
TCMK-1细胞(小鼠肾小管上皮细胞)
- 来源:肾
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:MEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:抗原表达:表达H-2k抗原;致瘤性:在免疫抑制小鼠中不致瘤
TCMK-1细胞是一种小鼠肾小管上皮细胞系,源自C3H/Mai小鼠的肾小管组织,于1963年建立。tcmk1细胞系通过SV40病毒转化而成,具有较高的稳定性和生长能力。
TCMK-1细胞呈现上皮细胞样,细胞形状多为多边形或长条形,大小约为15-30微米,胞质丰富,核大而圆,核仁明显。tcmk1细胞系以贴壁生长为特征,生长迅速,传代周期约为24-48小时。
TCMK-1细胞的染色体模态数为78,范围在64到157之间。所有细胞均显示2-6条具有次级收缩的着丝粒染色体,每个细胞有1-4条双臂染色体,且60%的细胞有一条或多条微小染色体。
TCMK-1细胞特性特征
tcmk1细胞表达H-2k抗原
表达多种特异性标志物,包括:Ksp-cadherin、AQP1, AQP2, AQP3, AQP4、NHE3、Na-K-ATPase;
约2%的细胞对SV40病毒抗原呈阳性,但病毒不可恢复
tcmk1细胞对水疱性口炎病毒、格拉斯哥(印第安纳州)、人脊髓灰质炎病毒1型敏感
经检测,tcmk1细胞鼠痘病毒呈阴性
tcmk1细胞在免疫抑制小鼠中不致瘤
TCMK-1细胞参数表
细胞名称 | TCMK-1细胞(小鼠肾小管上皮细胞) |
细胞别称 | TCMK-1; TCMK1; Transformed C3H Mouse Kidney-1 |
细胞来源 | C3H/Mai小鼠肾小管上皮 |
细胞类型 | 上皮细胞 |
转化方法 | SV40病毒转化 |
形态特征 | 上皮样,多边形或长条形,15-30微米 |
生长特性 | 贴壁生长 |
生物安全等级 | 1 |
供应限制 | 仅供科研使用 |
培养基 | DMEM或MEM + 10%胎牛血清 + 1%青霉素-链霉素 |
培养环境 | 37°C,95%空气 + 5%二氧化碳 |
传代信息 | 比例1:2至1:3,密度80-90%,周期24-48h |
储存温度 | 活细胞:培养箱;冻存管:液氮罐 |
抗原表达 | H-2k |
特异性标志物 | Ksp-cadherin, AQP1, AQP2, AQP3, AQP4, NHE3, Na-K-ATPase |
SV40抗原 | 2%细胞阳性,病毒不可恢复 |
病毒敏感性 | 水疱性口炎,人脊髓灰质炎病毒1型 |
鼠痘病毒 | 阴性 |
致瘤性 | 在免疫抑制小鼠中不致瘤 |
主要用途 | 肾脏疾病研究,药物筛选,毒性评价 |
保藏机构/货号 | ATCC CCL-139; KCLB 10139; ZQ0814 |
培养教程
TCMK-1小鼠肾小管上皮细胞培养教程
TCMK-1细胞复苏
将冻存管内的1 mL TCMK-1细胞悬液在37℃水浴中快速解冻。
加入4 mL预热的完全培养基并轻轻混匀。
以1000 rpm离心3分钟,弃去上清。
用6-8 mL新鲜培养基重悬TCMK-1细胞。
将TCMK-1细胞悬液转移到含适量培养基的培养瓶中。
培养过夜后更换新鲜培养基,并检查细胞密度。
TCMK-1细胞传代
当TCMK-1细胞密度达到80%-90%时进行传代:
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS洗涤TCMK-1细胞1-2次。
加入1-2mL 0.25% Trypsin-0.53mM EDTA消化液,使其覆盖所有TCMK-1细胞。
将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2分钟。
在显微镜下观察TCMK-1细胞,当大部分细胞变圆并脱落时,加入少量培养基终止消化。
补加6-8 mL培养基并轻轻混匀。
以1000 rpm离心4分钟,弃去上清。
用新鲜培养基重悬TCMK-1细胞。
按1:2至1:3的比例将TCMK-1细胞接种到新的培养瓶中。
日常维护
每2-3天更换一次培养基。
定期观察TCMK-1细胞形态和生长状况。
保持培养基pH在7.2-7.4之间。
TCMK-1细胞冻存
收集对数生长期的TCMK-1细胞。
制备冻存液( 5% DMSO)。
调整TCMK-1细胞浓度至约5 x 10^5 cells/mL。
将TCMK-1细胞悬液分装到冻存管中,每管1 mL。
使用程序降温盒或细胞冻存容器,将TCMK-1细胞缓慢降温至-80℃。
24小时后转移到液氮中长期保存。
注意事项
操作过程中保持无菌条件。
避免TCMK-1细胞过度消化,以维持细胞活力。
定期检测TCMK-1细胞是否有污染。
建议使用低代次TCMK-1细胞进行实验,以确保结果的可靠性。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
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