DH82细胞（犬巨噬细胞、狗肾恶性组织细胞增生症细胞）

DH82细胞系来源于一只10岁雄性金毛寻回犬，犬只被诊断为恶性组织细胞增生症（Malignant Histiocytosis）。该细胞系表现出巨噬细胞样形态，具有较强的吞噬能力，能够吞噬乳胶颗粒，并在贴壁培养状态下生长。DH82细胞对Fcγ受体呈阳性，但对Fcμ受体和C3b受体呈阴性，不产生IL-1。作为一种犬类巨噬细胞系，DH82细胞广泛应用于免疫学、肿瘤学及兽医学研究。它为研究犬类免疫反应、细胞因子产生、病原体相互作用等方面，尤其在理解恶性组织细胞增生症的生物学特性及肿瘤机制方面具有重要价值。此外，DH82细胞的研究对开发新的治疗靶点和生物标志物也有潜在意义，尤其在兽医肿瘤学领域，为诊断和治疗提供了新的视角。

DH82细胞特性特征

• DH82细胞系具有巨噬细胞样形态，能够吞噬乳胶颗粒。
  

• 受体表达：对Fcγ受体呈阳性，表明其能够结合免疫球蛋白G（IgG）；对Fcμ和C3b受体呈阴性，显示其对其他免疫成分的低亲和力。

• 细胞因子产生：不产生IL-1，这可能影响其在免疫反应中的角色。

• 研究表明DH82细胞在与病原体（如Leishmania物种）相互作用时，其基因表达模式可能与小鼠RAW264.7巨噬细胞不同。例如，在感染后，DH82细胞表现出不同的细胞因子反应谱，如诱导IL-12和IL-10等。

DH82犬巨噬细胞参数表

DH82犬巨噬细胞、狗肾恶性组织细胞增生症细胞培养教程

DH82细胞复苏步骤

• 将冻存管快速放入37°C水浴中进行解冻，轻轻摇晃以确保细胞均匀解冻。

• 将解冻后的DH82细胞悬液转移至含4-6 mL完全培养基的离心管中，轻轻混合。

• 在1000 RPM下离心3-5分钟，弃去上清液。

• 使用完全培养基重悬DH82细胞，将细胞悬液转移至含6-8 mL完全培养基的T25培养瓶中。

• 将培养瓶置于37°C培养箱中，培养过夜，并在第二天观察DH82细胞的生长情况。

DH82细胞传代步骤

• 当DH82细胞密度达到80%-90%时，可以进行传代操作：

• 弃去培养上清液，用无钙镁PBS洗涤DH82细胞1-2次。

• 加入2 mL消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），将DH82细胞置于37°C培养箱中消化1-2分钟，观察细胞是否大部分脱落。

• 细胞脱落后，轻敲培养瓶，加入3-4 mL含10% FBS的培养基终止消化反应。

• 轻轻混匀后，将DH82细胞悬液在1000 RPM下离心3-5分钟，弃去上清液。

• 用新鲜完全培养基补充至1-2 mL，轻轻吹匀。按1:2或1:3的比例分配至新的T25培养瓶中，并添加6-8 mL完全培养基。

DH82细胞冻存步骤

• 在冻存前，弃去细胞培养基，并用PBS洗涤一次。

• 加入1 mL胰蛋白酶，待DH82细胞脱落后，加入1 mL含血清的培养基终止消化。

• 在1000 RPM下离心4分钟，弃去上清液。

• 将DH82细胞重悬于适量血清和DMSO（终浓度为10%）中，确保每支冻存管中细胞密度不低于1x10^6/mL，每支冻存管冻结1 mL细胞悬液，并进行标记。

• 将冻存管置于程序降温盒中，在-80°C冰箱中保存至少2小时后，转入液氮中长期保存。

注意事项

• 换液频率：每周更换培养基2-3次，以保持DH82细胞良好的生长环境。

• 传代比例：根据DH82细胞的生长情况，推荐传代比例为1:2至1:4。