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Super Tube细胞(犬肾上皮细胞)货号:STM-CL-8152 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

Super Tube细胞(犬肾上皮细胞)

  • 来源:正常肾
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基:DMEM/F12+0.05mM NEAA+10% FBS+1% P/S
  • 其他:Super Tube细胞的cAMP检测水平显著低于原始MDCK细胞
价格:¥ 1,600.00
提供种属鉴定报告

Super Tube细胞系是源自犬肾的上皮样细胞株,最初从表观健康的成年雌性可卡犬的肾脏组织中分离,并通过从MDCK(Madin-Darby Canine Kidney)细胞株中克隆获得。Super Tube细胞在培养过程中表现出上皮样形态,并且在高细胞密度条件下,能够快速形成小管结构(如在24孔板中每孔接种7×10^5个细胞,3天内形成明显的小管)。在培养时,Super Tube细胞需要频繁更换培养基(每天两次),以提供充足的养分来支持其小管的形成。Super Tube细胞常用于研究肾脏功能、肾小管形成以及相关疾病模型、在药物筛选、细胞生物学研究等领域也有着广泛应用。

Super Tube细胞特性特征

  • cAMP水平:与原始MDCK细胞株相比,Super Tube细胞的cAMP检测水平显著降低。

  • 腺苷环化酶活性:在毛喉素刺激下,Super Tube细胞的腺苷环化酶活性低于MDCK和Super Dome细胞。

  • 跨上皮电阻:Super Tube细胞跨上皮电阻也低于MDCK和Super Dome细胞系,表明其屏障功能相对较弱。

  • 与MDCK和其他相关细胞株相比,Super Tube细胞具有较低的腺苷环化酶活性,且在毛喉素刺激下cAMP水平升高较为有限。

Super Tube细胞参数表

细胞名称Super Tube细胞(犬肾上皮细胞)
细胞别称MDCK supertube; SuperTube
种属来源
年龄性别雌;成年
组织来源正常肾
细胞形态上皮细胞样;贴壁生长
生长特性贴壁细胞;能形成小管
生物安全等级BSL1
包装规格T25瓶或1mL冻存管
推荐换液频率2~3次/周;维持细胞生长和小管形成
传代比例1:3 - 1:4
培养基类型DMEM/F12 + 0.05mM NEAA + 10% FBS + 1% P/S
培养条件温度:37℃;气相:空气95%;CO₂ 5%
冻存条件冻存液:55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO;液氮储存
小管形成能力每孔接种7×10^5细胞,3天内形成小管
cAMP水平显著低于MDCK;在毛喉素刺激下腺苷环化酶活性也较低
跨上皮电阻相比Super Dome和MDCK细胞较低
支原体检测

培养教程

Super Tube细胞(犬肾上皮细胞)培养教程

传代步骤

  • 当细胞达到80%-90%汇合度时,进行传代。

  • 使用不含钙、镁的PBS缓冲液清洗细胞1-2次,去除残留的血清成分,以提高胰酶消化效率。

  • 加入0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA混合液(2 ml),在37℃下消化1-2分钟。

  • 观察细胞形态,待细胞变圆、轻微脱落时,立即终止消化。

  • 加入6-8 ml含10% FBS的新鲜培养基,终止消化,轻轻吹打混匀。

  • 将细胞悬液收集到离心管中,以1000 RPM离心4分钟,去除上清。

  • 用1-2 ml新鲜培养基重悬细胞。

  • 以1:3至1:4的比例,将细胞分瓶接种到新的培养瓶中。

冻存步骤

  • 配制冻存液,成分包括:55%基础培养基、40%胎牛血清和5%二甲基亚砜(DMSO),其中DMSO作为细胞保护剂,防止冰晶形成。

  • 将细胞重悬于冻存液中,密度不低于1×10^6 cells/ml。

  • 每支冻存管加入1 ml细胞悬液,并做好标签标识。

  • 将冻存管放入程序降温盒(如Mr. Frosty™),以每分钟-1℃的速率降温,置于-80℃冰箱中预冻至少2小时。

  • 最后将冻存管转入液氮罐中长期保存,确保细胞活性和稳定性。

注意事项

  • 无菌操作:所有培养和传代操作应在无菌条件下进行,使用无菌移液器、培养瓶和培养基,防止细胞污染。

  • 细胞状态监测:定期观察细胞形态和生长状态,若出现污染或异常,应及时更换培养基或重新复苏细胞。

  • 冻存细胞复苏:从液氮中取出的冻存管需迅速置于37℃水浴中解冻,待细胞完全溶解后,立即加入10 ml新鲜培养基,离心去除DMSO,再将细胞重新培养。

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