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TCMK-1细胞(小鼠肾小管上皮细胞)货号:STM-CL-6512 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

TCMK-1细胞(小鼠肾小管上皮细胞)

  • 来源:
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基:MEM+10% FBS+1% P/S
  • 其他:抗原表达:表达H-2k抗原;致瘤性:在免疫抑制小鼠中不致瘤
价格:¥ 1,700.00
提供种属鉴定报告

TCMK-1细胞是一种小鼠肾小管上皮细胞系,源自C3H/Mai小鼠的肾小管组织,于1963年建立。tcmk1细胞系通过SV40病毒转化而成,具有较高的稳定性和生长能力。
TCMK-1细胞呈现上皮细胞样,细胞形状多为多边形或长条形,大小约为15-30微米,胞质丰富,核大而圆,核仁明显。tcmk1细胞系以贴壁生长为特征,生长迅速,传代周期约为24-48小时。
TCMK-1细胞的染色体模态数为78,范围在64到157之间。所有细胞均显示2-6条具有次级收缩的着丝粒染色体,每个细胞有1-4条双臂染色体,且60%的细胞有一条或多条微小染色体。

TCMK-1细胞特性特征

  • tcmk1细胞表达H-2k抗原

  • 表达多种特异性标志物,包括:Ksp-cadherin、AQP1, AQP2, AQP3, AQP4、NHE3、Na-K-ATPase;

  • 约2%的细胞对SV40病毒抗原呈阳性,但病毒不可恢复

  • tcmk1细胞对水疱性口炎病毒、格拉斯哥(印第安纳州)、人脊髓灰质炎病毒1型敏感

  • 经检测,tcmk1细胞鼠痘病毒呈阴性

  • tcmk1细胞在免疫抑制小鼠中不致瘤

TCMK-1细胞参数表

细胞名称TCMK-1细胞(小鼠肾小管上皮细胞)
细胞别称TCMK-1; TCMK1; Transformed C3H Mouse Kidney-1
细胞来源C3H/Mai小鼠肾小管上皮
细胞类型上皮细胞
转化方法SV40病毒转化
形态特征上皮样,多边形或长条形,15-30微米
生长特性贴壁生长
生物安全等级1
供应限制仅供科研使用
培养基DMEM或MEM + 10%胎牛血清 + 1%青霉素-链霉素
培养环境37°C,95%空气 + 5%二氧化碳
传代信息比例1:2至1:3,密度80-90%,周期24-48h
储存温度活细胞:培养箱;冻存管:液氮罐
抗原表达H-2k
特异性标志物Ksp-cadherin, AQP1, AQP2, AQP3, AQP4, NHE3, Na-K-ATPase
SV40抗原2%细胞阳性,病毒不可恢复
病毒敏感性水疱性口炎,人脊髓灰质炎病毒1型
鼠痘病毒阴性
致瘤性在免疫抑制小鼠中不致瘤
主要用途肾脏疾病研究,药物筛选,毒性评价
保藏机构/货号ATCC CCL-139; KCLB 10139; ZQ0814

培养教程

TCMK-1小鼠肾小管上皮细胞培养教程

TCMK-1细胞复苏

  • 将冻存管内的1 mL TCMK-1细胞悬液在37℃水浴中快速解冻。

  • 加入4 mL预热的完全培养基并轻轻混匀。

  • 以1000 rpm离心3分钟,弃去上清。

  • 用6-8 mL新鲜培养基重悬TCMK-1细胞。

  • 将TCMK-1细胞悬液转移到含适量培养基的培养瓶中。

  • 培养过夜后更换新鲜培养基,并检查细胞密度。

TCMK-1细胞传代

  • 当TCMK-1细胞密度达到80%-90%时进行传代:

  • 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS洗涤TCMK-1细胞1-2次。

  • 加入1-2mL 0.25% Trypsin-0.53mM EDTA消化液,使其覆盖所有TCMK-1细胞。

  • 将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2分钟。

  • 在显微镜下观察TCMK-1细胞,当大部分细胞变圆并脱落时,加入少量培养基终止消化。

  • 补加6-8 mL培养基并轻轻混匀。

  • 以1000 rpm离心4分钟,弃去上清。

  • 用新鲜培养基重悬TCMK-1细胞。

  • 按1:2至1:3的比例将TCMK-1细胞接种到新的培养瓶中。

日常维护

  • 每2-3天更换一次培养基。

  • 定期观察TCMK-1细胞形态和生长状况。

  • 保持培养基pH在7.2-7.4之间。

TCMK-1细胞冻存

  • 收集对数生长期的TCMK-1细胞。

  • 制备冻存液( 5% DMSO)。

  • 调整TCMK-1细胞浓度至约5 x 10^5 cells/mL。

  • 将TCMK-1细胞悬液分装到冻存管中,每管1 mL。

  • 使用程序降温盒或细胞冻存容器,将TCMK-1细胞缓慢降温至-80℃。

  • 24小时后转移到液氮中长期保存。

注意事项

  • 操作过程中保持无菌条件。

  • 避免TCMK-1细胞过度消化,以维持细胞活力。

  • 定期检测TCMK-1细胞是否有污染。

  • 建议使用低代次TCMK-1细胞进行实验,以确保结果的可靠性。

相关资料

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参考文献

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