
NCI-H660细胞系(人神经内分泌前列腺癌细胞)
- 来源:前列腺
- 细胞特征:聚团悬浮,疏松贴壁,上皮样
- 培养基:RPMI 1640+10%FBS+10nM Hydrocortisone+10nM β-estradiol+2nM L-Glutamine+0.5%ITS-G+1%P/S
- 其他:NCI-H660细胞表达左旋多巴羧化酶和具有蛙皮素样免疫反应性
NCI-H660细胞是从一名63岁高加索地区(白人)男性前列腺癌患者的淋巴结转移灶中分离,是一种人神经内分泌前列腺癌细胞系。
NCI-H660细胞呈上皮细胞样形态,悬浮方式生长,但也有少量细胞会贴附生长。NCI-H660细胞通常使用10代以内的细胞进行实验。
NCI-H660细胞系特性特征
NCI-H660细胞外观类似小细胞癌
NCI-H660细胞表达升高的左旋多巴羧化酶和蛙皮素样免疫反应性
NCI-H660细胞表达功能性心钠素(ANP)受体,但添加ANP不影响细胞生长模式
NCI-H660细胞系参数表
细胞名称 | NCI-H660细胞系(人神经内分泌前列腺癌细胞) |
细胞别称 | NCI-H660;NCIH660;H660;人神经内分泌前列腺癌细胞 |
种属组织来源 | 人(Homo sapiens);前列腺癌淋巴结转移 |
细胞类型 | 神经内分泌前列腺癌小细胞 |
患者信息 | 63岁高加索地区(白人)男性 |
ATCC编号 | CRL-5813 |
形态特征 | 上皮细胞样;主要悬浮生长,少量贴附 |
基础培养基/血清 | RPMI-1640;5% FBS |
添加剂 | 0.005 mg/ml 胰岛素、转铁蛋白、30nM 亚硒酸钠、10 nM 氢化可的松、10 nM beta-雌二醇、2mM L-谷氨酰胺、1%双抗 |
培养环境 | 37℃;95%空气 + 5%二氧化碳 |
传代条件 | 密度80%-90%;首次传代比例1:2;推荐使用10代以内 |
冻存条件 | 无血清冻存液;液氮储存 |
受体表达 | 表达功能性心钠素(ANP)受体;雄激素受体(AR)可能低表达或缺失(待验证) |
癌症标志物 | 表达升高的左旋多巴羧化酶和蛙皮素样免疫反应性;可能表达嗜铬粒蛋白A (CgA)和突触素 (SYN)(待验证) |
其他标志物 | 前列腺特异性抗原(PSA)表达未知;可能表达ASCL1或NEUROD1(待验证) |
基因改变/扩增 | 可能存在TP53、RB1、PTEN突变或缺失;MYCN、AURKA可能扩增(待验证) |
质量控制 | 应进行支原体检测和STR鉴定 |
运输方式 | 复苏发货(T25瓶)或冻存发货(需干冰) |
供应限制 | 仅限科学研究,不可用于治疗 |
生物安全等级 | 未明确说明(通常为BSL-2) |
主要研究方向 | 前列腺癌(特别是神经内分泌型)、小细胞癌、癌症生物学、药物筛选和开发、转移机制研究 |
细胞特性 | 培养代次建议20代以内,贴壁效率>90% |
肿瘤相关特性 | 迁移能力低,侵袭能力中等,在免疫缺陷小鼠中可形成肿瘤 |
转染和药物反应 | 转染效率中等(40-60%),对米托坦(Mitotane)敏感 |
细胞周期分布 | G0/G1: 60-70%, S: 15-20%, G2/M: 10-15% |
其他特征 | 基础凋亡率<5%,高糖酵解率 |
培养教程
NCI-H660人神经内分泌前列腺癌细胞系培养教程
NCI-H660细胞复苏
a. 将含1 mL NCI-H660细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。
b. 加入4 mL预热的培养基混合均匀。
c. 1000 rpm离心3分钟,弃去上清液。
d. 加入1-2 mL培养基重悬细胞。
e. 将NCI-H660细胞悬液转移到含适量培养基的培养瓶或10 cm培养皿中(约8 mL培养基)。 f. 培养过夜,第二天换液并检查细胞密度。
NCI-H660细胞传代:
a. 当NCI-H660细胞密度达到80%-90%时进行传代。
b. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
c. 加入适量胰酶消化液,37℃消化2-3分钟。
d. 显微镜下观察细胞变圆并开始脱落。
e. 加入含血清的培养基终止消化。
f. 吹打NCI-H660细胞,制成单细胞悬液。
g. 按1:2的比例进行传代(例如,1个T25瓶传2个T25瓶或2个6cm皿)。
注意事项与NCI-H660细胞质量控制:
使用产品时应注意无菌操作,避免污染。
本产品含有血清和双抗,如无特别需要不用额外添加。
首次传代建议1:2传代。
NCI-H660细胞主要呈悬浮生长,少量细胞会贴附。
培养过程中要定期观察NCI-H660细胞状态,确保细胞健康。
推荐使用10代以内的NCI-H660细胞。
定期进行支原体检测和STR鉴定,以确保NCI-H660细胞系的真实性和纯度。
NCI-H660细胞冻存:
使用无血清冻存液。
将NCI-H660细胞悬液分装到冻存管中。
缓慢降温后转入液氮中长期保存。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 18,24 |
D3S1358 | 14,18 |
D5S818 | 11 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 9,10 |
D13S317 | 8 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 15,16 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 28,31 |
FGA | 23,24 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 12 |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 17 |