C4-2细胞（人前列腺癌细胞） （暂不提供）

C4-2人前列腺癌细胞是从一名50岁男性前列腺癌患者的左锁骨上淋巴结转移灶中分离出的LNCaP细胞的亚系。LNCaP细胞系最初由Horoszewiez等人在1983年建立，它是通过将人前列腺癌细胞（LNCaP，约1 x 10^6细胞，29代）与来自MS骨肉瘤细胞系的人成纤维细胞（同样约1 x 10^6细胞）共同接种到无胸腺雄性裸鼠中建立的。在8周后，研究人员对裸鼠进行去势处理，并在总共12周后收集肿瘤标本，在体外培养后得到C4亚系。进一步发展中，C4亚系与MS骨肉瘤成纤维细胞再次共同接种于去势后的无胸腺雄性裸鼠中，经过相同的12周培养过程，最终从产生的肿瘤中分离出C4-2亚系。

C4-2细胞特性特征

• 在无胸腺雄性裸鼠体内，C4-2细胞以1 x 10^6的剂量注入后，表现出100%的致瘤性（20/20和14/14）。
  

• 在完整和去势的小鼠宿主中均检测到骨性前列腺癌转移（分别为2/20和3/14）。

• C4-2细胞能够在培养基中分泌前列腺特异性抗原（PSA），这使其成为研究前列腺癌生物标志物的重要模型。
  

• C4-2细胞系表达前列腺特异性抗原（PSA），这一特征使其在前列腺癌的研究中具有重要的应用价值。

C4-2细胞参数表

C4-2人前列腺癌细胞培养教程

C4-2细胞复苏

• 预热所需的完全培养基（RPMI-1640，添加10% 胎牛血清（FBS）和1% 青霉素/链霉素（P/S））至37℃，大约30分钟。
  

• 准备37℃的水浴以便快速解冻C4-2细胞。

• 从液氮罐中取出冻存的C4-2细胞管，立即置于37℃水浴中，轻轻摇动以加速解冻（约1-2分钟）。
  

• 解冻后，迅速将C4-2细胞悬液转移至含有5-10 ml完全培养基的离心管中，轻轻混匀。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。

• 用5-10 ml的完全培养基重悬C4-2细胞。
  

• 将重悬后的C4-2细胞移入培养瓶中，置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。

C4-2细胞培养

• 换液周期：每2-3天更换一次培养基，以确保C4-2细胞的营养供应和废物清除。

• 对于T25培养瓶，使用10-12 ml培养基用于C4-2细胞培养；
  

• 对于10 cm培养皿，使用12-15 ml培养基以促进C4-2细胞生长。

C4-2细胞传代步骤

• 在传代前将培养基和试剂（PBS、胰酶）预热至37℃，确保C4-2细胞在最佳条件下进行传代。
  

• 吸去培养瓶中的旧培养基，准备好C4-2细胞的传代操作。
  

• 加入3-4 ml PBS轻轻润洗C4-2细胞，去除残留的培养基后吸走PBS。

• 加入1 ml胰酶，轻轻晃动使胰酶均匀分布于C4-2细胞层表面。

• 在37℃培养箱中观察C4-2细胞消化状态，当细胞间隙增大但未完全脱落时，立即加入2-3 ml完全培养基中和胰酶，终止C4-2细胞的消化过程。

• 将C4-2细胞混匀后，以900 rpm离心3-5分钟，弃去上清。

• 重悬C4-2细胞于适量的完全培养基中，按比例分配到新的培养瓶中并补充适量培养基，以继续培养C4-2细胞。

C4-2细胞培养注意事项

• 无菌操作：在C4-2细胞培养及传代过程中，严格保持无菌操作，防止污染。

• C4-2细胞状态观察：定期显微镜观察C4-2细胞形态，确保C4-2细胞状态良好，形态正常。

• C4-2细胞冻存与解冻：C4-2细胞冻存时使用含10% DMSO的培养基。解冻后迅速处理，避免C4-2细胞长时间暴露于低温以减少细胞损伤。

• C4-2细胞贴壁特性：C4-2细胞贴壁较弱，传代操作时需小心，避免剧烈操作导致C4-2细胞脱落或损伤。