节。

• 当C4-2B细胞密度达到70%-80%时，应及时传代，以防止过度拥挤导致C4-2B细胞死亡或脱落。