MOLM-13细胞（人急性髓性白血病细胞）

MOLM-13细胞系来源于一位20岁男性急性髓系白血病（AML）患者的外周血样本。该患者最初被诊断为骨髓增生异常综合征（MDS），具体为难治性贫血伴幼稚细胞过多（RAEB），并于1995年复发，诊断为FAB M5a型急性髓系白血病。

MOLM-13细胞具有悬浮生长特性，形态上接近淋巴样母细胞。MOLM-13细胞系在体外培养时经过鉴定，能够保持稳定生长，且广泛应用于急性髓系白血病的基础研究和药物筛选中。特别是由于其携带FLT3突变，该细胞系常被用于FLT3靶向治疗的相关研究。MOLM-13细胞系的外显子组和RNA测序数据已公开，可为AML相关的分子机制和治疗策略研究提供参考。MOLM-13细胞系在急性髓系白血病病理研究和药物开发中占据重要地位。

MOLM-13细胞特性特征

• FLT3基因突变：MOLM-13细胞携带FLT3基因的内部重复序列（FLT3-ITD），这是一种常见于AML患者的突变类型。此突变导致FLT3在无配体存在的情况下自体磷酸化，从而异常激活下游信号通路，促进白血病细胞的增殖和存活。

• FLT3蛋白表达：尽管携带FLT3基因内部串联重复突变，MOLM-13细胞不表达FLT3蛋白。

• CBL基因突变：MOLM-13细胞系存在CBL基因的外显子8缺失突变（CBLδExon8突变体）。与MOLM-14细胞系（ACC 777）为姊妹细胞系。

• 基因特征：FLT3基因位于人类染色体13q12，包含24个外显子。其编码的FLT3蛋白为Ⅲ型受体酪氨酸激酶，参与造血干细胞的增殖、分化和存活。研究表明，FLT3-ITD突变与AML患者的不良预后相关

MOLM-13细胞参数表

MOLM-13人急性髓性白血病细胞培养教程

MOLM13细胞复苏

• 将水浴锅预热至37℃。
  

• 准备完全培养基：90% RPMI-1640培养基 + 10%胎牛血清（FBS）。

• 从液氮中取出MOLM13细胞冻存管，迅速放入37℃水浴中解冻，轻轻摇晃，确保细胞在1-2分钟内完全融化。
  

• 解冻后，立即将MOLM13细胞悬液转移到含有4 mL预温完全培养基的无菌离心管中，轻轻混合均匀。

• 以1000 rpm离心3分钟，去除上清。
  

• 用无菌PBS清洗MOLM13细胞一次，弃去PBS后再加入1-2 mL完全培养基，轻轻吹打混匀细胞悬液。

• 将MOLM13细胞悬液转移至T25培养瓶中，补充8 mL完全培养基，放入37℃、5% CO₂培养箱中，静置培养过夜。
  

MOLM13细胞培养

• 培养基：RPMI-1640培养基（90%）+ FBS（10%）+ 青霉素-链霉素抗生素（PS）。
  

• 培养环境：37℃恒温培养箱，95%空气和5% CO₂的气相环境。

• 复苏后第二天检查MOLM13细胞状态，观察细胞的生长情况及是否有污染现象。
  

• 若MOLM13细胞密度达到80%-90%，需及时进行传代。

MOLM13细胞传代

• 当MOLM13细胞密度达到80%-90%时，可以进行传代操作。MOLM13细胞系为悬浮生长，易于收集。
  

• 推荐传代比例为1:2或1:3。根据细胞生长情况，可将一个T25瓶的MOLM13细胞分成2-3个新T25瓶。
  

• 将培养的MOLM13细胞收集至无菌离心管中，1000 rpm离心3-5分钟。
  

• 去除上清后，用新鲜培养基重悬MOLM13细胞。按1:2或1:3的比例将细胞悬液分配到新的培养瓶中，补充8 mL完全培养基。

• 传代时必须使用新制备的培养基，运输过程中使用的培养基不可继续用于MOLM13细胞培养。
  

• 由于温度变化或运输过程中的机械振动，部分MOLM13细胞可能会死亡或破裂，这是正常现象。

MOLM13细胞冻存

• 收集生长状态良好的MOLM13细胞，将其离心（1000 rpm，4分钟），去除上清液。
  

• 用PBS清洗MOLM13细胞一次，随后进行细胞计数。

• 按照5 x 10⁶至1 x 10⁷个MOLM13细胞/mL的浓度配制细胞悬液。使用冻存液（无血清培养基+10%DMSO）重悬MOLM13细胞，每管1 mL细胞悬液，标明细胞系、日期及细胞浓度。
  

• 将MOLM13细胞冻存管放入-80℃冰箱进行初步冷冻24小时，随后转移至液氮中长期保存。
  

• MOLM13细胞冻存后建议尽快复苏一支，检测细胞活力。如果冻存后的MOLM13细胞存活率偏低，需要及时调整冻存液配方或冻存步骤。