
kg-1细胞(人急性骨髓性白血病细胞)
- 来源:急性髓系白血病
- 细胞特征:悬浮细胞, 原粒细胞
- 培养基:培养条件 1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:在佛波酯存在下,kg-1细胞可以分化为巨噬细胞,并对集落刺激因子(CSF)表现出良好的反应
KG-1细胞是由H.P. Koeffler和D.W. Golde建立的人急性骨髓性白血病细胞系,源自59岁白人男性(起初患有红白血病,后演变为急性粒细胞性白血病)的骨髓抽取物。
KG-1细胞在形态上表现急性髓性白血病特征,以多形性为主,骨髓母细胞和骨髓细胞占主要部分,少量为成熟的粒细胞和少数巨噬细胞及嗜曙红细胞。
KG-1细胞的染色体接近二倍体,2S组分占1.8%。在大多数中期分裂相中,五个标志物(组成型标志物)较为常见。模态染色体数目为47(或46加上一个小于G1组的中心染色体),正常染色体5、7、8、12和17为单体,其他染色体为二体。在Q带制剂中可以检测到Y染色体。
kg-1细胞特性
kg-1细胞形态上类似急性髓原白血病,表现为明显的多形性。
在佛波酯存在下,kg-1细胞可以分化为巨噬细胞,并对集落刺激因子(CSF)表现出良好的反应。
kg-1细胞系适用于癌症、免疫学和毒理学研究,同时也是转染宿主的理想选择。
抗原表达包括HLA A30、A31、B35、Cw4。
基因表达为HLA DR。
kg-1细胞系为EBNA阴性(EBNA-)。
同工酶表达包括AK-1(0)、ES-D(1)、G6PD(B)、GLO-I(2)、Me-2(1)、PGM1(1-2)、PGM3(0)。
kg-1细胞参数表
细胞名称 | kg-1细胞(人急性骨髓性白血病细胞) |
细胞别称 | KG1 |
来源 | 急性髓系白血病;男性;59岁 |
细胞形态 | 原粒细胞 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 悬浮细胞 |
生物安全等级 | 1 |
完全培养基 | IMDM + 20% FBS + 1% P/S |
培养环境 | 37℃,5% CO2,饱和湿度 |
冻存条件 | 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO;液氮 |
传代方法 | 补充新鲜培养基或离心换液(1200 rpm,离心3分钟) |
传代比例 | 1:2-1:3 |
换液频次 | 2-3次/周 |
倍增时间 | ~38小时 |
细胞数量 | >1×10^6 个/mL |
污染检测 | 支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 |
基因表达 | HLA DR |
抗原表达 | HLA A30、A31、B35、Cw4 |
同工酶 | AK-1, 0; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 2; Me-2, 1; PGM1, 1-2; PGM3, 0 |
染色体数目 | 模态染色体数为47(或46加上一个比G1组染色体小的小的中心染色体) |
细胞特性 | 多形性显著,骨髓母细胞和骨髓细胞占优势,少量成熟粒细胞、微量巨噬细胞和嗜曙红细胞 |
研究应用 | 癌症、免疫学和毒理学研究,合适的转染宿主 |
其他特性 | 在佛波酯存在下可分化为巨噬细胞,对集落刺激因子(CSF)有良好反应,EBNA阴性(EBNA-) |
收录 | ATCC |
培养教程
kg-1人急性骨髓性白血病细胞培养教程
KG-1细胞复苏
迅速将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中摇晃解冻。
将解冻后的KG-1细胞悬液加入到含有4-6mL完全培养基的离心管中,混合均匀。
在1000 RPM条件下离心3-5分钟,弃去上清液,用完全培养基重悬KG-1细胞。
将KG-1细胞悬液加入到含有6-8mL完全培养基的培养瓶(或培养皿)中,37℃培养过夜。
第二天显微镜下观察KG-1细胞生长情况和细胞密度。
KG-1细胞传代
当KG-1细胞密度达到80%-90%时,即可进行传代。
将悬浮状态下的KG-1细胞收集到离心管中,1000 RPM离心5分钟,弃去上清液。
按照2-4×10^5个/mL的密度用新鲜培养基重悬KG-1细胞,将细胞悬液按1:2至1:4的比例分到新的T25瓶中,添加6-8mL新鲜培养基。
每间隔2-3天更换培养基或进行传代。
KG-1细胞冻存
收集KG-1细胞并进行计数,确定冻存密度为1×10^6至1×10^7个活细胞/mL。
1000 RPM离心3-5分钟,去除上清液,用70%IMDM+20%FBS+10%DMSO冻存液重悬KG-1细胞。
将KG-1细胞悬液分配到冻存管中,每管1mL,标记好名称、代数和日期。
将冻存管置于程序降温盒中,-80℃冰箱中过夜,然后转入液氮中储存。
注意事项
KG-1细胞冻存复苏后的24小时内存活率可能降至50%以下,可见细胞间隙大量碎片,这是正常现象。
定期检查KG-1细胞状态,确保无支原体污染,细胞生长正常。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 7 |
D2S1338 | 20,23 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 13 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 13,14 (ATCC=CCL-246; ATCC=CRL-8031; CLS=300208; PubMed=17254797; PubMed=25877200) |
14 (DSMZ=ACC-14) | |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 10,11 (ATCC=CCL-246; ATCC=CRL-8031; Cosmic-CLP=907278; DSMZ=ACC-14; ECACC=86111306; JCRB=JCRB0065; JCRB=JCRB9051; KCLB=10246; PubMed=17254797; PubMed=25877200; RCB=RCB1166) |
11 (CLS=300208) | |
D18S51 | 10,18 (PubMed=17254797) |
10.2,18 (ATCC=CCL-246; ATCC=CRL-8031; CLS=300208; PubMed=25877200) | |
11,18 (DSMZ=ACC-14) | |
D19S433 | 11,16.2 (ATCC=CCL-246; ATCC=CRL-8031) |
11,17 (DSMZ=ACC-14) | |
D21S11 | 28,29 |
FGA | 22 |
Penta D | 8,9 |
Penta E | 7,13 |
TH01 | 7,8 |
TPOX | 7,9 |
vWA | 14,19 |
参考文献
- 开心散含药血清对皮质酮所致CTX TNA2细胞损伤的保护作用 《神经药理学报》 2014年06期
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