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hfob 1.19细胞(人SV40转染成骨细胞)货号:STM-CL-5166 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

hfob 1.19细胞(人SV40转染成骨细胞) (暂不提供)

  • 来源:成骨细胞;SV40转化,条件永生
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 梭形细胞
  • 培养基:生长培养基:DMEM/F12+0.3mg/mL G418+10% FBS+1% P/S
  • 其他:hfob 1.19细胞永生化方式为SV40大T抗原转化
价格:¥ 1,500.00
提供STR鉴定报告

hfob 1.19细胞(人SV40转染成骨细胞)是在0.6 mg/mL G418存在下,通过用温度敏感表达载体pUCSVtsA58和新霉素抗性表达载体pSV2-neo转染从自发流产获得的肢体组织而建立的成骨细胞系。

hfob 1.19细胞特性

  • hfob 1.19细胞提供了同质、快速增殖的模型系统,用于研究正常人成骨细胞分化、成骨细胞生理学等。

  • hfob 1.19细胞永生化方式为SV40大T抗原转化。

  • hfob 1.19细胞是二倍体(43%)和四倍体(57%)。

  • 抗原表达:SV40 T抗原。

  • 基因表达:碱性磷酸酶。

  • 在允许温度33.5°C下生长,表现出快速的细胞分裂(加倍时间36小时),在39.5°C的限制温度下几乎没有细胞分裂,加倍时间为96小时。

  • hfob 1.19细胞具有分化为表达正常成骨细胞表型的成熟成骨细胞能力。在限制性温度下,细胞分裂减慢,分化增加,并产生更成熟的成骨细胞表型。

  • 引种自ATCC CRL-11372。

hfob 1.19细胞参数表

细胞名称hFOB 1.19
细胞别称hFOB1.19; hFOB
细胞类型人SV40转染成骨细胞
细胞来源自然流产的胎儿四肢组织
转染载体温度敏感表达载体pUCSVtsA58,新霉素抗性表达载体pSV2-neo
选择剂0.6 mg/mL G418
形态成骨细胞样
生长特性贴壁生长
分裂时间在33.5℃下约36小时,在39.5℃下约96小时
分化特性在限制温度下(39.5℃)分化增加,生成更成熟的成骨细胞表型
永生化方法SV40大T抗原转化
抗原表达SV40 T抗原
基因表达碱性磷酸酶
倍体二倍体(43%),四倍体(57%)
生长特性在33.5°C下快速生长(加倍时间36小时),在39.5°C下几乎无细胞分裂(加倍时间96小时)
培养基Alpha MEM(Minimum Essential Medium)+0% FBS(胎牛血清)+0.6 mg/mL G418
培养温度33.5℃(许可温度),39.5℃(限制温度)
细胞传代传代比率:1:4到1:8
消化液0.25% 胰蛋白酶-EDTA溶液
冻存条件90% FBS + 10% DMSO
应用领域成骨细胞分化和生理学,激素和生长因子对成骨细胞功能及分化的影响
模型系统提供同质、快速增殖的模型系统,用于研究正常人成骨细胞
特殊说明在培养过程中需要注意温度变化对细胞生长和分化的影响
来源机构ATCC CRL-11372

培养教程

hfob 1.19细胞培养教程

复苏细胞步骤

  • 将含有1mL hFOB 1.19细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。

  • 加入5mL预热的培养基混合均匀。

  • 在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液。

  • 补加4-6mL培养基后轻轻吹打使细胞悬浮。

  • 将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中)。

  • 第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代步骤

  • 当hFOB 1.19细胞密度达80%-90%时,即可进行传代培养。

  • 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

  • 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟。

  • 在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速取回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml含10%血清的培养基终止消化。

  • 轻轻吹打细胞,使细胞完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液。

  • 补加1-2mL培养基后轻轻吹打使细胞悬浮。

  • 按5-6ml/瓶补加培养基,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养基的新皿中或者瓶中。

收到细胞后处理

  • 若客户收到2ml小管hFOB 1.19细胞,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作。

  • 将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右培养基混匀,放入培养箱过夜培养。

  • 次日查看细胞密度:

  • 若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。

  • 若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。

相关资料

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STR鉴定及相关

AmelogeninX
CSF1PO10,13
D2S133823,24
D3S135817,18
D5S81811,12
D6S104313,16
D7S8208,10
D8S117910,14
D12S39120,23
D13S31711,12
D16S5399,13
D18S5110,17
D19S43313,15
D21S1129,32.2
FGA19,22
Penta E8,11
TH017,9.3
TPOX11
vWA16,18

参考文献

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